經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA：這個(gè)事實(shí)可能會(huì)刷不少新手甚至老手的三觀，但確有實(shí)驗(yàn)支持：經(jīng)典Trizol法會(huì)選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點(diǎn)，源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國(guó)鼎鼎大名的美女科學(xué)家，專做RNA相關(guān)的研究，包括miRNA。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個(gè)奇怪的“現(xiàn)象”，即貼壁細(xì)胞在消化之后，會(huì)有一些miRNA的豐度突然降低，看起來好像是被快速“降解”掉了，并據(jù)此寫了一篇文章發(fā)到MolecularCell上。但很快她們就發(fā)現(xiàn)，這個(gè)“現(xiàn)象”難以重復(fù)：如果用Trizol做實(shí)驗(yàn)，就一定是陽性結(jié)果，而用試劑盒提RNA，就重復(fù)不出來。難道是號(hào)稱能提總RNA的Trizol方案出了問題？確實(shí)如此。經(jīng)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)典的Trizol方案會(huì)使得低GC比的miRNA丟失。細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn)：細(xì)胞質(zhì)RNA不含DNA，直接用于RT-PCR/qRT-PCR。開封RNA提取試劑哪家便宜

常用總RNA提取試劑：異硫氰酸胍法和Trizol法是動(dòng)物組織及動(dòng)物細(xì)胞總RNA提取較常用的方法，異硫氰酸胍法操作簡(jiǎn)單快捷，適用于樣本足夠大的常規(guī)動(dòng)物組織；Trizol法裂解能力較強(qiáng)，尤其適合小樣本及特別難提取的組織，如兔子皮膚，動(dòng)物結(jié)締組織等總RNA的提??；另外Trizol作為一種通用型的裂解試劑，還可以用于植物組織、細(xì)菌、菌類等組織的提取。對(duì)于含多糖多酚的植物組織如油茶、茶葉、油菜等還可以使用CTAB法進(jìn)行總RNA的提取。提取RNA時(shí)我們經(jīng)常遇到的問題是：(1)RNA產(chǎn)量較低；(2)RNA有嚴(yán)重的鹽類污染；(3)RNA有嚴(yán)重的有機(jī)溶劑污染；(4)樣品降解等問題。珠海正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家RNA提取試劑注意事項(xiàng)：為防止濺入眼睛，請(qǐng)戴防護(hù)眼鏡或使用透明保護(hù)屏。

RNA提取濃度不高或質(zhì)量不佳原因及解決辦法：1、得率過低：提取樣本過低總量不足或者提取樣本過多裂解不徹底；應(yīng)當(dāng)使用適當(dāng)質(zhì)量的組織或細(xì)胞進(jìn)行提取，樣本前處理一定要做好，裂解應(yīng)充分。2、基因組殘留：Trizol法提取時(shí)，分層后吸取上清時(shí)吸到中間層會(huì)帶來嚴(yán)重的基因組污染；分層吸取時(shí)應(yīng)當(dāng)格外小心，不要吸取到中間層。如果是采用柱式法提取，可選擇含有DNaseI的試劑盒進(jìn)行提取，吸附在膜上的核酸直接用DNaseI進(jìn)行消化，可極大限度的降低DNA殘留。

RNA是核糖核酸，DNA是脫氧核酸。區(qū)別：紫外吸收：核酸的λm＝260nm，堿基展開程度越大，紫外吸收就越厲害。當(dāng)A＝1時(shí)，DNA：50ug/ml，RNA和單鏈DNA：40ug/ml，寡核苷酸：20ug/ml。用A260/A280還可來表示核酸的純度。沉降速度：對(duì)于拓?fù)洚悩?gòu)體（核苷酸數(shù)目相同的核酸），其沉降速度從達(dá)到小依次為：RNA;超螺旋DNA>解鏈環(huán)狀DNA;松弛環(huán)狀DNA;線形DNA也就是在離心管中較上層是線形DNA，較下面是RNA。電泳：核苷酸、核酸均可以進(jìn)行電泳，泳動(dòng)速度主要由分子大小來決定，因此，電泳是測(cè)定核酸分子量的好方法。DNA分子量測(cè)定較直接的方法：用適當(dāng)濃度的EB（溴嘧啶）染色DNA，可以將其他形式的DNA變成線形DNA，用電鏡測(cè)出其長(zhǎng)度，按B-DNA模型算出bp數(shù)，根據(jù)核苷酸的平均分子量就可計(jì)算出DNA的分子量?？俁NA提取試劑：自備新開封或?qū)ｉT氯仿，異丙醇，75%乙醇，DEPC處理水。

細(xì)胞RNA提取的方法：實(shí)驗(yàn)提取步驟：標(biāo)準(zhǔn)Trizol提取步驟為液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心。將細(xì)胞培養(yǎng)皿置于冰上，加入Trizol裂解5-10分鐘，用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進(jìn)口EP管中。加入1/5體積的氯仿，上下混勻液體，4度靜置10-15分鐘。（氯仿為有機(jī)溶劑，有效的使有機(jī)相和無機(jī)相迅速分離。有機(jī)相中主要是酚和蛋白結(jié)合，從而使得蛋白和RNA脫離，RNA進(jìn)入水相）。4度離心15分鐘，一定注意選擇低溫離心。離心后分成三層，RNA在上清里，從離心機(jī)輕輕拿出EP管，以免管內(nèi)物質(zhì)震蕩導(dǎo)致下層沉淀激起。吸取上清的時(shí)候一定要?jiǎng)幼鬏p柔，切忌吸取太多，一般吸到400-500ul，避免吸到下層沉淀，將液體置于新的EP管中。加入等體積異丙醇，4度靜置10min，然后12000rpm離心10min。RNA提取試劑注意事項(xiàng)：間層用乙醇沉淀可回收DNA。南昌RNA提取試劑廠家直銷

好的試劑盒價(jià)格比較貴，在實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要來定奪試劑盒的使用。開封RNA提取試劑哪家便宜

多糖多酚植物RNA提取試劑盒專門針對(duì)多糖，多酚等難提的植物RNA樣本提取設(shè)計(jì)，至今為止未發(fā)現(xiàn)不能攻克的樣本（棉花，番茄，板栗，龍眼，荔枝，葡萄，針葉植物，百合，獼猴桃，香蕉，甘蔗，海棠，蘋果，銀杏，小麥，水稻，玉米等農(nóng)作物，果實(shí)，花卉，蔬菜等多糖多酚，色素等次級(jí)代謝物嚴(yán)重的植物樣本，全部攻克）。絕無DNA污染，可直接反轉(zhuǎn)錄，熒光定量，不會(huì)出現(xiàn)其他公司試劑盒中出現(xiàn)的洗脫液含絡(luò)合Mg離子成分，壓制后續(xù)PCR反應(yīng)的情況。本試劑盒提取的RNA可直接用于對(duì)前期RNA提取質(zhì)量非常高的后續(xù)實(shí)驗(yàn)，如轉(zhuǎn)錄組RNA測(cè)序，制作基因芯片，熒光定量PCR，核酸雜交，反轉(zhuǎn)錄等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)。一個(gè)樣十多分鐘搞定！具有世界品質(zhì)的植物RNA試劑盒！開封RNA提取試劑哪家便宜