使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
濾膜腸球菌瓊脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一種用于分離和計數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基。它通常用于水或其他樣品中腸球菌的濾膜法分離或計數(shù)。**特點**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、疊氮化鈉和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物(TTC)等。其中,胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源,疊氮化鈉作為抑菌劑抑制非腸球菌生長,TTC作為顯色劑使腸球菌菌落呈現(xiàn)紅色。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為腸球菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:適用于水和污水中腸球菌的檢測,也可用于食品樣本中腸球菌的分離和計數(shù)。4.**配制方法**:稱取培養(yǎng)基42g,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,冷卻至45-50℃時傾入無菌平皿,備用。無需高壓滅菌。5.**結(jié)果觀察**:腸球菌在濾膜腸球菌瓊脂上通常形成紅色菌落,便于識別和計數(shù)。濾膜腸球菌瓊脂因其高選擇性和特異性,是檢測水和食品樣本中腸球菌污染的重要工具。TSAP培養(yǎng)皿CAS培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于細菌鐵載體的篩選試驗,特別是在研究植物根際促生菌和微生物與植物相互作用的領(lǐng)域 。
SlantzandBartley培養(yǎng)基是一種專門設(shè)計用于分離和計數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于水和食品樣本中的腸球菌檢測。以下是它的一些特點:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、磷酸二氫鉀、疊氮鈉和瓊脂等成分。其中,胰蛋白胨和酵母提取物提供細菌生長所需的營養(yǎng)物質(zhì),葡萄糖作為碳源,磷酸二氫鉀作為緩沖劑,疊氮鈉作為抑菌劑抑制革蘭氏陰性菌的生長,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25°C),為腸球菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:疊氮鈉對革蘭氏陰性菌具有抑制作用,確保培養(yǎng)基的選擇性。4.**應(yīng)用**:開始設(shè)計用于通過膜過濾技術(shù)檢測和計數(shù)腸球菌,但也證明作為直接涂布培養(yǎng)基同樣有效。5.**配制方法**:通常稱取41.5g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水,加熱至沸騰以溶解瓊脂,高壓滅菌20分鐘。滅菌后冷卻至45-50°C,并分裝進培養(yǎng)皿。6.**質(zhì)量控制**:通過特定的質(zhì)控菌株進行測試,確保培養(yǎng)基支持目標菌株的生長。例如,腸球菌ATCC29212在該培養(yǎng)基上應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長,而大腸桿菌ATCC25922則應(yīng)被抑制。7.**儲存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應(yīng)密封保存在15-30°C的陰涼干燥處。配制好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2-8°C。
四號瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些關(guān)鍵特點和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-無水亞硫酸鈉:3.0g-十二烷基硫酸鈉:0.5g-豬膽汁粉:5.0g-雷佛奴爾:0.03g-慶大霉素:500U-瓊脂:15.0g-pH值約為8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉,加入到1L蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-冷卻至50-55℃時,每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。-待凝固后備用。4.**檢驗原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長因子。-氯化鈉維持均衡的滲透壓。-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長。-檸檬酸鈉、十二烷基硫酸鈉、牛膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑制革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性雜菌。-霍亂弧菌對酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強其生長。-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。下層培養(yǎng)基成分則包括血消化湯、瓊脂、葡萄糖和酚紅溶液。這些成分為細菌提供碳源、氮源。
TGE肉湯(TryptoneGlucoseExtractBroth),又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉湯,是一種用于微生物培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖,以及作為指示劑的TTC(三苯基四氮唑氯化物)。TGE肉湯(含TTC)的主要用途和特點如下:1.**用途**:TGE肉湯主要用于水、牛奶和乳制品中異養(yǎng)細菌的計數(shù)。它適用于細菌總數(shù)的測定,也可用于檢測乳品中的耐熱細菌。2.**成分**:典型的TGE肉湯配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子,葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類提供能量。3.**pH值**:TGE肉湯的pH值通常調(diào)節(jié)在7.0±0.2(25℃)。4.**制備方法**:將TGE肉湯的干粉溶解在蒸餾水中,加熱煮沸以幫助成分溶解,然后進行高壓滅菌。5.**使用**:通常取一定量的培養(yǎng)基加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌,然后用于微生物的培養(yǎng)。6.**指示劑**:TTC作為指示劑,當細菌代謝時,TTC會被還原成紅色的三苯基甲烷,從而便于觀察細菌的生長情況。7.**保存條件**:未開封的TGE肉湯通常在室溫下避光保存,開封后應(yīng)旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊,并根據(jù)存放條件適當延長保存期。
TSFA主要用于乳制品中嗜冷菌菌落總數(shù)和需氧芽孢總數(shù)的測定,對于確保乳制品的質(zhì)量和安全至關(guān)重要 。含糖牛肉湯瓊脂培養(yǎng)皿
DCR培養(yǎng)基是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,它支持植物細胞、組織的生長和發(fā)育。以下是DCR培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點和配制方法:1.**配方組成**:-包含大量元素(如硝酸銨、硝酸鉀、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣等)、微量元素(如硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、碘化鉀等)、鐵鹽(如硫酸亞鐵、EDTA二鈉)和有機物(如鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、甘氨酸、肌醇)。2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末1428.68mg/L,溶于1000ml蒸餾水或去離子水中。-加入1ml/L的1000×鈣濃縮液。-使用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至5.8-6.2。-115℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:-主要用于植物組織培養(yǎng),包括細胞、組織的生長和發(fā)育。4.**保存條件**:-2-8°C保存。5.**注意事項**:-避免吸入、攝入或皮膚接觸。-配制過程中應(yīng)嚴格按配方配制。-pH調(diào)節(jié)不宜過高或過低。-培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)進行無菌檢查。6.**特別說明**:-不適宜制備高濃度母液,會有沉淀產(chǎn)生。DCR培養(yǎng)基的配方是完全定義的,不含動物衍生成分,從而減少了潛在的影響和免疫反應(yīng)風險。這種培養(yǎng)基在植物組織培養(yǎng)中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在研究植物細胞重編程、干細胞和組織工程等領(lǐng)域。含糖牛肉湯瓊脂培養(yǎng)皿