RNA提?。侯A備工作RNA酶(Rnase)是導致RNA降解較主要的物質。此酶非常穩(wěn)定,在一些極端的條件下只可暫時失活,但限制因素去除后又迅速恢復活性。常規(guī)高溫高壓滅菌方法和蛋白壓制劑不能使所有的Rnase完全失活。1.它普遍存在于人的皮膚上,因此制備RNA時必須戴手套。2.RNase的又一污染源是取液器。根據取液器制造商的要求對取液器進行處理。一般情況下采用以DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的內部和外部,可基本達到要求。3.塑料制品、玻璃和金屬物品的處理??俁NA提取試劑:適用于植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細胞等樣品中提取總RNA。杭州貴陽RNA提取試劑
RNA提取試劑的選擇:對于富含多糖多酚的植物類組織提取是個難點,Takara精心研發(fā)的柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以輕松解決這個問題。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地從各種簡單的植物組織材料(葉片、莖、幼苗等)、富含多糖多酚的植物組織材料(果實、種子等)、菌類提取高純度的TotalRNA,適用范圍普遍。按照標準流程,本試劑盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可選步驟提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA。試劑盒中包含了RNA提取所需的全部試劑,無需額外購買其它試劑~正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷總RNA提取試劑:自備新開封或專門氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。
目前,主流的RNA提取方法有Trizol法、離心柱法和磁珠法。其中,Trizol法與離心柱法相比,提取效果相當,但因其對操作者帶來的毒性,現在越來越被棄用。磁珠法可以針對大批量樣本處理,適合機器自動化提取,但是提取核酸純度低,提取得率低,且使用成本較高。對于拭子RNA含量較低的樣本或比較珍貴的樣本或樣本總數不是很多的實驗室,選擇的拭子RNA提取方法應是離心柱法。近來,隨著基因診斷技術的發(fā)展,從口腔拭子、泌尿生殖道拭子、痰液等樣本中進行RNA提取的試劑盒的應用價值越來越大,如tumour早期診斷、遺傳病檢測和病原體傳染核酸檢測等。拭子RNA提取效果在很大程度上取決于采樣質量、試劑盒性能等,特別是試劑盒的性能較大影響了拭子核酸的基因檢測和各種研究的開展。
RNA組成結構:RNA和DNA一樣,也是由各種核苷酸通過3′,5′-磷酸二酯鍵連接構成的多核苷酸鏈,但與DNA有一系列差異。1.在化學組成方面,RNA含核糖而不含脫氧核糖。含尿嘧啶而不含胸腺密啶。例外的是,每個tNA分子含有一個胸腺嘧啶,這是在RNA鏈合成后由尿嘧啶甲基化生的,此外,前面已提到,少數DNA含有少量核糖,但這些個別的例外并不能以此否定兩類核酸組成上的差異。2.RNA一級結構的概念雖與DNA相同.但其基本結構單位是核糖核苷酸而不是脫氧核糖核苷酸。此外,部分RNA5′端或3′端有特殊的核苷酸序列,而且RNA一級結構中沒有DNA那樣復雜的順序組織。3.絕大多數RNA為單鏈分子,單鏈可自身折迭形成發(fā)夾(hairpin)樣結構而有局部雙螺旋結構的特征,這是各種RAN空間結構的共同特征。RNA局部雙螺旋結構中堿基互補配對規(guī)律是A對U和G對C。由于RNA分子內部不能較全形成堿基配對,故其堿基克分子比A不等于U,G不等于C,不存在DNA堿基比例的Chargaff規(guī)律。再采集樣本之后馬上加入 DNA/RNA Shield,可以快速降解掉 RNase 等蛋白物質。
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。二、試劑盒特點:1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好??朔藝a試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程,提取RNA純度更高。5、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量,提高了純度。植物RNA提取試劑產品特點:針對植物材料獨特配置,操作更簡單、流程更優(yōu)化。太原正規(guī)RNA提取試劑直銷價
血漿/血清RNA提取試劑盒:高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質,提取RNA的純度高,產量大。杭州貴陽RNA提取試劑
多糖多酚植物RNA提取試劑盒專門針對多糖,多酚等難提的植物RNA樣本提取設計,至今為止未發(fā)現不能攻克的樣本(棉花,番茄,板栗,龍眼,荔枝,葡萄,針葉植物,百合,獼猴桃,香蕉,甘蔗,海棠,蘋果,銀杏,小麥,水稻,玉米等農作物,果實,花卉,蔬菜等多糖多酚,色素等次級代謝物嚴重的植物樣本,全部攻克)。絕無DNA污染,可直接反轉錄,熒光定量,不會出現其他公司試劑盒中出現的洗脫液含絡合Mg離子成分,壓制后續(xù)PCR反應的情況。本試劑盒提取的RNA可直接用于對前期RNA提取質量非常高的后續(xù)實驗,如轉錄組RNA測序,制作基因芯片,熒光定量PCR,核酸雜交,反轉錄等所有后續(xù)實驗。一個樣十多分鐘搞定!具有世界品質的植物RNA試劑盒!杭州貴陽RNA提取試劑
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...