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外泌體的提取、分離方法：免疫親和層析法。免疫親和層析法是利用生物體內(nèi)存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法，主要用于生物大分子的分離、純化。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體，如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合，只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識(shí)別，這使得提取的外泌體純度高，但是產(chǎn)量低。Zarovni等分別用超速離心、密度梯度離心和免疫層析法，從血漿和細(xì)胞上清中提取外泌體蛋白，結(jié)果表明，免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標(biāo)記蛋白(Alix、CD9、CD63)，同時(shí)，ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性。早先應(yīng)用于從...

外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測(cè)序的聯(lián)系緊密，研究思路可以分為三大類(lèi)：表達(dá)譜、分子標(biāo)志物和分子機(jī)制方向，其中表達(dá)譜思路的特點(diǎn)就是短平快、通常以測(cè)序數(shù)據(jù)為主要內(nèi)容，短平快發(fā)表3-5分文章。而分子標(biāo)志物的特點(diǎn)是在表達(dá)譜基礎(chǔ)之上加入大量樣本驗(yàn)證，建立ROC、KM曲線，分析分子與臨床疾病的相關(guān)性為主，通常文章影響因子在3-10分之間。分子機(jī)制研究，顧名思義要做到細(xì)胞功能、機(jī)制研究深度，因此工作量通常較大，影響因子通常能夠上10+。唐山正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過(guò)程，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)?？蓪⑼饷隗w吸附并分離出來(lái)。北京正規(guī)外...

外泌體（exosome），特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?，F(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有：肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。同時(shí)，不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來(lái)完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類(lèi)，包括外泌體、微泡和凋亡小體。外泌體的提取方法：密度梯度離心。重慶外泌體提取試劑...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表...

外泌體（exosome），特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?，F(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有：肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。同時(shí)，不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來(lái)完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類(lèi)，包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中，外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡...

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：在一些病癥微環(huán)境中，一些病癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng)；肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a，可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動(dòng)TLR8，使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路活化，從而導(dǎo)致一些病癥的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中，細(xì)胞間通訊扮演著重要的角色。據(jù)有關(guān)報(bào)道稱(chēng)，NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達(dá)與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外，啟動(dòng)的T細(xì)胞可以通過(guò)調(diào)控Fas信號(hào)通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9）的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)肺病的轉(zhuǎn)移。這些機(jī)制有望成為肺病治病的潛在靶點(diǎn)。雖然大多數(shù)外泌體都是促進(jìn)一...

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心，這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜，耗時(shí)，量少。外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無(wú)創(chuàng)診斷人尿液來(lái)源細(xì)胞的外泌體的獲取方法，是首先分離培養(yǎng)人尿液來(lái)源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基。徐州外泌體提取試劑...

外泌體（exosome），特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有：肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。同時(shí)，不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來(lái)完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類(lèi)，包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中，外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡...

industryTemplate外泌體提?。夯诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合。貴陽(yáng)外泌體提取試劑進(jìn)貨價(jià)外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測(cè)序的聯(lián)系緊密，研究思路可以分為三大類(lèi)：表達(dá)譜、分子標(biāo)志物和分子機(jī)制方向，其中表達(dá)譜思路的特點(diǎn)就是短平快、通常以測(cè)序數(shù)據(jù)為主要內(nèi)容，短平快發(fā)表3-5分文章。而分子標(biāo)志物的特點(diǎn)是在表達(dá)譜基礎(chǔ)之上加入大量樣本驗(yàn)證，建立ROC、KM曲線，分析分子與臨床疾病的相關(guān)性為主，通常文章影響因子在3-10分之間。分子機(jī)制研究，顧名思義要做到細(xì)胞功能、機(jī)制研究深度，因此工作量通常較大，影響因子通常能夠上10+。唐山正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹在體內(nèi)參...

當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí)，外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類(lèi)等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合，進(jìn)而啟動(dòng)靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，從而啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。有報(bào)道稱(chēng)一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。外泌體提?。嚎捎糜谑占笥?...

外泌體的提取、分離方法：尺寸排阻色譜法和超濾法；尺寸排阻色譜法是利用分子篩理論，較初是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術(shù)。該方法的主要優(yōu)點(diǎn)是不需要很大的離心力，從而保證了外泌體的完整性。Mol等[13]對(duì)比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白，結(jié)果顯示，后者得到的外泌體的蛋白豐度高于前者。這些基于過(guò)濾或尺寸排阻色譜的新方法為外泌體大規(guī)模的生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供了可能。超濾也是根據(jù)外泌體的尺寸將其分離出來(lái)的一種方法，超濾一般被認(rèn)為是外泌體分離過(guò)程中的一個(gè)準(zhǔn)備過(guò)程，通過(guò)超濾除去大分子和小分子的蛋白質(zhì)。不過(guò)連續(xù)的超濾可以分離出外泌體，和超高速離心相比，超濾不需要特殊的設(shè)備就可以較短時(shí)間內(nèi)分離出...

外泌體的提取、分離方法：聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史，近幾年，將其作為一種新的方法來(lái)分離外泌體。目前，市場(chǎng)已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒，較常見(jiàn)的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits，該試劑盒操作簡(jiǎn)單不需要特殊的儀器，但是價(jià)格昂貴。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細(xì)胞培養(yǎng)液4℃孵育過(guò)夜，之后再低速離心。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備，隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代，提取效率和純化效果逐漸提高。北京正規(guī)外泌體...

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm)，現(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。1983年，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊，對(duì)外泌體的研究興趣日益增...

外泌體（Exosomes）是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等），參與細(xì)胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、乳汁等，同時(shí)也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡(jiǎn)述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進(jìn)行消化，經(jīng)水浴、反復(fù)輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中，混勻，置于冰上。再進(jìn)行一系列的差速超速離心過(guò)程，包括除雜、濾膜過(guò)濾、超離等。較后用PBS...

外泌體提?。撼叽缗抛枭V。尺寸排阻色譜（Size-exclusionchromatography，SEC）是基于大小而非分子量實(shí)現(xiàn)分離大分子。該技術(shù)應(yīng)用填充多孔聚合物微球的柱子，分子根據(jù)其直徑通過(guò)微球，半徑小的分子需要更長(zhǎng)的時(shí)間才能通過(guò)色譜柱的孔隙遷移，而大分子則從色譜柱中更早地洗脫。尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子。此外，可以將不同的洗脫溶液應(yīng)用于該方法。與離心方法相比，色譜分離已被證明具有更多優(yōu)勢(shì)，因?yàn)橥ㄟ^(guò)色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，這可能會(huì)改變囊泡的結(jié)構(gòu)。目前，SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中外泌體的技術(shù)。不過(guò)，該方法耗時(shí)較長(zhǎng)，不適合大量樣本處理利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)...

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心，這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜，耗時(shí)，量少。外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無(wú)創(chuàng)診斷。外泌體提?。撼瑸V膜也可用于分離外泌體。無(wú)錫外泌體提取試劑直銷(xiāo)廠家外泌體的提取的方式：1、免疫...

有的外泌體分離方法需要高速離心，需要使用大型機(jī)器，耗費(fèi)近24小時(shí)的時(shí)間才能獲得，非常不便。而高離心力也可能破壞囊泡。降低樣品的質(zhì)量。這項(xiàng)研究有望解決這一難題。在論文中，研究人員們提供了一種通過(guò)微流體和聲學(xué)的獨(dú)特組合從體液樣品中捕獲外泌體的新穎方法。他們開(kāi)發(fā)的原始聲學(xué)分選裝置由兩個(gè)傾斜的聲學(xué)換能器和一個(gè)微流體通道組成，當(dāng)這些傳感器產(chǎn)生的聲波相互碰撞時(shí)，形成產(chǎn)生一系列壓力節(jié)點(diǎn)的駐波。每當(dāng)細(xì)胞或顆粒流過(guò)通道并遇到一個(gè)節(jié)點(diǎn)時(shí)，壓力會(huì)將細(xì)胞引導(dǎo)離開(kāi)中心一點(diǎn)點(diǎn)。細(xì)胞移動(dòng)的距離取決于大小和其他屬性（如可壓縮性），這樣，當(dāng)?shù)竭_(dá)通道末尾時(shí)，不同大小和性質(zhì)的細(xì)胞就能夠被分離開(kāi)來(lái)。這種方法分離得到的外泌體，基本上不...

具體步驟是:以下所有步驟都在4℃下進(jìn)行，1、300×g10min，棄沉淀，去除細(xì)胞2、2000×g20min，棄沉淀，去除死細(xì)胞3、10,000×g30min，棄沉淀，去除細(xì)胞碎片等亞細(xì)胞成分4、10,000×g70min，棄上清，沉淀即為外泌體5、PBS（每10ml細(xì)胞培養(yǎng)液用30mlPBS重懸）清洗沉淀物，混勻，10,000×g70min6、lmlPBS溶解沉淀（外泌體），立即使用或置于-80℃?zhèn)溆谩?、一般超速離心法會(huì)結(jié)合密度梯度離心，這樣得到的外泌體更純，具體做法第4步后蔗糖梯度離心，10,000×g70min，以去除密度大于1.21g/ml的顆粒。優(yōu)點(diǎn)是：成本低，操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡...

外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）。超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行，可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類(lèi)型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑；此外，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量。2.密度梯度離心。在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法。通過(guò)密度梯度離心，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時(shí)，對(duì)離心時(shí)間極為敏感。外泌體提?。夯诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)。天津正規(guī)外泌...

外泌體（exosomes）是活細(xì)胞經(jīng)過(guò)"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過(guò)程而形成的膜性囊泡，來(lái)源于晚期核內(nèi)體(也稱(chēng)為多囊泡體)，直徑約為30-150nm，密度在1.13-1.21g/ml，天然存在于血液、唾液、尿液及母乳等體液中，同時(shí)外泌體也存在于組織和細(xì)胞間隙中。人體中幾乎所有類(lèi)型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體，人體中大約有1014個(gè)外泌體，大約平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè)。外泌體中含有核酸（DNA、miRNA、lncRNA、mRNA、tRF等）、蛋白和脂類(lèi)，在細(xì)胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用，研究表明其在干細(xì)胞、免疫調(diào)控、瘤轉(zhuǎn)移、血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域都發(fā)揮著不可替代的作用外泌體檢...

外泌體（Exosomes）是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等），參與細(xì)胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、乳汁等，同時(shí)也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡(jiǎn)述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進(jìn)行消化，經(jīng)水浴、反復(fù)輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中，混勻，置于冰上。再進(jìn)行一系列的差速超速離心過(guò)程，包括除雜、濾膜過(guò)濾、超離等。較后用PBS...

在這項(xiàng)新的研究中，經(jīng)過(guò)基因修飾的外泌體（被稱(chēng)作iExosome）能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子，從而導(dǎo)致胰腺病模式小鼠病情緩解，增加它們的總存活率。這些研究人員采用了一種被稱(chēng)作RNA干擾（RNAi）的靶向方法：利用這些天然的納米顆粒（即外泌體）運(yùn)送小干擾RNA（siRNA）或短發(fā)夾RNA（shRNA）分子來(lái)靶向胰腺病細(xì)胞中的KRAS突變基因，從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負(fù)荷和存活。他們證實(shí)外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用，這是因?yàn)檫@些納米大小的囊泡（即外泌體）輕松地在體內(nèi)遷移和進(jìn)入靶細(xì)胞（包括病細(xì)胞）中。外泌體的提取方法：色譜法。蕪湖外泌體提取試劑外泌體是一...

由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo)，另一方面也可以作為治病手段，未來(lái)有可能作為藥物的天然載體用于臨床治病。外泌體的分離純化一直是科研工作者關(guān)注的問(wèn)題，獲得高純度的外泌體對(duì)后續(xù)的研究至關(guān)重要。據(jù)了解，目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、超濾、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過(guò)程，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：抽血技巧。鄭州外泌體提取試劑...

外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合，即可將外泌體吸附并分離出來(lái)。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以普遍普及。聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集菌類(lèi)，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽(yáng)性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)...

外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范、統(tǒng)一定量及鑒定等。關(guān)于外泌體的提取有超速離心、試劑盒、超濾法、蔗糖密度梯度離心等，然而各種方法均有其利弊。超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法，由于離心步驟繁瑣，費(fèi)事費(fèi)力，而且步驟多導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中容易污染，且損耗量大，使得較終回收的外泌體不穩(wěn)定。而且對(duì)于抽提細(xì)胞上清來(lái)說(shuō)，更是極為不請(qǐng)便，試想用提取300ml的上清需要6個(gè)50ml離心管，無(wú)論是過(guò)濾還是后續(xù)的每一步的離心去沉淀，都具有操作極其不便的缺點(diǎn)，總之非常麻煩。而超濾法存在外泌體會(huì)堵塞膜孔，造成濃縮效率低，濃縮管重復(fù)利用差，甚至堵塞在膜孔的外泌體還可能會(huì)粘連成團(tuán)，造成損失及較后的數(shù)據(jù)有誤差，對(duì)于后續(xù)實(shí)驗(yàn)也有影響。早...

專(zhuān)利申請(qǐng)利用分離培養(yǎng)人尿液來(lái)源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基來(lái)進(jìn)行體外培養(yǎng)，直接把外泌體從尿液中沉降下來(lái)，無(wú)須分離培養(yǎng)人尿液來(lái)源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基。人尿液來(lái)源細(xì)胞的外泌體的獲取方法，是首先分離培養(yǎng)人尿液來(lái)源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基，將人尿液來(lái)源細(xì)胞的培養(yǎng)基通過(guò)0.22微米濾膜過(guò)濾，以去除大的細(xì)胞殘片以及其它雜質(zhì)；然后離心除去細(xì)胞器，留取上清；再使用可截留100KD分子量的膜，通過(guò)離心截留上清中的外泌體，截留完成后，使用PBS對(duì)膜進(jìn)行洗脫即得到外泌體濃縮液。外泌體的提取、分離方法：免疫親和層析法。上海正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)如果您正在或者準(zhǔn)備或者計(jì)劃開(kāi)展外泌體研究，歡迎加入我們的外泌體小課堂。首先，來(lái)個(gè)自我介紹：(實(shí)物照...

外泌體的提取方法：1、色譜法。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對(duì)關(guān)系而對(duì)溶質(zhì)進(jìn)行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進(jìn)入凝膠孔，只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過(guò)色譜柱，首先被流動(dòng)相洗脫出來(lái)；小分子可進(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞，在柱中受到更強(qiáng)地滯留，更慢地被洗脫出。分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍。2、超濾離心。由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質(zhì)，利用不同截留相對(duì)分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離，便可獲得外泌體。超濾離心法簡(jiǎn)單高效，且不影響外泌體的生物活性，是提取細(xì)胞外泌體的一種新方法外泌體提取：小分子可進(jìn)入凝膠中...

外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體，可通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體，內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間，其中包含RNA、蛋白質(zhì)、microRNA、DN**段等多種物質(zhì)，存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史，雖然較初被認(rèn)為可能是細(xì)胞的“垃圾”，所以才被排出來(lái)，但是近年來(lái)研究表明外泌體具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞。如今，研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中、一些病癥細(xì)胞發(fā)生的發(fā)展、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中都發(fā)揮著重要作用。專(zhuān)利申請(qǐng)利用分離培養(yǎng)人尿液來(lái)源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基來(lái)進(jìn)行體外培養(yǎng)。外泌體...

外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開(kāi)發(fā)的外泌體快速提取試劑盒，組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化處理，適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液（腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過(guò)濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項(xiàng)：1.對(duì)于待測(cè)樣品粘度過(guò)大時(shí)，可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高，收獲的外泌體顆粒無(wú)法通過(guò)EPF柱純化時(shí)，可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過(guò)EPF柱離心。3.針對(duì)外泌體標(biāo)志蛋白（CD63,CD9,CD...

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：在一些病癥微環(huán)境中，一些病癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng)；肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a，可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動(dòng)TLR8，使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路活化，從而導(dǎo)致一些病癥的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中，細(xì)胞間通訊扮演著重要的角色。據(jù)有關(guān)報(bào)道稱(chēng)，NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達(dá)與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外，啟動(dòng)的T細(xì)胞可以通過(guò)調(diào)控Fas信號(hào)通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9）的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)肺病的轉(zhuǎn)移。這些機(jī)制有望成為肺病治病的潛在靶點(diǎn)。雖然大多數(shù)外泌體都是促進(jìn)一...