總RNA的定義:總RNA=mRNA+tRNA+rRNA,即:總RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的總和。這是在還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)lncRNA等microRNA的時(shí)候的概念。但是卻被各大公司默認(rèn)的概念,一直延續(xù)至今。所以各位可以去各大公司的網(wǎng)站,看一看總RNA提取試劑盒案例提供的RNA電泳圖,只有表示總RNA的2條帶——28s和18s;表示microRNA的5s帶,要不沒(méi)有,要不很弱。那么mRNA在哪里呢?從RNA電泳圖上能不能看到呢?真正成熟的mRNA,主要集中在28s和18s之間和上下的熒光背景(一般每條基因mRNA量很少,所以,整體一般看不到明顯帶,只表現(xiàn)為28s和18s中間和上下的連續(xù)的涂抹帶)。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。溫州正規(guī)RNA提取試劑廠(chǎng)家現(xiàn)貨
動(dòng)物細(xì)胞RNA提?。?、懸浮細(xì)胞:可直接離心后棄掉培養(yǎng)基,用無(wú)菌PBS清洗1~2遍后,再用適量PBS懸浮起來(lái),然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬(wàn)不要完全棄掉液體后,往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液,這樣會(huì)使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè),從而限制沉淀內(nèi)部的細(xì)胞與裂解液的接觸,從而導(dǎo)致細(xì)胞裂解不徹底,降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細(xì)胞:棄掉培養(yǎng)基后,用PBS洗1~2次,然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿,把細(xì)胞吹下來(lái),轉(zhuǎn)移到無(wú)RNA酶的EP管中,加裂解液進(jìn)行提取。3、貼壁細(xì)胞:需要先用胰酶消化,然后收集到無(wú)RNA酶的EP管中,離心去其上清,用PBS洗1~2次,去除多余的胰酶,以適量PBS重懸后繼續(xù)進(jìn)行提取步驟。溫州正規(guī)RNA提取試劑廠(chǎng)家現(xiàn)貨總RNA提取試劑:試劑中含有酚等有害物質(zhì),注意個(gè)人防護(hù)。
游離RNA(cfRNA)提取試劑盒:采用有機(jī)試劑法提取血清/血漿中游離總RNA?;诒竟咎赜械牧呀?結(jié)合液配方,結(jié)合新型硅基膜填料,能高效的吸附樣本中的總RNA,尤其是對(duì)小于200nt包括miRNA、siRNA和snRNA在內(nèi)的smallRNA有更強(qiáng)的吸附結(jié)合能力。提取得到的總RNA純度高,無(wú)蛋白污染。特點(diǎn):1、更高的樣本體積處理能力:可從新鮮或凍存的血清/血漿中高效富集純化游離RNA,樣本處理體積從0.2~1.0mL范圍內(nèi)靈活選取。2、更高的小RNA富集效率:采用patent試劑配方,對(duì)小于200nt的smallRNA有更高的結(jié)合純化能力。3、操作簡(jiǎn)單快速:一小時(shí)內(nèi)可完成所有操作。
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡(jiǎn)介。改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。二、試劑盒特點(diǎn):1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好。克服了國(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn),不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過(guò)程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過(guò)度干燥不易溶解問(wèn)題。3、獨(dú)有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過(guò)程,提取RNA純度更高。5、有效的去除了無(wú)用的5S在總RNA中含量,提高了純度。與DNA不同,RNA一般為單鏈長(zhǎng)分子,不形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。
植物RNA快速提取試劑盒:是一種單相RNA快速提取試劑盒,可高效裂解堅(jiān)固的植物細(xì)胞并強(qiáng)烈壓制RNA酶活性。細(xì)胞破碎之后,植物多糖立即被PlantRNAtrip獨(dú)特的成分結(jié)合。離心抽提步驟將RNA與滅活的RNA酶、蛋白、基因組DNA污染分離,并清理植物多糖多酚以及次生代謝產(chǎn)物。在RNA沉淀之前加入PlantRNAAid清理植物多酚,并清理殘余的多糖。提取可在60分鐘內(nèi)完成,所提取的RNA純度極高,不含DNA和多糖和多酚污染,可用于構(gòu)建cDNA文庫(kù)、RT-PCR、Northern轉(zhuǎn)印分析、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯、和RNA酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)。適于各種植物組織RNA提取,也特別適合富含糖原的動(dòng)物肝臟和肌肉組織提取高純度RNA。如果植物組織富含多酚和次生代謝產(chǎn)物,推薦使用PlantRNAExtractionkit(R1050)。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):針對(duì)植物材料獨(dú)特配置,操作更簡(jiǎn)單、流程更優(yōu)化。昆明正規(guī)RNA提取試劑直銷(xiāo)廠(chǎng)家
細(xì)菌總RNA提取試劑盒:提取的總RNA純度高,沒(méi)有DNA和蛋白質(zhì)污染,適用于RT-PCR。溫州正規(guī)RNA提取試劑廠(chǎng)家現(xiàn)貨
目前,主流的RNA提取方法有Trizol法、離心柱法和磁珠法。其中,Trizol法與離心柱法相比,提取效果相當(dāng),但因其對(duì)操作者帶來(lái)的毒性,現(xiàn)在越來(lái)越被棄用。磁珠法可以針對(duì)大批量樣本處理,適合機(jī)器自動(dòng)化提取,但是提取核酸純度低,提取得率低,且使用成本較高。對(duì)于拭子RNA含量較低的樣本或比較珍貴的樣本或樣本總數(shù)不是很多的實(shí)驗(yàn)室,選擇的拭子RNA提取方法應(yīng)是離心柱法。近來(lái),隨著基因診斷技術(shù)的發(fā)展,從口腔拭子、泌尿生殖道拭子、痰液等樣本中進(jìn)行RNA提取的試劑盒的應(yīng)用價(jià)值越來(lái)越大,如tumour早期診斷、遺傳病檢測(cè)和病原體傳染核酸檢測(cè)等。拭子RNA提取效果在很大程度上取決于采樣質(zhì)量、試劑盒性能等,特別是試劑盒的性能較大影響了拭子核酸的基因檢測(cè)和各種研究的開(kāi)展。溫州正規(guī)RNA提取試劑廠(chǎng)家現(xiàn)貨
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見(jiàn)許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上。保存在7...