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企業(yè)商機(jī)
RNA提取試劑基本參數(shù)
  • 產(chǎn)地
  • 蘇州
  • 品牌
  • RNA提取試劑
  • 型號(hào)
  • 齊全
  • 是否定制
RNA提取試劑企業(yè)商機(jī)

昆蟲(chóng)RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會(huì)影響RNA的使用。將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。實(shí)驗(yàn)者只需要按照說(shuō)明書(shū)上的步驟操作即可。使用時(shí)無(wú)需配制其它試劑,非常方便,適合于RNA的快速提取。寧波RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

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法爾和梅洛的發(fā)現(xiàn)??茖W(xué)家在矮牽?;▽?shí)驗(yàn)中所觀察到的奇怪現(xiàn)象,其實(shí)是因?yàn)樯矬w內(nèi)某種特定基因“沉默”了。導(dǎo)致基因“沉默”的機(jī)制就是RNA干擾機(jī)制。此前,RNA分子只是被當(dāng)作從DNA(脫氧核糖核酸)到蛋白質(zhì)的“中間人”、將遺傳信息從“藍(lán)圖”傳到“工人”手中的“信使”。但法爾和梅洛的研究讓人們認(rèn)識(shí)到,RNA作用不可小視,它可以使特定基因開(kāi)啟、關(guān)閉、更活躍或更不活躍,從而影響生物的體型和發(fā)育等。諾貝爾獎(jiǎng)評(píng)審會(huì)在評(píng)價(jià)法爾和梅洛的研究成果時(shí)說(shuō):“他們的發(fā)現(xiàn)能解釋許多令人困惑、相互矛盾的實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果,并揭示了控制遺傳信息流動(dòng)的自然機(jī)制。這開(kāi)啟了一個(gè)新的研究領(lǐng)域?!碧K州RNA提取試劑直銷(xiāo)價(jià)純的RNA用RE緩沖液洗脫,不用酚提取或醇沉淀。

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細(xì)胞RNA提取的方法:異丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以見(jiàn)到側(cè)壁沉淀,輕輕吸棄上清。向EP管中加入75%酒精洗滌沉淀,幫助分離剩余的有機(jī)試劑(剩余有機(jī)試劑過(guò)多會(huì)影響OD值和PCR反應(yīng)),輕彈沉淀,使其浮在酒精,靜置1-2min,讓酒精充分接觸沉淀,充分溶解有機(jī)試劑,然后4度離心5min。輕輕吸棄上清。將EP管再次放于離心機(jī)中瞬時(shí)離心,棄掉管壁殘余液體。然后將EP管置于超凈臺(tái)中干燥5-10min.。注意RNA樣品不要過(guò)于干燥,否則很難溶解。加入50ulDEPC處理水,震蕩充分溶解沉淀。測(cè)量RNA濃度。將RNA保存于-80度。

動(dòng)物細(xì)胞RNA提取:1、懸浮細(xì)胞:可直接離心后棄掉培養(yǎng)基,用無(wú)菌PBS清洗1~2遍后,再用適量PBS懸浮起來(lái),然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬(wàn)不要完全棄掉液體后,往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液,這樣會(huì)使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè),從而限制沉淀內(nèi)部的細(xì)胞與裂解液的接觸,從而導(dǎo)致細(xì)胞裂解不徹底,降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細(xì)胞:棄掉培養(yǎng)基后,用PBS洗1~2次,然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿,把細(xì)胞吹下來(lái),轉(zhuǎn)移到無(wú)RNA酶的EP管中,加裂解液進(jìn)行提取。3、貼壁細(xì)胞:需要先用胰酶消化,然后收集到無(wú)RNA酶的EP管中,離心去其上清,用PBS洗1~2次,去除多余的胰酶,以適量PBS重懸后繼續(xù)進(jìn)行提取步驟。專(zhuān)門(mén)的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團(tuán)結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上,同時(shí)使污染物通過(guò)柱被有效地洗去。

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RNA提取試劑的選擇:對(duì)于富含多糖多酚的植物類(lèi)組織提取是個(gè)難點(diǎn),Takara精心研發(fā)的柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以輕松解決這個(gè)問(wèn)題。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地從各種簡(jiǎn)單的植物組織材料(葉片、莖、幼苗等)、富含多糖多酚的植物組織材料(果實(shí)、種子等)、菌類(lèi)提取高純度的TotalRNA,適用范圍普遍。按照標(biāo)準(zhǔn)流程,本試劑盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可選步驟提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA。試劑盒中包含了RNA提取所需的全部試劑,無(wú)需額外購(gòu)買(mǎi)其它試劑~血漿/血清RNA提取試劑盒:總RNA吸附柱保證RNA提取速度快,提取效率高。寧波RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采用變性劑即內(nèi)含異硫氰酸胍酚和β-巰基乙醇等變性物質(zhì)。寧波RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

常用總RNA提取試劑:異硫氰酸胍法和Trizol法是動(dòng)物組織及動(dòng)物細(xì)胞總RNA提取較常用的方法,異硫氰酸胍法操作簡(jiǎn)單快捷,適用于樣本足夠大的常規(guī)動(dòng)物組織;Trizol法裂解能力較強(qiáng),尤其適合小樣本及特別難提取的組織,如兔子皮膚,動(dòng)物結(jié)締組織等總RNA的提取;另外Trizol作為一種通用型的裂解試劑,還可以用于植物組織、細(xì)菌、菌類(lèi)等組織的提取。對(duì)于含多糖多酚的植物組織如油茶、茶葉、油菜等還可以使用CTAB法進(jìn)行總RNA的提取。提取RNA時(shí)我們經(jīng)常遇到的問(wèn)題是:(1)RNA產(chǎn)量較低;(2)RNA有嚴(yán)重的鹽類(lèi)污染;(3)RNA有嚴(yán)重的有機(jī)溶劑污染;(4)樣品降解等問(wèn)題。寧波RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

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總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見(jiàn)許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上。保存在7...

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