HCD利用人胎兒胰腺組織中的靶向ZhongLiu發(fā)生開(kāi)發(fā)了永生化人β細(xì)胞系，其中使用慢病毒載體整合了兩個(gè)轉(zhuǎn)基因，SV40大T抗原(SV40-LT)和人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)兩種轉(zhuǎn)基因均在β細(xì)胞特異性大鼠胰島素啟動(dòng)子(RIP)的控制下表達(dá)。***代細(xì)胞，名為EndoC-βH1，以組成型方式表達(dá)SV40LT和hTERT，而在第二代EndoC-βH2和EndoC-βH3中，這些轉(zhuǎn)基因可在loxP介導(dǎo)的CRE重組后被切除，位點(diǎn)位于慢病毒骨架的3LTR.EndoC-βH5細(xì)胞是通過(guò)使用表達(dá)可切除的SV40LT和hTERT的慢病毒載體對(duì)人胎兒胰腺進(jìn)行靶向ZhongLiu發(fā)生而獲得的.糖尿病細(xì)胞模型人源胰島B細(xì)胞已經(jīng)進(jìn)行了功能性驗(yàn)證。藥物開(kāi)發(fā)使用糖尿病細(xì)胞模型無(wú)菌環(huán)境操作

這些小鼠在 2 至 3 個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)低血糖，胰島素陽(yáng)性細(xì)胞大量擴(kuò)增。這種體內(nèi)擴(kuò)增有助于維持大量增殖的胰島素細(xì)胞，并允許定義允許的培養(yǎng)條件，在這種條件下，可以在體外建立永生化細(xì)胞系。Human Cell Design（HCD）開(kāi)發(fā)了一種用于在人類(lèi)胎兒組織中使用靶向Zhong liu產(chǎn)生功能的人類(lèi)β細(xì)胞系。在胰島素啟動(dòng)子的控制下，用表達(dá) SV40LT 的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)人類(lèi)胎兒胰腺芽。Human Cell Design 開(kāi)發(fā)了創(chuàng)新且安全的人類(lèi)β細(xì)胞系生產(chǎn)方法。首先，將每個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)的人類(lèi)胎兒胰腺芽移植到 2 或 3 只 SCID 小鼠的腎被膜下，因?yàn)樵摬课皇侨祟?lèi)胰腺發(fā)育的允許部位。在 6 到 8 個(gè)月內(nèi)，所有移植的小鼠都發(fā)生了原發(fā)性胰島素瘤，這導(dǎo)致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比，原發(fā)性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發(fā)性胰島素瘤中這些高度血管化的區(qū)域分離，用在大鼠胰島素啟動(dòng)子控制下表達(dá) hTERT 的慢病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)，并移植到其他 SCID 小鼠中。更多關(guān)于Human Cell Design相關(guān)產(chǎn)品信息可以咨詢官網(wǎng)代理商AlibioBuy!人胰腺B細(xì)胞糖尿病細(xì)胞模型官方代理糖尿病細(xì)胞模型EndoC-BH5 細(xì)胞在迄今為止測(cè)試的所有功能測(cè)定中均表現(xiàn)良好。

人原代β細(xì)胞的可用性有限，從人胰島制劑中純化β細(xì)胞具有挑戰(zhàn)性。在嚙齒類(lèi)動(dòng)物中，β細(xì)胞系自20世紀(jì)70年代初以來(lái)就已經(jīng)可用，并且在研究β細(xì)胞功能方面非常有用。然而，嚙齒動(dòng)物的β細(xì)胞并不是研究人類(lèi)β細(xì)胞的理想選擇，因?yàn)槿祟?lèi)和嚙齒動(dòng)物的β細(xì)胞在許多方面彼此不同。例如，在嚙齒類(lèi)動(dòng)物中，胰島素由2個(gè)基因編碼，而在人類(lèi)中，只有1個(gè)基因編碼。嚙齒動(dòng)物和人類(lèi)β細(xì)胞的功能差異是由于葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)和磷酸化在葡萄糖感知中的相對(duì)作用不同。

糖尿病細(xì)胞模型應(yīng)用概括如下：1、細(xì)胞因子介導(dǎo)的糖尿病炎癥反應(yīng)（一/二型糖尿病）：胰島β細(xì)胞保護(hù)機(jī)制研究，胰島β細(xì)胞炎癥反應(yīng)研究，誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞炎癥反應(yīng)化合物篩選2、T細(xì)胞介導(dǎo)的胰島細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)（一型糖尿病）：胰島β細(xì)胞保護(hù)機(jī)制研究，T細(xì)胞抑制機(jī)制，β細(xì)胞和T細(xì)胞作用機(jī)制研究3、葡萄糖脂毒性研究:胰島β細(xì)胞鑒定marker，胰島β細(xì)胞功能性marker，胰島β細(xì)胞糖脂化合物研究4、篩選胰島素分泌促進(jìn)藥物：促胰島素分泌藥物篩選，功能機(jī)制研究，干細(xì)胞zhi liao糖尿病參照對(duì)比5、基于高通量篩選的siRNA靶標(biāo)驗(yàn)證和篩選：高通量胰島β細(xì)胞靶點(diǎn)鑒定和篩選，糖尿病疾病模型構(gòu)建，促胰島素分泌藥物篩選6、干細(xì)胞zhi liao糖尿病：參照對(duì)比糖尿病細(xì)胞模型可用于類(lèi)胰島構(gòu)建、糖尿病細(xì)胞模型構(gòu)建。

在胰島細(xì)胞刺激中，基礎(chǔ)和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數(shù)為11.6±1.8。通過(guò)應(yīng)用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導(dǎo)的鉀通道開(kāi)放劑二氮嗪(100mM)，驗(yàn)證了胰島素分泌對(duì)D-葡萄糖的特異性。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴性方式增加，從0mMD-葡萄糖時(shí)的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時(shí)的679.2±39.5ng/h/106細(xì)胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖，分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/106細(xì)胞。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型。通過(guò)多輪次優(yōu)化改良，獲得的功能胰腺B細(xì)胞，無(wú)限接近天然人源胰島B細(xì)胞，其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類(lèi)似，基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗(yàn)證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上（左圖），在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)（右圖），對(duì)GLP-1R激動(dòng)劑， Exendin4刺激產(chǎn)生明細(xì)那反饋， 且可實(shí)現(xiàn)批量化生成，實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng)。
更多產(chǎn)品信息，歡迎咨詢AlibioBuy。與 EndoC-BH1 細(xì)胞相比，EndoC-BH5 細(xì)胞與原代人 B 細(xì)胞更接近。人胎兒胰腺外植體糖尿病細(xì)胞模型品質(zhì)保障

生長(zhǎng)因子促進(jìn)成人B細(xì)胞的擴(kuò)增誘導(dǎo)其體外去分化。藥物開(kāi)發(fā)使用糖尿病細(xì)胞模型無(wú)菌環(huán)境操作

這些小鼠在2至3個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)低血糖，胰島素陽(yáng)性細(xì)胞大量擴(kuò)增。這種體內(nèi)擴(kuò)增有助于維持大量增殖的胰島素細(xì)胞，并允許定義允許的培養(yǎng)條件，在這種條件下，可以在體外建立永生化細(xì)胞系。HumanCellDesign（HCD）開(kāi)發(fā)了一種用于在人類(lèi)胎兒組織中使用靶向Zhongliu產(chǎn)生功能的人類(lèi)β細(xì)胞系。在胰島素啟動(dòng)子的控制下，用表達(dá)SV40LT的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)人類(lèi)胎兒胰腺芽。HumanCellDesign開(kāi)發(fā)了創(chuàng)新且安全的人類(lèi)β細(xì)胞系生產(chǎn)方法。首先，將每個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)的人類(lèi)胎兒胰腺芽移植到2或3只SCID小鼠的腎被膜下，因?yàn)樵摬课皇侨祟?lèi)胰腺發(fā)育的允許部位。在6到8個(gè)月內(nèi)，所有移植的小鼠都發(fā)生了原發(fā)性胰島素瘤，這導(dǎo)致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比，原發(fā)性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發(fā)性胰島素瘤中這些高度血管化的區(qū)域分離，用在大鼠胰島素啟動(dòng)子控制下表達(dá)hTERT的慢病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)，并移植到其他SCID小鼠中。更多關(guān)于HumanCellDesign的產(chǎn)品信息，歡迎咨詢AlibioBuy。藥物開(kāi)發(fā)使用糖尿病細(xì)胞模型無(wú)菌環(huán)境操作