加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。一、高效、靈敏、特異的抗體;二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;五、節(jié)省實驗經(jīng)費。上海伊麗薩生物科技,進口ELISA試劑盒的代理商,不容錯過。Novateinbio ELISA試劑盒的深度市場客戶需求挖掘
操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。北京ELISA試劑盒銷售價格比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M檸檬酸(19.2克/L)24.3ml加蒸餾水50ml。(6)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml底物緩沖液(PH5.5)10ml0.75%H2O232μl(7)ABTS使用液:ABTS0.5mg底物緩沖液(PH5.5)1ml3%H2O22μl(8)抗原、抗體和酶標記抗體。(9)正常人血清和陽性對照血清。器材(1)聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。(2)小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。(3)4℃冰箱,37℃孵育箱。
ELISA試劑盒的可重復性是其質(zhì)量的重要體現(xiàn)。可重復性意味著在不同的實驗室、不同的操作人員以及不同的時間使用同一試劑盒對相同樣本進行檢測時,能夠得到相似的結果。這依賴于試劑盒的標準化生產(chǎn),包括原材料的穩(wěn)定供應、精確的生產(chǎn)工藝以及嚴格的質(zhì)量控制。例如,在多中心的臨床研究中,不同醫(yī)院使用相同的ELISA試劑盒檢測患者樣本中的特定標志物,如果試劑盒具有良好的可重復性,那么各個中心得到的結果就可以進行有效的比較和分析。這對于疾病的診斷標準制定、效果評估等方面具有重要意義。上海伊麗薩生物科技代理進口ELISA試劑盒,服務生命科研工作者。
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。合肥Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動。黑龍江專注ELISA試劑盒電話多少
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ELISA試劑盒的特異性是指其準確區(qū)分目標物質(zhì)和其他類似物質(zhì)的能力。特異性主要依賴于抗原-抗體的高度特異性結合。在試劑盒的設計中,所選用的抗體必須對目標抗原具有高度的選擇性。例如,在檢測某種特定病毒的抗原時,試劑盒中的抗體不能與其他病毒的抗原發(fā)生交叉反應。如果特異性不足,就會導致假陽性或假陰性結果。為了確保特異性,在抗體的篩選和制備過程中需要進行嚴格的驗證。同時,試劑盒中的其他成分,如酶標記物和底物,也不能干擾抗原-抗體的特異性結合,從而保證檢測結果的準確性。Novateinbio ELISA試劑盒的深度市場客戶需求挖掘
ELISA試劑盒在食品安全檢測中的獸藥殘留檢測方面發(fā)揮著重要作用。在養(yǎng)殖過程中,為了預防和動物疾病,會使用各種獸藥。然而,獸藥殘留可能會對人體健康造成危害。ELISA試劑盒能夠檢測肉類、蛋類、奶類等食品中的獸藥殘留。例如,檢測氯霉素殘留,氯霉素是一種常用的,但過量殘留會影響人體的造血功能。ELISA試劑盒通過特異性抗體識別氯霉素,能夠快速、準確地檢測出食品中是否存在氯霉素殘留以及殘留量。對于其他獸藥,如四環(huán)素類、磺胺類藥物等,ELISA試劑盒也可以進行有效的檢測。這有助于保障食品安全,防止含有獸藥殘留超標的食品進入市場,保護消費者的健康。ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測...