RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時(shí),使用Takara公司的樣品保護(hù)劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,同時(shí)也可以有效解決組織、細(xì)胞樣品的短時(shí)間保存及運(yùn)輸問題。此外,如果將不同時(shí)期收集的樣品都預(yù)先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達(dá)的時(shí)序變化,減少實(shí)驗(yàn)組間的誤差RNA在260nm波長處有較大的吸收峰。唐山正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介。改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。二、試劑盒特點(diǎn):1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn),不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨(dú)有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程,提取RNA純度更高。5、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量,提高了純度。上海濟(jì)南RNA提取試劑異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑,可溶解蛋白質(zhì)。
細(xì)胞外RNA(exRNA)已成為研究界的新寵。近年來,人們在血漿或血清樣本中成功檢測到疾病相關(guān)的exRNA,使其有望成為非侵入性的生物標(biāo)志物。然而,從血漿或血清中分離exRNA仍頗具挑戰(zhàn)性,這一方面是因?yàn)閑xRNA豐度低,另一方面是因?yàn)檠褐械奈廴疚飼?huì)壓制PCR。商品化的試劑盒能簡化和加速exRNA提取過程,已成為循環(huán)exRNA研究不可缺少的工具。然而,這些試劑盒的提取效率如何,是否能去除血漿中的污染物,是否會(huì)偏向特定的RNA,都沒有經(jīng)過評(píng)估,而這類評(píng)估對(duì)于結(jié)果解釋和實(shí)驗(yàn)之間的比較都很關(guān)鍵。
游離RNA(cfRNA)提取試劑盒:采用有機(jī)試劑法提取血清/血漿中游離總RNA?;诒竟咎赜械牧呀?結(jié)合液配方,結(jié)合新型硅基膜填料,能高效的吸附樣本中的總RNA,尤其是對(duì)小于200nt包括miRNA、siRNA和snRNA在內(nèi)的smallRNA有更強(qiáng)的吸附結(jié)合能力。提取得到的總RNA純度高,無蛋白污染。特點(diǎn):1、更高的樣本體積處理能力:可從新鮮或凍存的血清/血漿中高效富集純化游離RNA,樣本處理體積從0.2~1.0mL范圍內(nèi)靈活選取。2、更高的小RNA富集效率:采用patent試劑配方,對(duì)小于200nt的smallRNA有更高的結(jié)合純化能力。3、操作簡單快速:一小時(shí)內(nèi)可完成所有操作。在實(shí)際RNA提取中,有幾個(gè)提取原則:保證RNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性。
RNA提取濃度不高或質(zhì)量不佳原因及解決辦法:1、得率過低:提取樣本過低總量不足或者提取樣本過多裂解不徹底;應(yīng)當(dāng)使用適當(dāng)質(zhì)量的組織或細(xì)胞進(jìn)行提取,樣本前處理一定要做好,裂解應(yīng)充分。2、基因組殘留:Trizol法提取時(shí),分層后吸取上清時(shí)吸到中間層會(huì)帶來嚴(yán)重的基因組污染;分層吸取時(shí)應(yīng)當(dāng)格外小心,不要吸取到中間層。如果是采用柱式法提取,可選擇含有DNaseI的試劑盒進(jìn)行提取,吸附在膜上的核酸直接用DNaseI進(jìn)行消化,可極大限度的降低DNA殘留。RNA提取:無論是從細(xì)胞、血液、還是組織等高難度樣本提取RNA。無錫深圳RNA提取試劑
植物花總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,配合特殊的提取緩沖液。唐山正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦
多糖多酚植物RNA提取試劑盒專門針對(duì)多糖,多酚等難提的植物RNA樣本提取設(shè)計(jì),至今為止未發(fā)現(xiàn)不能攻克的樣本(棉花,番茄,板栗,龍眼,荔枝,葡萄,針葉植物,百合,獼猴桃,香蕉,甘蔗,海棠,蘋果,銀杏,小麥,水稻,玉米等農(nóng)作物,果實(shí),花卉,蔬菜等多糖多酚,色素等次級(jí)代謝物嚴(yán)重的植物樣本,全部攻克)。絕無DNA污染,可直接反轉(zhuǎn)錄,熒光定量,不會(huì)出現(xiàn)其他公司試劑盒中出現(xiàn)的洗脫液含絡(luò)合Mg離子成分,壓制后續(xù)PCR反應(yīng)的情況。本試劑盒提取的RNA可直接用于對(duì)前期RNA提取質(zhì)量非常高的后續(xù)實(shí)驗(yàn),如轉(zhuǎn)錄組RNA測序,制作基因芯片,熒光定量PCR,核酸雜交,反轉(zhuǎn)錄等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)。一個(gè)樣十多分鐘搞定!具有世界品質(zhì)的植物RNA試劑盒!唐山正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上。保存在7...