鼠尾膠原膠凝程序:膠原蛋白I按以下步驟使其pH達(dá)到堿性時(shí)凝膠。1)將無(wú)菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養(yǎng)皿的蓋子上來(lái)制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和,把蓋子放在150mm的培養(yǎng)皿上,暫放置一邊。2)將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上,厚度可以根據(jù)需要改變,膠原蛋白I(50-100μL)足以涂覆22mm的蓋玻片。對(duì)于直徑100mm的培養(yǎng)皿,每個(gè)加入約6mL;對(duì)于60mm培養(yǎng)皿添加約2.3mL,對(duì)于35mm培養(yǎng)皿添加約1mL。3)將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到氨蒸氣室并暴露三分鐘。4)在無(wú)菌蒸餾水中(35mm培養(yǎng)皿加5mL,60mm培養(yǎng)皿加10mL等)浸泡涂布的蓋玻片或培養(yǎng)皿30min。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0mL無(wú)菌蒸餾水,放置在層流罩中過(guò)夜。5)吸出蒸餾水,用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C。取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘。濟(jì)南鼠尾膠原哪家便宜
膠原蛋白按其應(yīng)用可以分為食品級(jí)、一般級(jí)、醫(yī)藥級(jí)。食用膠原一般來(lái)源于動(dòng)物的真皮、肌腱和骨膠原.其中皮膠原是主要的食用膠原。食用級(jí)膠原通常外觀為白色,口感柔和,味道清淡,易消化。膠原的獨(dú)特品質(zhì).使得它在許多食品中用作功能物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)成分,具有其它替代材料無(wú)可比擬的優(yōu)越性:①膠原大分子的螺旋結(jié)構(gòu)和存在結(jié)晶區(qū).使其具有一定的熱穩(wěn)定性;②膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度,適用于薄膜材料的制備;③大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨(dú)特之處是:在熱處理過(guò)程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒(méi)被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì)。昆明正規(guī)鼠尾膠原銷售廠家探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。
鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用,同時(shí)它也是一種天然的黏附劑,當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,制備細(xì)胞爬片時(shí),可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可掌握鼠尾膠原的制備方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾膠原將其固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料:大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養(yǎng)瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1、制備鼠尾膠原。2、切割小玻片。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法。各個(gè)材料及其重量配比為鼠尾膠原蛋白∶聚乙烯醇∶殼聚糖為余量為水,采用冷凍干燥工藝制備。本發(fā)明所制備的止血材料主要采用鼠尾膠原蛋白制備,較傳統(tǒng)的止血材料不可吸收、容易引起機(jī)體過(guò)敏、止血效果差等缺點(diǎn),本發(fā)明所制備的止血材料具有人體內(nèi)可吸收,生物相容性好;止血效果快,具有很強(qiáng)的親水性;同時(shí)可啟動(dòng)血小板的凝聚,一旦血小板凝聚,就可形成血栓,進(jìn)而促使血漿結(jié)塊阻止血流。同時(shí),膠原表面的特定區(qū)域可以與細(xì)胞表面存在的類似纖連蛋白的糖蛋白結(jié)合,可以起到防止腸粘連的功效。一種基于鼠尾膠原蛋白:根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料。
鼠尾膠原簡(jiǎn)介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無(wú)菌下制備,純度達(dá)到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無(wú)菌檢驗(yàn)結(jié)果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,貼壁及生長(zhǎng)正常。4、本品濃度1mg/mL,pH7.0時(shí)形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠,NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長(zhǎng)正常、PC-12細(xì)胞在三維凝膠表面生長(zhǎng)正常。通常情況下骨質(zhì)總量中的鈣、鎂、磷等無(wú)機(jī)物質(zhì)光占總量的百分之幾而膠原蛋白等有機(jī)物質(zhì)卻要占超過(guò)80%。石家莊正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商
加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。濟(jì)南鼠尾膠原哪家便宜
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血的優(yōu)點(diǎn):1、本發(fā)明制作的止血材料采用溫和的冷凍干燥操作工藝不光光提高了生產(chǎn)效率,同時(shí)避開了使用其他設(shè)備帶來(lái)的成本上升問(wèn)題。2、本發(fā)明專利生產(chǎn)的止血材料(止血海綿),其動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明其具有非常好的止血效果。也可應(yīng)用于內(nèi)臟出血。具有廣闊的應(yīng)用前景。3、本發(fā)明制備的止血材料具有可完全被人體吸收,與出血?jiǎng)?chuàng)面一接觸,其接觸面迅速形成凝膠而粘附在出血?jiǎng)?chuàng)面上,外面則形成連續(xù)的壓迫干層。啟動(dòng)凝血因子。同時(shí),聚乙烯醇為成膜材料,兩種的協(xié)同效應(yīng)形成了一種理想的止血狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。濟(jì)南鼠尾膠原哪家便宜
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。B.含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到(如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入23ul10PBS10培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,加入適...