pH7.4磷酸鹽緩沖液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一種廣而使用的生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖溶液,具有以下特點(diǎn):1.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.4左右,接近人體血液的pH值,適合細(xì)胞和生物分子的生理?xiàng)l件。2.**成分**:主要由磷酸二氫鈉(NaH2PO4)和磷酸氫二鈉(Na2HPO4)組成,這兩種鹽在溶液中可以形成緩沖體系,維持pH值的穩(wěn)定。3.**離子強(qiáng)度**:PBS具有一定的離子強(qiáng)度,可以模擬細(xì)胞外液的離子環(huán)境,有助于保持細(xì)胞和蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。4.**滲透壓**:PBS的滲透壓接近人體生理鹽水的滲透壓,適合用于細(xì)胞懸浮和洗滌,不會(huì)引起細(xì)胞的滲透壓變化。5.**清潔性**:PBS通常使用去離子水或蒸餾水配制,減少雜質(zhì)和離子對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。6.**兼容性**:PBS與多種生物分子和細(xì)胞培養(yǎng)基兼容,常用于細(xì)胞培養(yǎng)、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、蛋白質(zhì)提取和分析等。7.**無(wú)菌性**:實(shí)驗(yàn)用的PBS通常需要經(jīng)過(guò)高壓滅菌或過(guò)濾除菌處理,以保證實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌條件。8.**多功能性**:除了作為緩沖溶液外,PBS還可以用于稀釋試劑、洗滌實(shí)驗(yàn)器材和樣品等。9.**易于配制**:PBS的配制相對(duì)簡(jiǎn)單,可以根據(jù)需要調(diào)整磷酸鹽的濃度來(lái)改變緩沖能力。EMB培養(yǎng)基的特點(diǎn)是它對(duì)大腸桿菌等產(chǎn)酸革蘭氏陰性菌的選擇性較強(qiáng)。三丁酸甘油酯瓊脂BS培養(yǎng)皿
LB瓊脂(Miller)是一種用于實(shí)驗(yàn)室的微生物培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E.coli)的培養(yǎng)。這種培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉,以及作為凝固劑的瓊脂。Miller配方的特點(diǎn)是含有較高的氯化鈉濃度,這有助于選擇性地培養(yǎng)某些細(xì)菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化鈉(NaCl):10.0g-瓊脂(Agar):15.0g**制備方法**:1.將40克LB瓊脂粉末加入到1升蒸餾水中。2.加熱至沸騰,同時(shí)攪拌以確保粉末完全溶解。3.在121°C下高壓滅菌15分鐘。4.滅菌后,冷卻至50°C,然后分裝到無(wú)菌培養(yǎng)皿中。**應(yīng)用**:-適用于非選擇性培養(yǎng)大腸桿菌菌株,用于克隆、質(zhì)粒DNA制備和重組蛋白生產(chǎn)。-當(dāng)加入適當(dāng)?shù)目股镔|(zhì)時(shí),也適合選擇性培養(yǎng)。**特點(diǎn)**:-無(wú)需復(fù)雜配置,快速溶解,方便使用。-經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,適合大量培養(yǎng)基的制備。**儲(chǔ)存條件**:-通常建議在常溫(10-30℃)下儲(chǔ)存。LB瓊脂(Miller)因其營(yíng)養(yǎng)豐富、制備簡(jiǎn)單的應(yīng)用,成為分子生物學(xué)和微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基之一。在實(shí)際使用時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)或相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作,以確保培養(yǎng)效果。甘露醇氯化鈉瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿大腸桿菌在DC培養(yǎng)基上產(chǎn)生典型的反應(yīng),表現(xiàn)為產(chǎn)生黑色素沉淀。
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI)是一種生化培養(yǎng)基,用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選,其特點(diǎn)如下:1.**用途**:TSI培養(yǎng)基用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、乳糖、葡萄糖、蔗糖、酚紅、硫酸亞鐵銨、硫代硫酸鈉和瓊脂,pH值控制在7.4±0.1(25℃)。3.**檢驗(yàn)原理**:乳糖、葡萄糖和蔗糖作為可發(fā)酵糖類,其發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí)通過(guò)酚紅指示劑測(cè)出,酸性呈黃色,堿性呈紅色;硫代硫酸鈉可被某些細(xì)菌還原為硫化氫,與硫酸亞鐵中的鐵鹽生成黑色硫化鐵沉淀;氯化鈉維持滲透壓;瓊脂作為凝固劑。4.**應(yīng)用**:TSI培養(yǎng)基特別適用于沙門氏菌等腸道致病菌的分離鑒定,通過(guò)觀察細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況、顏色變化和硫化氫產(chǎn)生等特征進(jìn)行鑒定。5.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基64.5g,溶解于1000ml蒸餾水中,加熱煮沸1分鐘,分裝于試管,121℃高壓滅菌15分鐘制成高層斜面。6.**質(zhì)量控制**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),如大腸埃希氏菌和乙型副傷寒沙門氏菌,觀察其生長(zhǎng)情況和特征性反應(yīng)。7.**儲(chǔ)存條件**:貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋,保質(zhì)期通常為三年。
RV沙氏增菌肉湯(RappaportVassiliadisSalmonellaEnrichmentBroth,RVS肉湯)是一種用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基。它的主要特點(diǎn)如下:1.**成分**:RV沙氏增菌肉湯包含大豆蛋白胨、乳糖、葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、孔雀石綠、氯化鎂、煌綠等成分,這些成分有助于抑制其他非沙門氏菌的生長(zhǎng),同時(shí)促進(jìn)沙門氏菌的生長(zhǎng)。2.**用途**:主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng),特別是在食品、水和牛奶等樣品中檢測(cè)沙門氏菌時(shí)。3.**配制方法**:通常需要稱取一定量的干粉培養(yǎng)基,加入指定量的蒸餾水或去離子水,攪拌加熱至完全溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。4.**培養(yǎng)條件**:RV沙氏增菌肉湯通常在35-37°C的溫度下培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求而定。5.**效果**:在RV沙氏增菌肉湯中,沙門氏菌能夠良好生長(zhǎng),而其他一些細(xì)菌則受到抑制。6.**質(zhì)量控制**:使用時(shí)需要進(jìn)行質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基的制備和使用符合標(biāo)準(zhǔn)操作程序。7.**儲(chǔ)存**:RV沙氏增菌肉湯的干粉形式應(yīng)在干燥、避光的條件下儲(chǔ)存,通常在4-10度的環(huán)境中保存,以保持其有效性。8.**有效期**:在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下,RV沙氏增菌肉湯的有效期通常為三年。胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)皿也被廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域,如水質(zhì)、空氣、食品等樣品的微生物檢測(cè)。
膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BileLactoseBroth,簡(jiǎn)稱BL培養(yǎng)基)是一種在微生物檢測(cè)中用于增菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**用途**:主要用于藥品和生物制品中大腸桿菌、沙門氏菌和綠膿桿菌的增菌培養(yǎng)。2.**成分**:包含蛋白胨、乳糖、牛膽鹽、氯化鈉、磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀,其中蛋白胨提供碳氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,氯化鈉維持滲透壓,磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀作為緩沖劑,牛膽鹽作為選擇性抑菌劑。3.**pH值**:pH值控制在7.4±0.2(25℃),為微生物提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。4.**使用方法**:將培養(yǎng)基粉末加入蒸餾水或去離子水,加熱溶解后分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,待冷至常溫后備用。5.**質(zhì)量控制**:通過(guò)接種質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌等,觀察其生長(zhǎng)情況和特征性反應(yīng),以確保培養(yǎng)基的適用性。6.**應(yīng)用**:除了用于藥品檢測(cè),還用于乳品中大腸菌群的快速檢測(cè)研究,通過(guò)構(gòu)建檢測(cè)片法和細(xì)胞培養(yǎng)瓶劑法,提高檢出率。7.**相關(guān)產(chǎn)品**:膽鹽乳糖培養(yǎng)基與其他用于大腸菌群、糞大腸菌群、大腸埃希氏菌檢驗(yàn)的培養(yǎng)基一同使用,如曙紅亞甲基藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(EMB)、4-甲基傘形酮糖苷酸培養(yǎng)基(MUG培養(yǎng)基)等。
VRBA培養(yǎng)基提供了一種簡(jiǎn)便而有效的方法,用于選擇性地富集和分離腸道細(xì)菌。三丁酸甘油酯瓊脂BS培養(yǎng)皿
強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一種專門用于培養(yǎng)梭菌屬(Clostridium)細(xì)菌的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:RCM培養(yǎng)基包含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化鈉、醋酸鈉和L-半胱氨酸鹽酸鹽等,這些成分為梭菌提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),為梭菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù),特別適用于厭氧條件下梭菌的培養(yǎng)。4.**抑制作用**:醋酸鈉成分有助于抑制革蘭氏陰性菌和一些非目標(biāo)細(xì)菌的生長(zhǎng),使得RCM培養(yǎng)基更適合梭菌屬細(xì)菌的選擇性培養(yǎng)。5.**穩(wěn)定性**:微量瓊脂(0.5g/L)的添加增加了培養(yǎng)基還原環(huán)境的穩(wěn)定性,有助于厭氧環(huán)境的形成,防止二氧化碳、氧氣和還原產(chǎn)物的擴(kuò)散。6.**生長(zhǎng)表現(xiàn)**:無(wú)動(dòng)力的細(xì)菌在RCM培養(yǎng)基中通常呈顆粒狀或條狀生長(zhǎng),便于計(jì)數(shù);而有動(dòng)力的細(xì)菌則可能呈現(xiàn)渾濁生長(zhǎng),一般不適合計(jì)數(shù)。7.**制備方法**:將RCM培養(yǎng)基粉末溶解于蒸餾水中,加熱至完全溶解后分裝,進(jìn)行高壓滅菌以備使用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:RCM培養(yǎng)基適用于生孢梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌等梭菌的生長(zhǎng),這些菌株在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況良好。三丁酸甘油酯瓊脂BS培養(yǎng)皿