月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LaurylSulfateTryptoseBroth,簡稱LST)是一種選擇性液體培養(yǎng)基,主要用于檢測食品、水、奶制品中的大腸菌群和大腸埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**試驗原理**:LST培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,滿足細菌生長需求;氯化鈉維持滲透壓;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀作為pH緩沖劑;月桂基硫酸鈉抑制非大腸菌群細菌的生長。2.**培養(yǎng)基配方**:每升培養(yǎng)基包含胰蛋白胨20.0g、氯化鈉5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氫鉀2.75g、磷酸氫二鉀2.75g、月桂基硫酸鈉0.1g,pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2(25℃)。3.**試驗方法**:稱取35.6克LST培養(yǎng)基,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝到帶有倒立發(fā)酵管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**質(zhì)量控制和典型特征**:在36±1℃培養(yǎng)48±2小時,大腸菌群、大腸桿菌和發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性細菌產(chǎn)生氣體,在小倒管內(nèi)有氣泡;其他細菌無氣泡。5.**微生物靈敏度試驗**:接種特定的質(zhì)控菌株,如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、陰溝腸桿菌ATCC23355、大腸埃希氏菌ATCC8739、糞腸球菌ATCC29212和金黃色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時,觀察結(jié)果。大腸桿菌產(chǎn)酸,因此在EMB上形成帶有金屬光環(huán)的典型顏色,而其他非產(chǎn)酸菌則顯示不同的表現(xiàn)。改良阿須貝無氮瓊脂預裝培養(yǎng)皿
LB瓊脂(Miller)是一種用于實驗室的微生物培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E.coli)的培養(yǎng)。這種培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉,以及作為凝固劑的瓊脂。Miller配方的特點是含有較高的氯化鈉濃度,這有助于選擇性地培養(yǎng)某些細菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化鈉(NaCl):10.0g-瓊脂(Agar):15.0g**制備方法**:1.將40克LB瓊脂粉末加入到1升蒸餾水中。2.加熱至沸騰,同時攪拌以確保粉末完全溶解。3.在121°C下高壓滅菌15分鐘。4.滅菌后,冷卻至50°C,然后分裝到無菌培養(yǎng)皿中。**應用**:-適用于非選擇性培養(yǎng)大腸桿菌菌株,用于克隆、質(zhì)粒DNA制備和重組蛋白生產(chǎn)。-當加入適當?shù)目股镔|(zhì)時,也適合選擇性培養(yǎng)。**特點**:-無需復雜配置,快速溶解,方便使用。-經(jīng)濟實惠,適合大量培養(yǎng)基的制備。**儲存條件**:-通常建議在常溫(10-30℃)下儲存。LB瓊脂(Miller)因其營養(yǎng)豐富、制備簡單的應用,成為分子生物學和微生物學實驗室中的標準培養(yǎng)基之一。在實際使用時,應嚴格按照產(chǎn)品說明書或相關標準進行操作,以確保培養(yǎng)效果。營養(yǎng)瓊脂(NA)平板接種: 使用無菌的技術(shù)在瓊脂培養(yǎng)基表面接種待測樣品,可以是從食品、水樣或其他來源收集的微生物樣品。
EEM培養(yǎng)基(Eagle'sMinimumEssentialMedium)是一種用于細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,由HarryEagle研發(fā)。它是一種營養(yǎng)豐富的細胞培養(yǎng)基,廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng),包括貼壁細胞和懸浮細胞。EEM培養(yǎng)基的特點是含有較低的碳酸氫鈉含量,適用于5%CO2條件下的細胞培養(yǎng)。如果培養(yǎng)條件中CO2濃度高于5%,則需要增加碳酸氫鈉的含量。**成分**:EEM培養(yǎng)基包含Earle'ssalts、L-谷氨酰胺、丙酸鈉和碳酸氫鈉等。它還含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,以及其他必要的營養(yǎng)成分。**用途**:EEM培養(yǎng)基適用于多種細胞系的培養(yǎng),包括HeLa細胞、各種成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、人腫瘤細胞等。它也可用于選擇轉(zhuǎn)染DHFR的陰性細胞。**保存條件**:建議在2-8°C避光條件下保存。**產(chǎn)品外觀**:通常為紅色透明液體,無沉淀。**培養(yǎng)基保質(zhì)期**:在正確的保存條件下,培養(yǎng)基的保質(zhì)期通常為12個月。**質(zhì)量控制**:培養(yǎng)基的質(zhì)量控制包括觀察培養(yǎng)基是否有變色、結(jié)塊或成粒、不溶等現(xiàn)象,以及液體培養(yǎng)基是否有pH變化、沉淀物出現(xiàn)、溶液變渾濁或變色等情況。配制方法:通常,EEM培養(yǎng)基會以無菌即用的形式提供,但如果需要自行配制,應按照制造商提供的配方和方法進行。
水合乳糖肉湯(LactoseMonohydrateBroth)是一種用于微生物檢測的培養(yǎng)基,它主要用于大腸菌群的測定。以下是它的一些特點和相關信息:1.**成分**:通常包含牛肉浸粉、明膠蛋白胨、一水乳糖等,pH值約為6.9±0.2(25℃)。2.**用途**:主要用于大腸菌群的測定,也適用于其他需要檢測乳糖發(fā)酵能力的微生物檢測。3.**使用方法**:稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,然后進行高壓滅菌。滅菌結(jié)束后迅速冷卻,備用。4.**儲存條件**:未開蓋的水合乳糖肉湯的保質(zhì)期通常為6個月,需要在4-10度的條件下保存。運輸時應保持常溫。5.**執(zhí)行標準**:可能遵循中國藥典(GB/ChP)或其他相關標準。6.**質(zhì)量控制**:在使用前,應進行質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基的無菌性和功能性。7.**使用注意事項**:使用時應無菌操作,避免污染。以上信息綜合了多個來源,包括山東拓普生物工程有限公司、青島海博生物和瑞沃生物技術(shù)有限公司等。在實際使用時,應嚴格按照產(chǎn)品說明書或相關標準進行操作。使用VRBA培養(yǎng)皿時,通常將待測樣品涂布在培養(yǎng)皿表面,然后進行培養(yǎng),觀察并鑒定產(chǎn)生的菌落。
葉酸測定培養(yǎng)基是一種專門用于測定食品中葉酸含量的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**營養(yǎng)成分**:該培養(yǎng)基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作為氮源和碳源,乙酸鈉作為選擇劑和能量物質(zhì),以及氯化鈉、硫酸錳等鹽離子和多種維生素成分,為鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生長因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2,以適應特定微生物的生長需求。3.**用途**:主要用于食品中葉酸的微生物測定,如GB5009.211-2022《食品安全國家標準食品中葉酸的測定》中所述。4.**制備方法**:通常將干粉培養(yǎng)基與蒸餾水或去離子水混合,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝試管中,每管5ml,加入標準品或測試樣品,用無菌蒸餾水或去離子水調(diào)整體積至10ml,121℃高壓滅菌5分鐘。5.**質(zhì)量控制**:使用特定的質(zhì)控菌株(如鼠李糖乳桿菌ATCC7469)接種待測試培養(yǎng)基,在36±1℃下培養(yǎng)20-40小時,觀察生長情況,如肉湯混濁和試管呈梯度渾濁。6.**儲存條件**:應在避光、干燥處儲存,未開封保質(zhì)期通常為三年。7.**注意事項**:在配制和使用過程中,應遵循無菌操作,避免污染,確保水的潔凈程度,因為水中的葉酸殘留或容器的污染直接影響試驗結(jié)果。EMB培養(yǎng)皿是用于培養(yǎng)和檢測腸道革蘭氏陰性桿菌的一種特殊培養(yǎng)基。PCA培養(yǎng)皿
NAC瓊脂培養(yǎng)皿是一種常用于微生物學研究的培養(yǎng)基,其含有富含氨基酸的天然瓊脂,以及氯霉素、氨芐青霉素。改良阿須貝無氮瓊脂預裝培養(yǎng)皿
溴十六烷三甲銨瓊脂基礎(CetrimideAgar)是一種用于微生物學實驗的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**用途**:主要用于銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的選擇性分離和培養(yǎng)。2.**原理**:明膠胰酶水解物提供氮源;氯化鎂和硫酸鉀可刺激綠色的色素的產(chǎn)生;溴化十六烷三甲銨作為選擇性抑菌劑,對多種革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌具有抑制作用,特別是對非銅綠假單胞菌的細菌;甘油作為碳源;瓊脂作為凝固劑。3.**配方**:典型的配方包括明膠胰酶水解物、氯化鎂、硫酸鉀、溴化十六烷三甲銨和瓊脂。pH值控制在7.4±0.2(25℃)。4.**實驗方法**:將培養(yǎng)基干粉溶解于蒸餾水中,加入甘油,煮沸使混合均勻,分裝三角瓶,進行高壓滅菌,冷卻至45-50℃時傾入無菌平皿。5.**結(jié)果觀察**:銅綠假單胞菌在該培養(yǎng)基上通常形成具有綠色的色素的菌落,而其他非目標細菌則受到抑制。6.**注意事項**:本培養(yǎng)基為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗以確保鑒定結(jié)果的準確性。7.**儲存條件**:通常在干燥、避光的條件下儲存,以保持其有效性。