鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:兩組培養(yǎng)皿中,隨著過(guò)氧化氫濃度的增高,均可見細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯加重,細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫活力明顯下降,細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性。而在相同濃度過(guò)氧化氫誘導(dǎo)下,與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯減弱,細(xì)胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高,細(xì)胞凋亡率和丙二醛水平明顯減低。表明鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫所致的心肌細(xì)胞氧化損傷具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能與提高超氧化物歧化酶活力,減少丙二醛產(chǎn)生及提高Bcl-2的表達(dá)有關(guān)。制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。溫州正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
鼠尾膠原蛋白I型,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌。在2-8度中放置過(guò)夜。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜。5.從包被表面除去多余的液體。過(guò)夜干燥。如果膠原溶液不是無(wú)菌的,這時(shí)候可以在無(wú)菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過(guò)夜消毒。在接種細(xì)胞前用無(wú)菌的水漂洗。南昌鼠尾膠原哪家便宜將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié)。目前,臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中,人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無(wú)機(jī)礦物材料[1-2],由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白,其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自體骨組織。但是,自體骨移植和同種異體骨移植均來(lái)源于人類自身骨組織,數(shù)量有限,難以滿足臨床需要。因此,研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo)。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物,在分子結(jié)構(gòu)上,羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板,呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙,沿著膠原纖維的長(zhǎng)軸縱向礦化生長(zhǎng)[3]。本研究仿生天然骨組織的分子結(jié)構(gòu),酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原蛋白,重構(gòu)形成Ⅰ型膠原纖維,然后將Ⅰ型膠原纖維放置在礦化液中模擬人體內(nèi)骨生物礦化,通過(guò)透射電子顯微鏡(TEM)和電子衍射觀察羥基磷灰石鈣晶體在膠原纖維內(nèi)部的骨生物礦化。
膠原蛋白按其應(yīng)用可以分為食品級(jí)、一般級(jí)、醫(yī)藥級(jí)。食用膠原一般來(lái)源于動(dòng)物的真皮、肌腱和骨膠原.其中皮膠原是主要的食用膠原。食用級(jí)膠原通常外觀為白色,口感柔和,味道清淡,易消化。膠原的獨(dú)特品質(zhì).使得它在許多食品中用作功能物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)成分,具有其它替代材料無(wú)可比擬的優(yōu)越性:①膠原大分子的螺旋結(jié)構(gòu)和存在結(jié)晶區(qū).使其具有一定的熱穩(wěn)定性;②膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度,適用于薄膜材料的制備;③大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨(dú)特之處是:在熱處理過(guò)程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒(méi)被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì)。一種基于鼠尾膠原蛋白:各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?% 2% 1%,余量的水。
蘇州君欣生物科技有限公司鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠,模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境,使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。不開玩笑的說(shuō),本身高純度的鼠尾膠原蛋白是能吃的。但是,實(shí)驗(yàn)室里制備出來(lái)的各種材料和原材料都不應(yīng)該被食用,實(shí)驗(yàn)室也是禁食的。這是傳說(shuō)中的制作方法:面對(duì)大家都感興趣的知識(shí),智圈始終抱著嚴(yán)謹(jǐn)且專業(yè)的態(tài)度,決心找出科學(xué)的制作方法。吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克)。長(zhǎng)沙正規(guī)鼠尾膠原廠家供應(yīng)
利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物,該模型是進(jìn)行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ)。溫州正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)將無(wú)組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用;(2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目;(3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,期間不斷攪拌,防止凍結(jié)成塊,得到膠原溶脹液;(4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50:I?100:1,在4°C,48?74小時(shí)酶解,期間間歇性攪拌。溫州正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。B.含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到(如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入23ul10PBS10培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,加入適...