無血清細胞凍存液凍存細胞實驗步驟：選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復(fù)蘇細胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。（參考：5×105至5×106cells/ml）。3.取相當(dāng)于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細胞混合液。5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。7.若研究者需要液氮保存時，可將完全凍結(jié)的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能：提高細胞存活率和活力，亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。天津無血清細胞凍存液哪里買

無血清細胞凍存液：產(chǎn)品優(yōu)勢：1.化學(xué)成分明確，無任何外源蛋白和血清，適用于各類動物細胞株凍存。2.無需程序降溫，細胞復(fù)蘇率90%以上。3.凍存細胞可直接存放于-80℃冰箱，穩(wěn)定保存數(shù)年。4.即用型產(chǎn)品，4℃可穩(wěn)定保存。細胞凍存：1.收集融合率>90%的對數(shù)期的貼壁細胞或者懸浮細胞于離心管中。2.1000rmp離心5分鐘，去除離心管中的上清液，收集細胞沉淀。3.加入適量細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為1x106～1x107cells/mL。頭輕柔吹打混勻,Z成細胞懸液。4.將離心管中的細胞懸液分裝與細胞凍存管中，每管1mL或1.5mL。5.將分裝好的細胞直接凍存于-80℃冰箱中，可穩(wěn)定凍存數(shù)年。6.如若長期保存，可在次日轉(zhuǎn)移至液氮中。天津無血清細胞凍存液哪里買無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色：成分明確，無批次差異。

無血清細胞凍存液：產(chǎn)品介紹：無血清細胞凍存液是一款針對細胞凍存和復(fù)蘇所研發(fā)的即用型細胞凍存液。該凍存液采用獨特的凍存配方，包括DMSO在內(nèi)的凍存保護劑復(fù)合物，**降低了細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷。凍存液中添加了葡萄糖，氨基酸等各種細胞營養(yǎng)成分，***提高了細胞的活力和復(fù)蘇率。無血清細胞凍存液不含牛血清，無任何動物源組分，可維持干細胞低分化狀態(tài)，并且可減少各類***和支原體污染的風(fēng)險，確保細胞凍存安全。與傳統(tǒng)細胞凍存液相比，本產(chǎn)品重懸細胞后可直接凍存于-80℃，無需程序降溫。

無血清細胞凍存液細胞凍存步驟：1.常規(guī)方法收集對數(shù)期的貼壁細胞或懸浮細胞于試管中。2.確認所需凍存的細胞數(shù)量。3.將所需凍存細胞收集于離心管中，1000rpm，5min離心，收集細胞沉淀，并棄掉上清液。4.加入適量的凍存液于離心管中，加入量按照細胞保存濃度為5X105至1X107/ml密度，輕柔的混勻細胞，獲取細胞混合液。5.將獲取的細胞混合液按照1~1.5ml/管，分裝于凍存管中。6.將凍存管直接放入-80℃保存，可長期保存。無血清細胞凍存液，通用于各種動物細胞系及tumour細胞系。特別的配方能有效提高細胞存活率和復(fù)蘇能力。不含血清，無病毒、霉菌和支原體等微生物污染，確保凍存細胞安全。非常適用于無血清細胞培養(yǎng)和蛋白表達細胞的凍存。無血清凍存液特性：適合無血清培養(yǎng)細胞與含血清培養(yǎng)細胞。

無血清細胞凍存液，細胞凍存與復(fù)蘇后，平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較，BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表，BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養(yǎng)的細胞凍存。復(fù)蘇細胞：1.將細胞凍存管由液態(tài)氮中取出，置于37度水浴快速溶解回溫。此時可準(zhǔn)備培養(yǎng)基、無菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶。2.于生物安全柜內(nèi)，直接以少量培養(yǎng)基反復(fù)沖融，使細胞團塊化凍。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基，再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g，3分鐘離心收集細胞。4.倒去上清液，以新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。5.隔天更換新鮮培養(yǎng)基，并觀察細胞存活狀況。凍存要求發(fā)生改變，因為凍存細胞要進行臨床應(yīng)用。天津無血清細胞凍存液哪里買

無血清細胞凍存液的優(yōu)勢：可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細胞凍存時可節(jié)省篩選過程。天津無血清細胞凍存液哪里買

細胞凍存液的作用是什么？滲透性冷凍保護劑：可以滲透到細胞內(nèi)，一般是一些小分子物質(zhì)，主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。非滲透性冷凍保護劑：不能滲透到細胞內(nèi)，一般是些大分子物質(zhì)，主要包括聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及Hetastarch等。冷凍保護劑同溶液中的水分子結(jié)合，發(fā)生水合作用，弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成，同時冷凍保護劑可以通過在細胞內(nèi)外維持一定的摩爾濃度，降低細胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，使細胞免受溶質(zhì)的損傷。滲透性冷凍保護劑的保護機制是在細胞冷凍懸液完全凝固之前，滲透到細胞內(nèi)，在細胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度，降低細胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，從而保護細胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷同時。細胞內(nèi)水分也不會過分外滲，避免了細胞過分脫水皺縮。天津無血清細胞凍存液哪里買