MSCs在添加10%血小板裂解液和不同濃度肝素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天,隨后使用MTT法評估增殖。脂肪組織源性間充質(zhì)干細(xì)胞(AT-MSC)和骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞(BM-MSC)培養(yǎng)的過程中,如果使用的UFH濃度低于0.61IU/mL或者使用Enoxaparin(LMWH)濃度低于0.024mg/mL(2.4IU/mL)時培養(yǎng)液均呈現(xiàn)凝膠狀態(tài)(灰色背景),而肝素濃度過高則對細(xì)胞增殖的負(fù)面影響明顯且以劑量依賴的方式提高。備注肝素濃度單位換算:肝素濃度國際單位(IU)衡量,1IU國際單位是指在規(guī)定的條件下,將1ml全血延長凝血3分鐘所需的量:1mg大約相當(dāng)于100IU的肝素。 血小板裂解液的使用方法是怎樣的?Helios血小板裂解液生產(chǎn)商
使用的HPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業(yè)規(guī)模(很小批量為20L)生產(chǎn)的,具備高度的批間一致性。將脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進(jìn)行傳代培養(yǎng)11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進(jìn)行比較。羊膜來源間充質(zhì)干細(xì)胞也在2.5或5%Stemulate中培養(yǎng),與10%胎牛血清相比。牙髓來源的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養(yǎng)基進(jìn)行比較。在所有實驗中,每天都監(jiān)測細(xì)胞,每次傳代結(jié)束時,收獲細(xì)胞,并使用臺盼藍(lán)和一個自動細(xì)胞計數(shù)器計數(shù)然后繼續(xù)傳代??蒲械燃壯“辶呀庖涸趺礃友“辶呀庖豪镉心男┥L因子?
為了排除肝素對于細(xì)胞增長的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關(guān)。我們對不添加防腐劑的肝素進(jìn)行了相同實驗,結(jié)果對AT-MSC和BM-MSC細(xì)胞增殖抑制趨勢相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時累積細(xì)胞群體倍增指數(shù)(cPD) 較高。CFU-F的塑料粘附生長性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結(jié)合泊松統(tǒng)計進(jìn)行CFU-F試驗,顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時明顯降低。這些結(jié)果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報道的其他研究結(jié)論一致。
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FBS已經(jīng)成為細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的金標(biāo)準(zhǔn)--我們的行業(yè)持續(xù)地嚴(yán)重依賴FBS。但是FBS價格的上漲和波動依賴于外部的因素。**預(yù)計,供需很快就會出現(xiàn)不匹配。因此,對無動物源細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品的需求正在逐年增加。為此,我們開發(fā)了ELAREMPrime血小板裂解液這款兼具優(yōu)良性能和穩(wěn)定價格的無動物源細(xì)胞生長添加劑。ELAREMPrime血小板裂解液提供了穩(wěn)定的數(shù)據(jù),無需進(jìn)行批次間驗證。細(xì)胞生長性能可以媲美FBS細(xì)胞培養(yǎng)添加劑。因此,ELAREMPrime血小板裂解液可以確保以一種簡單且據(jù)有價格吸引力的方式將細(xì)胞培養(yǎng)切換到無動物血清的條件。 在使用前需要過濾掉血小板裂解液中的沉淀嗎?
血小板中含有很多不同的細(xì)胞生長因子,包括PDGF,VEGF,EGF等,實踐證明,血小板分泌的細(xì)胞生長因子能夠?qū)Χ喾N細(xì)胞起到支持生長的作用,可以完全替代胎牛血清(FBS)甚至于在支持一些細(xì)胞培養(yǎng)的效果上優(yōu)于FBS。本產(chǎn)品是將多人份濃縮血小板混合后裂解而成,產(chǎn)品均一性好,經(jīng)過了嚴(yán)格安全性有效性質(zhì)量檢控。人血小板裂解液能夠支持包括間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化,成脂分化,造血干細(xì)胞以及誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞的生長等。是這些細(xì)胞公認(rèn)的動物源血清替代品。 有誰知道血小板裂解液主要含有哪些生長因子?美國血小板裂解液好用么
想進(jìn)口血小板裂解液是不是很難?Helios血小板裂解液生產(chǎn)商
細(xì)胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細(xì)胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細(xì)胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細(xì)胞培養(yǎng)基可在4°C下儲存,并穩(wěn)定約4周儲存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標(biāo)簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進(jìn)行長期儲存)冷凍儲存時穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREMPrime的重復(fù)凍融循環(huán),因為這會導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時,只需預(yù)熱一份完整的細(xì)胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。 Helios血小板裂解液生產(chǎn)商
上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019-02-15,位于自由貿(mào)易試驗區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,公司自成立以來通過規(guī)范化運營和高質(zhì)量服務(wù),贏得了客戶及社會的一致認(rèn)可和好評。公司主要產(chǎn)品有血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無線標(biāo)簽機等,公司工程技術(shù)人員、行政管理人員、產(chǎn)品制造及售后服務(wù)人員均有多年行業(yè)經(jīng)驗。并與上下游企業(yè)保持密切的合作關(guān)系。依托成熟的產(chǎn)品資源和渠道資源,向全國生產(chǎn)、銷售血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無線標(biāo)簽機產(chǎn)品,經(jīng)過多年的沉淀和發(fā)展已經(jīng)形成了科學(xué)的管理制度、豐富的產(chǎn)品類型。我們本著客戶滿意的原則為客戶提供血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無線標(biāo)簽機產(chǎn)品售前服務(wù),為客戶提供周到的售后服務(wù)。價格低廉優(yōu)惠,服務(wù)周到,歡迎您的來電!
安全信息遵循安全數(shù)據(jù)表(SDS)中概述的操作說明。穿戴適當(dāng)?shù)淖o目鏡、衣物和手套。ELAREM Pri...
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【詳情】本課題在體外分離、培養(yǎng)和鑒定人牙髓干細(xì)胞、牙周膜干細(xì)胞及根尖牙rutou干細(xì)胞的基礎(chǔ)上,通過比較體內(nèi)...
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