疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)(AzideBloodAgarBase)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于從糞便、污水和其他樣本中分離和檢測(cè)鏈球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特點(diǎn)和配制方法:**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化鈉、疊氮鈉和瓊脂等成分,其中疊氮鈉作為選擇性抑制劑,對(duì)大多數(shù)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,但允許某些革蘭氏陽(yáng)性菌如鏈球菌和葡萄球菌的生長(zhǎng)。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**應(yīng)用**:除了用于分離培養(yǎng)鏈球菌和葡萄球菌,疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)還可用于測(cè)定溶血反應(yīng)。4.**溶血反應(yīng)**:在該培養(yǎng)基上,可以觀察到α溶血(培養(yǎng)基變綠)、β溶血(菌落周圍培養(yǎng)基變透明)和γ溶血(培養(yǎng)基無變化)。**配制方法**:1.稱取33.2g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.121℃高壓滅菌15分鐘。4.冷卻至50℃左右,加入50mL無菌羊血,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。**注意事項(xiàng)**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸疊氮鈉,配制時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,并佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備。-培養(yǎng)基中含有的疊氮鈉具有劇毒,應(yīng)妥善處理和保存。GAM肉湯用于厭氧菌的培養(yǎng),是一般培養(yǎng)基的基礎(chǔ)。它營(yíng)養(yǎng)豐富,使用時(shí)無需加血,適用于各類厭氧菌的增菌 。BCYE鑒別瓊脂平板
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)是一種專門設(shè)計(jì)用于分離和培養(yǎng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。除了李斯特氏菌,它也可以用來分離其他類型的細(xì)菌,盡管其選擇性成分主要針對(duì)李斯特氏菌。**特點(diǎn)**:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七葉苷、檸檬酸鐵銨、葡萄糖、氯化鋰、瓊脂和酚紅等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌,特別是非李斯特氏菌的生長(zhǎng)。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長(zhǎng)時(shí),會(huì)水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。盡管PALCAM瓊脂基礎(chǔ)主要用于李斯特氏菌的分離,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和腸球菌等,偶爾也能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng),利用甘露醇產(chǎn)酸使菌落和其周圍的培養(yǎng)基呈黃色。
尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測(cè)和分離細(xì)菌的生化培養(yǎng)基,特別是那些能夠產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌,如某些變形桿菌和幽門螺旋桿菌。以下是尿素培養(yǎng)基的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨:1.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:1.0g-磷酸二氫鉀:2.0g-酚紅:0.012g-瓊脂:20.0g-蒸餾水:1000ml-40%尿素水:5ml2.**配制方法**:-將上述成分(除葡萄糖和尿素外)溶解在蒸餾水中,加熱煮沸,調(diào)節(jié)pH至7.2,過濾。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入無菌的40%尿素水5ml,混勻。-分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?.**用途**:-主要用于細(xì)菌的脲酶檢測(cè)。-用于鑒定變形桿菌屬和其他能夠分解尿素的細(xì)菌。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)24-48小時(shí)。5.**觀察指標(biāo)**:-培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,當(dāng)細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶分解尿素產(chǎn)生氨時(shí),培養(yǎng)基顏色由黃色變?yōu)榧t色,表示細(xì)菌具有脲酶活性。6.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質(zhì)期三年。7.**注意事項(xiàng)**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸。-配制過程中應(yīng)在無菌條件下操作。尿素培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在檢測(cè)和研究能夠分解尿素的細(xì)菌方面。
酵母浸粉葡萄糖瓊脂(YPDA)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,尤其是在酵母菌的培養(yǎng)中。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和瓊脂。具體配方為1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固體培養(yǎng)基,加入2%瓊脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常調(diào)節(jié)在6.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。葡萄糖溶液滅菌后加入,以避免高溫下可能發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)導(dǎo)致培養(yǎng)基成分變化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培養(yǎng),也用于藥品和生物制品中含王漿和蜂蜜的合劑酵母菌數(shù)測(cè)定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g瓊脂粉,然后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**儲(chǔ)存條件**:液體YPDA培養(yǎng)基可常溫保存;瓊脂YPDA平板在4℃可保存幾個(gè)月。7.**微生物生長(zhǎng)特征**:不同細(xì)菌在酵母浸粉葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌則有黑色孢子。PYG培養(yǎng)基的干粉應(yīng)在避光、干燥處保存,未開封的保質(zhì)期通常為三年。使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊 。
Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細(xì)菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些特點(diǎn):1.**無血培養(yǎng)基**:Karmali氏培養(yǎng)基是一種無血的培養(yǎng)基,這使得它在某些應(yīng)用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟(jì)。2.**選擇性培養(yǎng)**:該培養(yǎng)基含有萬古霉素(vancomycin)和兩性霉素B(amphotericinB)等選擇性添加劑,這些添加劑有助于抑制其他非目標(biāo)微生物的生長(zhǎng),從而提高目標(biāo)彎曲桿菌的分離率。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,Karmali氏培養(yǎng)基通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長(zhǎng)。4.**菌落特征**:在42°C下培養(yǎng)42小時(shí)后,空腸彎曲桿菌菌株在這種培養(yǎng)基上通常產(chǎn)生灰色、濕潤(rùn)、平鋪的菌落,這些特征有助于識(shí)別彎曲桿菌。5.**配方**:Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方包含特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化鈉、活性碳和血晶素(hemin),以及瓊脂作為固化劑。這些成分為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供了必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并且活性碳有助于中和代謝產(chǎn)生的產(chǎn)物。6.**應(yīng)用**:這種培養(yǎng)基被ISO委員會(huì)推薦使用,適用于從食品、動(dòng)物飼料和臨床樣本中分離彎曲桿菌。明膠的凝固點(diǎn)在28℃左右,受運(yùn)輸過程的溫度及震蕩影響,出現(xiàn)培養(yǎng)基在管壁凝固形成不規(guī)則狀,此為正?,F(xiàn)象。BCYE鑒別瓊脂平板
KI培養(yǎng)基主要用于鑒別腸道菌發(fā)酵葡萄糖和乳糖的能力,以及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)。BCYE鑒別瓊脂平板
四號(hào)瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-無水亞硫酸鈉:3.0g-十二烷基硫酸鈉:0.5g-豬膽汁粉:5.0g-雷佛奴爾:0.03g-慶大霉素:500U-瓊脂:15.0g-pH值約為8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉,加入到1L蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-冷卻至50-55℃時(shí),每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。-待凝固后備用。4.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。-氯化鈉維持均衡的滲透壓。-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長(zhǎng)。-檸檬酸鈉、十二烷基硫酸鈉、牛膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性雜菌。-霍亂弧菌對(duì)酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強(qiáng)其生長(zhǎng)。-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。BCYE鑒別瓊脂平板