鱟試劑法(凝膠法)原理:鱟試劑是從鱟(一種海洋節(jié)肢動物)的血液中提取的變形細(xì)胞溶解物,它含有能與內(nèi)素(主要的熱源物質(zhì))反應(yīng)的凝固酶原和凝固蛋白原。當(dāng)鱟試劑與含有內(nèi)素的樣品接觸時,內(nèi)素會反應(yīng)凝固酶原,使其轉(zhuǎn)化為凝固酶,凝固酶進一步作用于凝固蛋白原,使溶液形成凝膠。凝膠的形成與否以及形成的程度可以用來判斷樣品中是否含有內(nèi)素以及內(nèi)素的含量。操作步驟:首先將鱟試劑復(fù)溶,一般按照試劑說明書的要求,用無熱原的水將鱟試劑溶解。然后取適量的純水樣品,與復(fù)溶后的鱟試劑混合,通常是在小試管中進行,輕輕混勻,避免產(chǎn)生氣泡。將混合后的試管放入恒溫箱中,一般溫度設(shè)定為 37℃,孵育一定時間,通常是 60 - 90 分鐘。觀察結(jié)果,如果溶液形成堅實的凝膠,判定為陽性,說明樣品中含有內(nèi)素;如果溶液仍然為液體,則判定為陰性,表明樣品中內(nèi)素含量低于檢測限。在生物技術(shù)的免疫細(xì)胞培養(yǎng)中,去離子水可增強細(xì)胞活性。上海實驗室去離子水大概費用
試劑準(zhǔn)備和樣品混合 先復(fù)溶含顯色底物的鱟試劑,然后將純化水樣品與復(fù)溶后的試劑混合,放入到酶標(biāo)儀配套的微孔板或比色皿中?;旌线^程要充分,確保樣品和試劑均勻分布。 儀器檢測設(shè)置和反應(yīng) 在酶標(biāo)儀上設(shè)置好檢測波長(一般為 405 - 410nm)、反應(yīng)溫度(37℃)和反應(yīng)時間等參數(shù)。將裝有樣品和試劑混合物的微孔板或比色皿放入酶標(biāo)儀中,啟動反應(yīng)。 結(jié)果計算 反應(yīng)結(jié)束后,酶標(biāo)儀會檢測并記錄每個樣品的吸光度值。根據(jù)預(yù)先制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線(使用已知內(nèi)素濃度的標(biāo)準(zhǔn)品制作)和檢測到的吸光度,計算出純化水樣品中內(nèi)素的含量。北京進口去離子水大概費用離子交換樹脂的分層現(xiàn)象會影響去離子水的離子去除效果。
鱟試劑復(fù)溶 用無熱原的水按照鱟試劑說明書規(guī)定的體積準(zhǔn)確復(fù)溶鱟試劑。一般是將鱟試劑小瓶輕輕振搖,使內(nèi)容物充分溶解,復(fù)溶過程要小心操作,避免產(chǎn)生過多氣泡,因為氣泡可能會干擾后續(xù)的凝膠觀察。 樣品混合與孵育 取適量的純化水樣品(如 0.1 - 0.2mL)與復(fù)溶后的鱟試劑(如 0.1 - 0.2mL)混合在小試管中。使用移液器時要確保移液準(zhǔn)確,并且將樣品和試劑充分混勻,輕輕顛倒試管幾次即可。 將混合后的試管放入預(yù)先設(shè)定為 37℃的恒溫箱中進行孵育。孵育時間一般為 60 - 90 分鐘,孵育過程中要保持恒溫箱內(nèi)溫度穩(wěn)定,避免頻繁開門導(dǎo)致溫度波動影響凝膠形成。
(熱原檢查法) 原理:將一定量的供試品,靜脈注入家兔體內(nèi),在規(guī)定時間內(nèi),觀察家兔體溫升高的情況,以判定供試品中所含熱源物質(zhì)的限度是否符合規(guī)定。因為熱源物質(zhì)進入家兔體內(nèi)后會引起體溫升高反應(yīng)。 操作步驟:選用健康合格的家兔,實驗時 3 - 7 天內(nèi)要對家兔進行體溫測試,挑選體溫在 38.0 - 39.6℃的家兔,并且各兔間體溫相差不得超過 1℃。將處理后的純水樣品按照一定的劑量(如每千克體重注射 10mL)緩慢靜脈注入家兔體內(nèi),然后每隔 30 分鐘測量家兔體溫一次,共測量 3 小時。如果三只家兔體溫升高總和不超過 1.3℃,且每只家兔體溫升高不超過 0.6℃,則判定供試品(純水)中的熱源物質(zhì)符合要求,即可能已被完全去除。不過,該方法操作較為復(fù)雜,且動物個體差異可能會對結(jié)果產(chǎn)生一定影響。去離子水在制藥行業(yè)的水針劑生產(chǎn)中,保障藥品質(zhì)量與安全。
選擇合適的反滲透膜:根據(jù)待處理水的水質(zhì)、熱源物質(zhì)的特性以及處理量等因素,選擇具有合適截留分子量和材質(zhì)的反滲透膜。常見的有醋酸纖維素膜、聚酰胺膜等,例如對于制藥行業(yè)的純化水,通常會選用聚酰胺材質(zhì)的反滲透膜,其對熱源物質(zhì)的截留效果較好。安裝與檢查設(shè)備:正確安裝反滲透設(shè)備,確保管道連接緊密無泄漏,各部件安裝牢固。檢查高壓泵、計量泵、壓力表、閥門等設(shè)備是否正常工作,同時檢查電路、控制系統(tǒng)是否運行良好。過濾:使用砂濾器、活性炭過濾器等對原水進行初步過濾,去除水中的大顆粒雜質(zhì)、懸浮物、有機物等,防止其堵塞反滲透膜,影響反滲透效果。 軟化:若原水硬度較高,可采用離子交換樹脂軟化法或加藥軟化法等進行軟化處理,降低水中鈣、鎂等離子的含量,減少在反滲透膜表面形成水垢的可能性離子交換樹脂的反洗操作可去除樹脂中的雜質(zhì)與污染物。上海實驗室去離子水大概費用
在制藥行業(yè)的膠囊殼生產(chǎn)中,去離子水可改善殼的質(zhì)量與穩(wěn)定性。上海實驗室去離子水大概費用
活性炭過濾器 活性炭過濾器可以有效降低水中 TOC 含量。一般情況下,它能夠去除水中 30% - 70% 的有機碳化合物。對于一些相對分子質(zhì)量較大、具有較強吸附性的有機物質(zhì),去除效果更為明顯。例如,對于水中的腐殖酸等天然有機物,活性炭的去除率可能會達到 50% - 70%。但對于一些小分子、極性較強的有機物質(zhì),如甲醇、乙醇等,活性炭的吸附效果可能會相對較差,去除率可能只有 30% 左右。 超濾過濾器 超濾過濾器主要是截留大分子有機物,對于 TOC 的降低程度取決于超濾膜的截留分子量和水中有機物質(zhì)的分子大小分布。一般而言,超濾可以去除水中 60% - 90% 的大分子有機碳化合物(分子量大于超濾膜截留分子量)。如果水中主要是分子量較大的膠體、蛋白質(zhì)等有機物質(zhì),超濾后的 TOC 含量可能會降低 70% - 90%。然而,對于分子量小于超濾膜截留分子量的有機小分子,超濾幾乎沒有去除作用,所以整體 TOC 降低程度有限。上海實驗室去離子水大概費用