對(duì)于很多科研汪來(lái)說(shuō)，細(xì)胞是脆弱又重要的寶貝之一，承擔(dān)著重要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)希望。尤其是在凍存復(fù)蘇的時(shí)候，經(jīng)常會(huì)因?yàn)橐恍┬〖?xì)節(jié)導(dǎo)致問(wèn)題。比如：沒(méi)有控制好細(xì)胞的生長(zhǎng)密度細(xì)胞的密度對(duì)細(xì)胞的生存質(zhì)量有著重要的影響，畢竟它們是一群又不能擠著了也不能孤獨(dú)的嬌貴寶寶。密度過(guò)高會(huì)讓細(xì)胞沒(méi)有足夠的生存空間，密度過(guò)低會(huì)讓細(xì)胞無(wú)法互相連接健康生長(zhǎng)。建議大家在細(xì)胞接種前，一定要調(diào)整好適合細(xì)胞生長(zhǎng)的濃度，提高細(xì)胞的存活率。溫度控制不達(dá)標(biāo)慢凍快融是細(xì)胞凍存復(fù)蘇的*關(guān)鍵詞之一待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價(jià)

無(wú)血清細(xì)胞凍存液：產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：1.化學(xué)成分明確，無(wú)任何外源蛋白和血清，適用于各類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞株凍存。2.無(wú)需程序降溫，細(xì)胞復(fù)蘇率90%以上。3.凍存細(xì)胞可直接存放于-80℃冰箱，穩(wěn)定保存數(shù)年。4.即用型產(chǎn)品，4℃可穩(wěn)定保存。細(xì)胞凍存：1.收集融合率>90%的對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞于離心管中。2.1000rmp離心5分鐘，去除離心管中的上清液，收集細(xì)胞沉淀。3.加入適量細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度為1x106～1x107cells/mL。頭輕柔吹打混勻,Z成細(xì)胞懸液。4.將離心管中的細(xì)胞懸液分裝與細(xì)胞凍存管中，每管1mL或1.5mL。5.將分裝好的細(xì)胞直接凍存于-80℃冰箱中，可穩(wěn)定凍存數(shù)年。6.如若長(zhǎng)期保存，可在次日轉(zhuǎn)移至液氮中。廣州無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家供應(yīng)將融化后的含細(xì)胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻。

含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問(wèn)題：1.凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購(gòu)買(mǎi)市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液，此步可省略)。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步驟繁瑣，耗時(shí)耗力。3.含血清，細(xì)胞污染(細(xì)菌、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高。4.血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存，且不能原位（如孔板）凍存。Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分，含DMSO、糖類(lèi)、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液的凍存方法是：將細(xì)胞凍存懸液（凍存管或孔板）直接放置-80℃冰箱長(zhǎng)期保存。

細(xì)胞凍存步驟說(shuō)明：配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。去除PBS，加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái);離心1000rpm，5min;去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)存液中細(xì)胞的較終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1~1.5ml;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱(chēng)，凍存時(shí)間及操作者;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。

無(wú)血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。（參考：5×105至5×106cells/ml）。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無(wú)血清型細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細(xì)胞混合液。5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長(zhǎng)期冷凍保存。7.若研究者需要液氮保存時(shí)，可將完全凍結(jié)的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。無(wú)血清凍存液特性：不需回溫，完全即用型。無(wú)錫昆明無(wú)血清細(xì)胞凍存液

無(wú)血清凍存液使用方法：收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞，離心去除上清培養(yǎng)液。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價(jià)

無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液，是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液，可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動(dòng)物來(lái)源的血清成分，能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力，減少各類(lèi)病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全，能夠滿(mǎn)足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求。注意事項(xiàng):請(qǐng)選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行凍存;凍存液加入細(xì)胞后，請(qǐng)盡快放入-80C冰箱凍存;3.本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上;4.若需長(zhǎng)期凍存細(xì)胞，請(qǐng)轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存;凍存液中含DMSO成分，為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價(jià)