蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎(chǔ)(TSSB)是一種用于分離和培養(yǎng)蠟樣芽孢桿菌(Bacilluscereus)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎(chǔ)的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化鈉、苯酚紅和瓊脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作為可發(fā)酵的糖,氯化鈉維持滲透壓,苯酚紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黃乳液使用,每100ml蠟樣芽孢桿菌選擇性瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黃乳液。5.**用法**:稱取本品43.0g加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時,每瓶加入10ml50%的無菌卵黃乳液和多粘菌素B10000IU混勻,傾入無菌平皿,備用。6.**菌落特征**:蠟樣芽孢桿菌在TSSB上生長時,菌落通常為微粉紅色,周圍有淡粉紅色沉淀環(huán),這有助于識別蠟樣芽孢桿菌。7.**質(zhì)量控制**:進(jìn)行微生物靈敏度試驗時,按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時。通過進(jìn)一步的生化測試,如氧化/發(fā)酵葡萄糖測試、花青素鑒定等,來進(jìn)一步確認(rèn)分離的菌株是否為目標(biāo)腸道菌。TSAM預(yù)裝培養(yǎng)皿
TYC培養(yǎng)基(TryptoneYeastCystineMedium)是一種用于分離口腔中鏈球菌(Streptococcusspp)的選擇性培養(yǎng)基。除了用于分離血鏈球菌外,TYC培養(yǎng)基也可以用于制備變形鏈球菌(Streptococcusmutans)的分離培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亞硫酸鈉、氯化鈉、磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等成分,瓊脂作為凝固劑,pH值調(diào)整至7.3±0.2(25℃)。TYC培養(yǎng)基通過其成分提供了細(xì)菌生長所需的氮源、碳源、維生素和生長因子。其中,L-胱氨酸和亞硫酸鈉有助于抑制某些非目標(biāo)細(xì)菌的生長,而促進(jìn)目標(biāo)鏈球菌的生長。此外,TYC培養(yǎng)基也可以添加桿菌肽(0.2U/ml)以增加其選擇性。在實驗室中,TYC培養(yǎng)基通常按照以下方法配制:1.稱取98.0g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。4.滅菌結(jié)束后搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。5.如有需要,培養(yǎng)基冷卻至50~55℃時,可選擇性添加過濾除菌的桿菌肽0.2U/ml以增加選擇性。TYC培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和臨床診斷中具有重要應(yīng)用,特別是在口腔微生物的檢測和研究中。Dey/Engley中和瓊脂平板在臨床實驗室中,BHI Agar常用于從患者樣本(如血液、尿液、腦脊液等)中分離和培養(yǎng)病原微生物。
酪蛋白瓊脂是一種專門用于微生物學(xué)研究的培養(yǎng)基,尤其適用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:酪蛋白瓊脂的基礎(chǔ)成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化鈉、磷酸氫二鉀、瓊脂和溴百里香酚蘭。其中,酪蛋白作為主要的氮源和蛋白分解能力的指示劑,牛肉浸粉提供額外的氮源和維生素,氯化鈉維持滲透壓平衡,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,溴百里香酚蘭作為pH指示劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.4±0.1(25℃),以保證細(xì)菌在比較好pH環(huán)境下生長。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保無菌。4.**使用方法**:稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入到1升蒸餾水中,加熱至完全溶解,然后進(jìn)行滅菌處理。冷卻至適當(dāng)溫度后倒入培養(yǎng)皿中,待凝固后用于微生物的培養(yǎng)。5.**培養(yǎng)特征**:在酪蛋白瓊脂上,蠟樣芽孢桿菌能產(chǎn)生酪蛋白酶,分解酪蛋白,使菌落周圍的培養(yǎng)基形成透明圈。這種透明圈的形成是鑒定蠟樣芽孢桿菌的重要依據(jù)。同時,溴百里香酚蘭的顏色變化(由綠變藍(lán))也有助于觀察結(jié)果。6.**質(zhì)量控制**:通過接種質(zhì)控菌株并觀察培養(yǎng)特征來驗證培養(yǎng)基的質(zhì)量。
輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)輕型唾液鏈球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是使用輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)進(jìn)行細(xì)菌分離和鑒定的步驟:1.**制備培養(yǎng)基**:-稱取90gMSA粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-加熱煮沸至完全溶解。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入1mL無菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。2.**接種樣本**:-將待測樣本如咽拭子、尿液或其他臨床樣本進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尅?將稀釋后的樣本均勻地涂布在MSA平板上。3.**培養(yǎng)**:-將接種后的培養(yǎng)皿置于35-37°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48小時。4.**觀察菌落生長**:-觀察培養(yǎng)基上生長的菌落,注意菌落的顏色、形態(tài)和大小。-腸球菌在MSA上通常形成藍(lán)色-黑色的菌落。5.**挑選可疑菌落**:-挑取可疑的菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)。6.**進(jìn)行生化試驗**:-對純化后的菌株進(jìn)行一系列的生化試驗,如糖發(fā)酵試驗、CAMP試驗、膽汁七葉苷試驗等,以進(jìn)一步鑒定菌種。7.**結(jié)果分析**:-根據(jù)菌落特征和生化試驗結(jié)果,結(jié)合菌株的形態(tài)學(xué)特征,進(jìn)行菌種的鑒定。8.**報告結(jié)果**:-將鑒定結(jié)果整理成報告,包括菌株的名稱、數(shù)量和相關(guān)的生化特性。胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)皿也被廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域,如水質(zhì)、空氣、食品等樣品的微生物檢測。
TCBS瓊脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一種用于分離培養(yǎng)弧菌科細(xì)菌,特別是致病性弧菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸鈉:10.0g/L-枸櫞酸鈉:10.0g/L-牛膽粉:5.0g/L-牛膽酸鈉:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化鈉:10.0g/L-檸檬酸鐵:1.0g/L-溴麝香草酚蘭:0.04g/L-麝香草酚蘭:0.04g/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及維生素等生長因子。-氯化鈉提供弧菌嗜鹽生長的環(huán)境,高濃度抑制其他細(xì)菌生長。-蔗糖作為可發(fā)酵碳源。-枸櫞酸鈉、高pH值和硫代硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群生長。-硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵反應(yīng),檢測細(xì)菌產(chǎn)硫化氫。-溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭作為pH指示劑,細(xì)菌利用蔗糖產(chǎn)酸會使得指示劑變黃。-瓊脂作為凝固劑。3.**使用方法**:-稱取8.9g培養(yǎng)基,溶解于100ml蒸餾水中,煮沸后冷卻至50℃,傾入無菌平皿,備用。-注意:無需高壓滅菌。4.**不同細(xì)菌在TCBS瓊脂上的生長特征**:-副溶血性弧菌:藍(lán)綠色斗笠狀菌落,H2S陰性。-溶藻弧菌:黃色菌落,H2S陰性。-霍亂弧菌:黃色菌落,H2S陰性。
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養(yǎng)皿是一種培養(yǎng)基,通常用于選擇性分離和鑒定革蘭氏陰性腸道細(xì)菌。TSAM預(yù)裝培養(yǎng)皿
支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含精氨酸)是一種專門用于培養(yǎng)支原體的培養(yǎng)基,它包含精氨酸作為生長因子,適用于那些需要精氨酸才能生長的支原體,如口腔支原體等。以下是該培養(yǎng)基的一些特點和配制方法:1.**配方組成**:通常包含豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、葡萄糖、L-精氨酸和酚紅等成分。2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末,按照說明書比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸餾水中。-加熱溶解并調(diào)節(jié)pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至室溫后,無菌操作下加入滅活小牛血清或馬血清(通常為200mL)和青霉素(通常為80萬單位)。-混勻后分裝到無菌試管中備用。3.**用途**:主要用于藥品和生物制品中支原體的檢測,特別是口腔支原體的培養(yǎng)和檢測。4.**培養(yǎng)條件**:通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)7-14天。5.**觀察指標(biāo)**:培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,支原體生長時會因代謝產(chǎn)物改變培養(yǎng)基的pH值,導(dǎo)致顏色變化。例如,口腔支原體分解精氨酸產(chǎn)堿,使培養(yǎng)基顏色由橙色變?yōu)榧t色。6.**質(zhì)量控制**:通過接種已知的質(zhì)控菌株來驗證培養(yǎng)基的靈敏度和有效性。TSAM預(yù)裝培養(yǎng)皿