ELISA即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定,ELISA試劑盒基于這一原理發(fā)揮作用。它主要利用抗原與抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)。在試劑盒中,酶被標(biāo)記在抗體或抗原上。首先將樣本(可能含有待測(cè)抗原或抗體)加入到預(yù)先包被有特異性抗體或抗原的微孔板中。如果樣本中存在目標(biāo)物質(zhì),就會(huì)與包被物結(jié)合。然后加入標(biāo)記的抗體或抗原,再次特異性結(jié)合。加入底物,被標(biāo)記的酶會(huì)催化底物發(fā)生...
查看詳細(xì) >>操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空...
查看詳細(xì) >>間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;4.(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;6.’*...
查看詳細(xì) >>ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反...
查看詳細(xì) >>ELISA試劑盒的靈敏度是其重要特性之一。高靈敏度意味著它能夠檢測(cè)到極低濃度的目標(biāo)物質(zhì)。這得益于ELISA反應(yīng)中抗原-抗體特異性結(jié)合的高度親和性以及酶放大信號(hào)的作用。在一些疾病的早期診斷中,例如標(biāo)志物的檢測(cè),靈敏度高的ELISA試劑盒可以在發(fā)生早期,體內(nèi)標(biāo)志物含量極低時(shí)就檢測(cè)到其存在。例如前列腺特異抗原(PSA)的檢測(cè),靈敏的ELISA試...
查看詳細(xì) >>間接ELISA試劑盒是一種常見(jiàn)的類型。它的工作流程具有獨(dú)特之處。首先,將抗原包被在微孔板上。然后加入待檢測(cè)的樣本,樣本中的抗體如果與包被的抗原特異性結(jié)合,就會(huì)附著在微孔板上。接著加入酶標(biāo)記的二抗,二抗是針對(duì)樣本中抗體的抗體,例如如果樣本中的抗體是鼠源的,那么酶標(biāo)記的二抗可能是抗鼠IgG的抗體。二抗會(huì)與已經(jīng)結(jié)合在抗原上的抗體特異性結(jié)合。加入...
查看詳細(xì) >>安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。5.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑...
查看詳細(xì) >>ELISA試劑盒在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中也扮演著重要角色。以有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)為例,由于有機(jī)磷農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中普遍使用,其殘留可能會(huì)污染農(nóng)產(chǎn)品。ELISA試劑盒的微孔板可以固定有針對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的特異性抗體。當(dāng)農(nóng)產(chǎn)品樣本中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留與抗體結(jié)合后,再經(jīng)過(guò)酶標(biāo)記和底物反應(yīng),就能夠檢測(cè)出農(nóng)藥殘留量。這種檢測(cè)方法具有快速、簡(jiǎn)便、成本相對(duì)較低等優(yōu)點(diǎn),能...
查看詳細(xì) >>夾心ELISA試劑盒在檢測(cè)大分子抗原時(shí)具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。它采用了雙抗體夾心法的原理。首先將捕獲抗體包被在微孔板上。然后加入含有待測(cè)抗原的樣本,抗原會(huì)與捕獲抗體特異性結(jié)合。接著加入檢測(cè)抗體,檢測(cè)抗體也是針對(duì)待測(cè)抗原的特異性抗體,但與捕獲抗體識(shí)別抗原的不同位點(diǎn)。檢測(cè)抗體與已經(jīng)結(jié)合在捕獲抗體上的抗原結(jié)合,形成“抗體-抗原-抗體”的夾心結(jié)構(gòu)。加入酶...
查看詳細(xì) >>ELISA試劑盒根據(jù)檢測(cè)物可分為多種類型。例如檢測(cè)抗原的試劑盒,這類試劑盒常用于檢測(cè)病原體相關(guān)抗原,像檢測(cè)流感病毒抗原的ELISA試劑盒,能快速在患者樣本中確定是否存在流感病毒抗原,有助于疾病的早期診斷。還有檢測(cè)抗體的ELISA試劑盒,在傳染病診斷中廣泛應(yīng)用,如檢測(cè)乙肝抗體的試劑盒,通過(guò)檢測(cè)人體血液中的乙肝抗體水平來(lái)判斷是否***過(guò)乙肝病...
查看詳細(xì) >>ELISA試劑盒在自身免疫性疾病的檢測(cè)中具有重要意義。自身免疫性疾病是由于機(jī)體免疫系統(tǒng)錯(cuò)誤地攻擊自身組織而引起的疾病。在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的檢測(cè)中,ELISA試劑盒可以檢測(cè)類風(fēng)濕因子(RF)和抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體等標(biāo)志物。這些標(biāo)志物在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的血清中常常升高,通過(guò)檢測(cè)它們可以輔助診斷疾病、評(píng)估疾病的活動(dòng)程度。對(duì)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡(S...
查看詳細(xì) >>藥物毒性檢測(cè)是藥物研發(fā)的重要環(huán)節(jié),ELISA試劑盒在其中發(fā)揮著作用。藥物可能會(huì)對(duì)機(jī)體的各個(gè)***和系統(tǒng)產(chǎn)生毒性作用,如肝臟毒性、腎臟毒性等。ELISA試劑盒可以檢測(cè)與藥物毒性相關(guān)的生物標(biāo)志物。例如,在檢測(cè)肝臟毒性時(shí),可以檢測(cè)血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)等酶的水平,這些酶的升高可能提示肝臟受到藥物損傷。通過(guò)ELISA試...
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