尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測(cè)和分離細(xì)菌的生化培養(yǎng)基,特別是那些能夠產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌,如某些變形桿菌和幽門螺旋桿菌。以下是尿素培養(yǎng)基的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨:1.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:1.0g-磷酸二氫鉀:2.0g-酚紅:0.012g-瓊脂:20.0g-蒸餾水:1000ml-40%尿素水:5ml2.**配制方法**:-將上述成分(除葡萄糖和尿素外)溶解在蒸餾水中,加熱煮沸,調(diào)節(jié)pH至7.2,過(guò)濾。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入無(wú)菌的40%尿素水5ml,混勻。-分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?.**用途**:-主要用于細(xì)菌的脲酶檢測(cè)。-用于鑒定變形桿菌屬和其他能夠分解尿素的細(xì)菌。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)24-48小時(shí)。5.**觀察指標(biāo)**:-培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,當(dāng)細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶分解尿素產(chǎn)生氨時(shí),培養(yǎng)基顏色由黃色變?yōu)榧t色,表示細(xì)菌具有脲酶活性。6.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質(zhì)期三年。7.**注意事項(xiàng)**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸。-配制過(guò)程中應(yīng)在無(wú)菌條件下操作。尿素培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在檢測(cè)和研究能夠分解尿素的細(xì)菌方面。海藻糖-脯氨酸培養(yǎng)基被推薦用于稀有放線菌的分離培養(yǎng)基,因?yàn)樗兄谔岣呦∮蟹啪€菌的出菌率 。堿性膽鹽瓊脂平板
嗜鹽菌選擇性瓊脂是一種專門用于分離和培養(yǎng)嗜鹽菌的培養(yǎng)基,其特點(diǎn)和應(yīng)用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化鈉:40.0g/L-結(jié)晶紫:0.0005g/L-瓊脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生長(zhǎng)。-高含量的氯化鈉創(chuàng)造高滲環(huán)境,有利于嗜鹽菌的生長(zhǎng),同時(shí)抑制不耐高鹽的細(xì)菌。-結(jié)晶紫抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)。-瓊脂作為凝固劑,使培養(yǎng)基凝固成固體。-高pH值有助于抑制部分雜菌的生長(zhǎng)。3.**配制方法**:-稱取77.0g培養(yǎng)基粉末,加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中。-分裝后,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**使用方法**:-將培養(yǎng)基傾注成平板,待凝固后使用。-接種樣品后,放置于36±1℃恒溫培養(yǎng)箱中需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。5.**細(xì)菌生長(zhǎng)特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:無(wú)色菌落,較濕潤(rùn)。-溶藻弧菌ATCC17749:無(wú)色菌落。-金黃色葡萄球菌ATCC25923:抑制生長(zhǎng)。6.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:-按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置于36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。-回收率計(jì)算時(shí),用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。卵黃氯化鈉瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿巴氏芽孢桿菌的芽孢形成需要特定的培養(yǎng)條件,包括營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境因素。例如,使用改良的Schaeffer培養(yǎng)基。
四號(hào)瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-無(wú)水亞硫酸鈉:3.0g-十二烷基硫酸鈉:0.5g-豬膽汁粉:5.0g-雷佛奴爾:0.03g-慶大霉素:500U-瓊脂:15.0g-pH值約為8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉,加入到1L蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-冷卻至50-55℃時(shí),每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。-待凝固后備用。4.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。-氯化鈉維持均衡的滲透壓。-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長(zhǎng)。-檸檬酸鈉、十二烷基硫酸鈉、牛膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性雜菌。-霍亂弧菌對(duì)酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強(qiáng)其生長(zhǎng)。-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
芽孢桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)是一種專為芽孢桿菌屬細(xì)菌設(shè)計(jì)的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:通常包含碳源、氮源以及促進(jìn)芽孢形成的必需微量元素。例如,葡萄糖作為碳源,硫酸銨或酵母提取物作為氮源。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃),以保證細(xì)菌的良好生長(zhǎng)。3.**配方**:一個(gè)典型的芽孢桿菌培養(yǎng)基配方可能包含葡萄糖、磷酸鈣、硫酸銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵和酵母提取物等成分。4.**制備方法**:首先稱取培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,接種菌種,并在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時(shí)間。5.**應(yīng)用**:主要用于芽孢桿菌的平板計(jì)數(shù),可以用于檢測(cè)和分離芽孢桿菌,包括枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等。6.**注意事項(xiàng)**:由于培養(yǎng)基中含有不溶性磷酸鈣,滅菌后可能會(huì)有白色沉淀,因此在倒平板前需要充分搖勻培養(yǎng)基,以確保磷酸鈣均勻分布。7.**質(zhì)量控制**:接種質(zhì)控菌株后,應(yīng)在36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72小時(shí),以驗(yàn)證培養(yǎng)基的性能和菌株的生長(zhǎng)情況。哥倫比亞肉湯能夠支持包括細(xì)菌、酵母和霉菌在內(nèi)的多種微生物的生長(zhǎng),尤其適合培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求高的微生物。
DCR培養(yǎng)基是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,它支持植物細(xì)胞、組織的生長(zhǎng)和發(fā)育。以下是DCR培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:-包含大量元素(如硝酸銨、硝酸鉀、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣等)、微量元素(如硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、碘化鉀等)、鐵鹽(如硫酸亞鐵、EDTA二鈉)和有機(jī)物(如鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、甘氨酸、肌醇)。2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末1428.68mg/L,溶于1000ml蒸餾水或去離子水中。-加入1ml/L的1000×鈣濃縮液。-使用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至5.8-6.2。-115℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:-主要用于植物組織培養(yǎng),包括細(xì)胞、組織的生長(zhǎng)和發(fā)育。4.**保存條件**:-2-8°C保存。5.**注意事項(xiàng)**:-避免吸入、攝入或皮膚接觸。-配制過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格按配方配制。-pH調(diào)節(jié)不宜過(guò)高或過(guò)低。-培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌檢查。6.**特別說(shuō)明**:-不適宜制備高濃度母液,會(huì)有沉淀產(chǎn)生。DCR培養(yǎng)基的配方是完全定義的,不含動(dòng)物衍生成分,從而減少了潛在的影響和免疫反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)。這種培養(yǎng)基在植物組織培養(yǎng)中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在研究植物細(xì)胞重編程、干細(xì)胞和組織工程等領(lǐng)域。巴氏芽孢桿菌的芽孢因其高抵抗力和在惡劣條件下存活的能力,在生物技術(shù)領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用潛力。改良BPLS瓊脂培養(yǎng)皿
在冷凍保存過(guò)程中,使用保護(hù)劑如甘油、血清、糖類等,可以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害 。堿性膽鹽瓊脂平板
胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA)是一種常用的微生物固體培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于各種細(xì)菌的分離和培養(yǎng)。以下是TSA培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**成分**:TSA培養(yǎng)基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone,15g/L)、大豆胨(Soytone,5g/L)、氯化鈉(5g/L)和瓊脂(15g/L),這些成分為細(xì)菌提供氮源、維生素、生長(zhǎng)因子以及維持滲透壓和凝固培養(yǎng)基。2.**pH值**:TSA培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.3±0.2(25℃),以滿足大多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)的需要。3.**用途**:TSA培養(yǎng)基適用于多種細(xì)菌的培養(yǎng),包括非選擇性增菌培養(yǎng)及用于阪崎腸桿菌的純化培養(yǎng)和產(chǎn)黃色素試驗(yàn)。4.**制備方法**:將TSA培養(yǎng)基的干粉加入到蒸餾水中,加熱攪拌至完全溶解,通常分裝到試管或平皿中,經(jīng)過(guò)高壓滅菌后備用。5.**保存條件**:未開(kāi)封的TSA培養(yǎng)基通常在室溫下避光保存,保質(zhì)期可達(dá)三年。開(kāi)封后應(yīng)旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊,并根據(jù)存放條件適當(dāng)延長(zhǎng)保存期。6.**注意事項(xiàng)**:在稱量和操作過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免微生物污染。使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。粉塵可能引起呼吸道不適,操作時(shí)應(yīng)佩戴口罩。7.**應(yīng)用**:TSA培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品檢測(cè)和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。堿性膽鹽瓊脂平板