在 Human Cell Design 的研發(fā)過程中，科學(xué)家們采用了先進(jìn)的細(xì)胞工程技術(shù)，通過基因編輯和細(xì)胞培養(yǎng)等手段，成功構(gòu)建了多個高質(zhì)量的人源胰島β細(xì)胞模型。這些細(xì)胞模型不僅在結(jié)構(gòu)上與天然胰島細(xì)胞高度相似，還能夠在功能上模擬胰島細(xì)胞的生理行為，為糖尿病研究提供了可靠的實驗工具。HCD 的 EndoC-BH5 細(xì)胞系在糖尿病研究中具有廣泛應(yīng)用，其在高葡萄糖環(huán)境下能夠表現(xiàn)出胰島素分泌反應(yīng)，為研究胰島素調(diào)節(jié)機(jī)制和開發(fā)新型抗糖尿病藥物提供了重要支持。這些細(xì)胞模型的高穩(wěn)定性和可重復(fù)性，使得研究結(jié)果更加可靠，為科學(xué)家們提供了寶貴的研究平臺。EndoC-B h1和EndoC-B h5哪個分泌效果好？江蘇糖尿病細(xì)胞模型廠家直采且穩(wěn)定供應(yīng)

EndoC-βH5細(xì)胞是一種新型人類胰腺β細(xì)胞解決方案，可用于開發(fā)人類糖尿病模型以及藥物篩選和驗證平臺，產(chǎn)生流程為：DNA構(gòu)建，慢病毒載體產(chǎn)生，人胎兒胰腺外植體與pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒載體共轉(zhuǎn)導(dǎo)，移植到SCID小鼠的腎囊下，導(dǎo)致八個月后形成胰島素瘤，從而獲得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5細(xì)胞分別在Opti-β1和Ulti-b1培養(yǎng)基中的βCoat涂層塑料板上培養(yǎng)。使用胰蛋白酶（0.05%）每7天繁殖一次細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)分析表明所有EndoC-βH5細(xì)胞均呈胰島素陽性，并且在絕大多數(shù)細(xì)胞中檢測到PDX1和NK6.1表達(dá)（分別為92.3%和90%）。EndoC-βH5細(xì)胞在涂層塑料上形成小的貼壁簇。人源胰島B細(xì)胞糖尿病細(xì)胞模型一站式采購GLP1R 和 GIPR 介導(dǎo)的信號增強(qiáng)葡萄糖刺激 EndoC-BH5 細(xì)胞的胰島素分泌。

人源胰島B細(xì)胞模型對于與胰島相關(guān)的代謝疾病研究，包括糖尿病，糖尿病炎癥， 針對GLP-1R的Exendin4等類似藥物開發(fā)有重要作用。通過干細(xì)胞誘導(dǎo)B細(xì)胞產(chǎn)生的胰島B細(xì)胞存在純度較低，缺乏成熟胰島B細(xì)胞功能等問題。通過捐贈組織的胰腺B細(xì)胞提取，存在供應(yīng)量較低，明顯批次效應(yīng)，耗時較長等問題。使用糖尿病動物模型進(jìn)行研究會比糖尿病細(xì)胞模型成本更高昂，周期更長。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型。

表達(dá)HLA-A2的EndoC-βH5-HLA-A2系是通過每105細(xì)胞使用100ngp24衣殼蛋白與pTRIPDU3CMVHLA-A2IRESPURO慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)EndoC-βH5來產(chǎn)生的。在1mg/ml嘌呤霉素存在下將細(xì)胞擴(kuò)增三周以選擇轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞。為了完全成熟，將EndoC-βH5和EndoC-βH5-HLA-A2細(xì)胞再培養(yǎng)3周，并用5mM他莫昔芬和0.5mM更昔洛韋處理，以切除永生化基因并選擇切除的細(xì)胞。使用胰蛋白酶（25300e054）收集所得細(xì)胞，表達(dá)EndoC-βH5細(xì)胞的修飾HLA-A2引發(fā)同種異體反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞ji huo，概括了1型糖尿病中涉及的一些自身免疫機(jī)制。與 EndoC-BH1 細(xì)胞相比，EndoC-BH5 細(xì)胞與原代人 B 細(xì)胞更接近。

EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等細(xì)胞可在體外在葡萄糖劑量刺激下產(chǎn)生正常的胰島素分泌反應(yīng)，對GLP-1R/GLP-1等胰島素刺激因子產(chǎn)生正常響應(yīng)，可以響應(yīng)細(xì)胞因子刺激，表達(dá)HLA-A2等T細(xì)胞受體，因此可用于糖尿病炎癥相關(guān)等多種藥物開發(fā)實驗。EndoC-BH5細(xì)胞可批量穩(wěn)定生產(chǎn)，因此可以進(jìn)行基于siRNA的高通量篩選研究中，用于鑒定出潛在的2型糖尿病藥物靶點(diǎn)。另外，Humancelldesign根據(jù)法國生物倫理立法收集人類胎兒組織，獲得法國生物醫(yī)學(xué)局（巴黎）的批準(zhǔn)，批準(zhǔn)號為PFS08-005。表達(dá) EndoC-BH5 的 HLA-A2表示了免疫學(xué)研究的一個有價值的模型和潛在篩選平臺。浙江即用型胰腺細(xì)胞糖尿病細(xì)胞模型

生長因子促進(jìn)成人B細(xì)胞的擴(kuò)增誘導(dǎo)其體外去分化。江蘇糖尿病細(xì)胞模型廠家直采且穩(wěn)定供應(yīng)

在胰島細(xì)胞刺激中，基礎(chǔ)和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數(shù)為11.6±1.8。通過應(yīng)用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導(dǎo)的鉀通道開放劑二氮嗪(100mM)，驗證了胰島素分泌對D-葡萄糖的特異性。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴性方式增加，從0mMD-葡萄糖時的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時的679.2±39.5ng/h/10⁶細(xì)胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖，分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/10⁶細(xì)胞。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型。通過多輪次優(yōu)化改良，獲得的功能胰腺B細(xì)胞，無限接近天然人源胰島B細(xì)胞，其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類似，基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上（左圖），在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)（右圖），對GLP-1R激動劑， Exendin4刺激產(chǎn)生明細(xì)那反饋， 且可實現(xiàn)批量化生成，實現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng)。江蘇糖尿病細(xì)胞模型廠家直采且穩(wěn)定供應(yīng)