間充質(zhì)間質(zhì)細胞(MSCs)體外擴增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應(yīng)的風(fēng)險,監(jiān)管機構(gòu)并不鼓勵使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應(yīng)或牛病原體ganran的風(fēng)險,有助于增強間充質(zhì)干細胞的擴增,也相對容易地根據(jù)良好的生產(chǎn)規(guī)范程序生產(chǎn),并已用于臨床應(yīng)用,因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻1)。血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對于一般細胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來說通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來防止凝膠形成,其中肝素很為常用。 血小板裂解液進口麻煩嗎?達優(yōu)血小板裂解液和血清比有什么優(yōu)勢
血小板裂解液主要成分為人血小板裂解液,含有較高濃度的生長因子等細胞培養(yǎng)必須物質(zhì),在體外細胞培養(yǎng)中可代替胎牛血清和自體血清。人源血小板裂解液就是直接將人類來源血小板細胞經(jīng)過連續(xù)的反復(fù)凍融裂解后,進一步提純這些血小板脫顆粒的商品。血小板裂解液(platelet lysate,PL)是自體或異體血小板富集物經(jīng)細胞裂解后的產(chǎn)物,已經(jīng)被諸多研究推薦作為胎牛血清(fetal bovine serum,F(xiàn)BS)的替代品,應(yīng)用于間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSC)的大規(guī)模擴增培養(yǎng)。GMP等級血小板裂解液授權(quán)代理商想進口血小板裂解液難嗎?
那么經(jīng)常有客戶會問道人血小板裂解液中的肝素的使用濃度到底如何抉擇呢?添加培養(yǎng)之前有必要花時間來優(yōu)化下這個肝素濃度參數(shù)嗎?現(xiàn)在小編通過比較了不同濃度的普通肝素(unfractionatedheparinUFH,分子量3000-30000Da)和低分子肝素(LMWH-分子量2000-12000Da)在hPL培養(yǎng)基中培養(yǎng)MSCs的增殖能力、成纖維細胞體外集落形成單位(colony-formingunit,CFU-F)、免疫表型和體外分化等情況,給大家作解答。從而幫助大家正確使用血小板裂解液。
MSCs在添加10%血小板裂解液和不同濃度肝素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天,隨后使用MTT法評估增殖。脂肪組織源性間充質(zhì)干細胞(AT-MSC)和骨髓源性間充質(zhì)干細胞(BM-MSC)培養(yǎng)的過程中,如果使用的UFH濃度低于0.61IU/mL或者使用Enoxaparin(LMWH)濃度低于0.024mg/mL(2.4IU/mL)時培養(yǎng)液均呈現(xiàn)凝膠狀態(tài)(灰色背景),而肝素濃度過高則對細胞增殖的負面影響明顯且以劑量依賴的方式提高。備注肝素濃度單位換算:肝素濃度國際單位(IU)衡量,1IU國際單位是指在規(guī)定的條件下,將1ml全血延長凝血3分鐘所需的量:1mg大約相當(dāng)于100IU的肝素。 血小板裂解液的使用方法。
細胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細胞培養(yǎng)基可在4°C下儲存,并穩(wěn)定約4周儲存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標(biāo)簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進行長期儲存)冷凍儲存時穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREMPrime的重復(fù)凍融循環(huán),因為這會導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時,只需預(yù)熱一份完整的細胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。 血小板裂解液中的沉淀是怎樣形成的?制備血小板裂解液生產(chǎn)商
血小板裂解液里面有沉淀對細胞會有什么影響?達優(yōu)血小板裂解液和血清比有什么優(yōu)勢
ELAREMPrime血小板裂解液在標(biāo)簽上的有效期內(nèi)都是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前儲存在-20°C或更低溫度調(diào)節(jié)下時穩(wěn)定性比較好的。解凍后,建議分裝并重新冷凍未使用的ELAREMPrime在-20°C下。應(yīng)避免反復(fù)凍融。無菌ELAREMPrime為無菌加工工藝,微生物培養(yǎng)為陰性。質(zhì)量控制測試由經(jīng)過認證的第三方測試實驗室完成??勺匪菪院皖A(yù)防措施ELAREMPrime是從經(jīng)過EMA授權(quán)的**中心的健康捐獻者來源的血小板單位生產(chǎn)而來的。獻血者均通過歐盟現(xiàn)行的獻血者資格準則的資格審核。 達優(yōu)血小板裂解液和血清比有什么優(yōu)勢
上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司是以提供血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍牙無線標(biāo)簽機為主的有限責(zé)任公司,曼博生物是我國醫(yī)藥健康技術(shù)的研究和標(biāo)準制定的重要參與者和貢獻者。公司主要提供生物醫(yī)藥科技(人體干細胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計算機軟件的開發(fā)、設(shè)計、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實驗室試劑及耗材(藥品、危險品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進出口、傭金代理(拍賣除外)?!疽婪毥?jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動】等領(lǐng)域內(nèi)的業(yè)務(wù),產(chǎn)品滿意,服務(wù)可高,能夠滿足多方位人群或公司的需要。曼博生物將以精良的技術(shù)、優(yōu)異的產(chǎn)品性能和完善的售后服務(wù),滿足國內(nèi)外廣大客戶的需求。
安全信息遵循安全數(shù)據(jù)表(SDS)中概述的操作說明。穿戴適當(dāng)?shù)淖o目鏡、衣物和手套。ELAREM Pri...
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