在細胞、組織和微生物的培養(yǎng)過程中,pH值的控制非常重要。不同的培養(yǎng)基需要不同的pH范圍,以滿足生長和發(fā)展的需求。pH值是指培養(yǎng)基中氫離子(H+)的濃度,是一個表示溶液酸堿性的指標。pH值的數(shù)值越小,表示溶液越酸性。pH值的數(shù)值越大,表示溶液越堿性。pH值的中性為7。pH值對細胞和微生物生長和發(fā)展有著重要的影響。過高或過低的pH值都會影響生命體的正常生長。pH值的小幅度變化就足以影響酶的活性,從而影響代謝和生長。因此,對于細胞、組織和微生物的研究,必須控制好培養(yǎng)基的pH值。無機培養(yǎng)基則為化學(xué)合成培養(yǎng)基,其用途從分離細菌到研究微生物生理生化特性都普遍應(yīng)用。Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
影響預(yù)裝培養(yǎng)基有效期的因素:預(yù)裝培養(yǎng)基的有效期不是固定不變的,它受到多種因素的影響,如生產(chǎn)流程、儲存環(huán)境等。以下是一些預(yù)裝培養(yǎng)基配制和存儲過程中可能影響有效期的因素。溫度:因為溫度的波動會導(dǎo)致預(yù)裝培養(yǎng)基內(nèi)的病原體、細菌和寄生蟲數(shù)量的變化,從而影響培養(yǎng)基的有效性。時常保持其在4℃左右不變溫度有助于更長時間的保質(zhì)。光照:光照強度高會發(fā)生多種生化變化(相反的低光照也可能會影響),甚至?xí)诡A(yù)裝培養(yǎng)基中的化學(xué)物質(zhì)發(fā)生變化而影響其有效性。包裝:預(yù)裝培養(yǎng)基的包裝也很重要,因為任何包裝方法都無法完全阻止外來物質(zhì)的輸入。因此,在儲存過程中,盡可能采取防止預(yù)裝培養(yǎng)基受到污染的措施以確保有效期的準確性。含0.05%聚山梨酯80的0.9%氯化鈉培養(yǎng)基也有不同的形態(tài),可以是液體、半固體或固體形式。
干粉培養(yǎng)基的組成:干粉培養(yǎng)基通常由基礎(chǔ)草料、營養(yǎng)(或培養(yǎng))成分、緩沖劑、指示劑、氨基酸、維生素和其他有機化合物等組成。具體成分的選擇和比例取決于所需培養(yǎng)的微生物類型和生長條件?;A(chǔ)草料通常由各種蛋白質(zhì)來源(如動物肌肉、黃豆、酵母等)組成,提供微生物生長所需的碳、氮、磷、硫、鎂、鐵等元素。營養(yǎng)(或培養(yǎng))成分則包括轉(zhuǎn)化碳源、氮源、磷酸鹽、微量元素等,是培養(yǎng)基的主要能量源和合成原料。緩沖劑用于維持培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定,適當?shù)?pH 值對于微生物生長和代謝至關(guān)重要。指示劑常用于檢測微生物在培養(yǎng)基中的生長和代謝情況,如酚紅、溴藍、氧化亞鐵等。氨基酸和維生素等是微生物在生長過程中所需的營養(yǎng)物質(zhì),能夠促進微生物的代謝和生長。
在制備培養(yǎng)基的過程中,安全是第1原則。要保證培養(yǎng)基的無菌性、無致病性、無致變性,避免應(yīng)用醫(yī)療性維生素、肽聚糖、半合成血清等,以避免在細胞培養(yǎng)等實驗過程中產(chǎn)生的雜菌和微生物的病變,對實驗過程的準確性和可靠性產(chǎn)生不利影響。培養(yǎng)基中含有營養(yǎng)成分,必須考慮基本食物成分(水、碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、微量元素等)作為通用要素。不同類型的生物需要不同的營養(yǎng)成分,因此在制備培養(yǎng)基時必須注意保證各種營養(yǎng)成分的均衡和充足,以確保生物體生長、繁殖的需要和生理上的健康狀況。孟德爾-韋伯利法可以計算培養(yǎng)基的可利用能量。
干粉培養(yǎng)基在制備過程中必須加水。這是因為這種培養(yǎng)基是以干燥的粉末形式保存和運輸,與水分離開,保持較長時間的穩(wěn)定性。但是,在實驗中需要使用有效的培養(yǎng)基來支持微生物在合適的環(huán)境下生長。為了制備可用的培養(yǎng)基液,必須將干粉培養(yǎng)基與水混合。在將水與干粉培養(yǎng)基混合時,需要非常小心仔細地操作。首先,需要嚴格遵守廠家提供的混合比例。某些干粉培養(yǎng)基需要添加一定的水,以制成較稠厚的培養(yǎng)液,而有些需要加入較多的水,才能制成較稀的培養(yǎng)液。因此,在準備工作中,請確保了解您所使用的干粉培養(yǎng)基的混合比例。鑒別培養(yǎng)基用于區(qū)分不同的微生物物種。例如,肉湯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基可用于區(qū)分腸球菌和革蘭氏陰性菌。沙門氏菌顯色培養(yǎng)基
培養(yǎng)基的配方也會受到環(huán)境、藥物和其他外部壓力的影響,因此,在實際應(yīng)用中需要不斷進行調(diào)整和改進。Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
液體培養(yǎng)基:只含有稀釋的瓊脂而沒有固體成分的培養(yǎng)基稱作液體培養(yǎng)基,這類培養(yǎng)基可以是透明的,也可以加入某些蛋白質(zhì)、膽汁、奶酪素等物質(zhì)使其呈乳白色。液體培養(yǎng)基的傳遞作用弱,在其內(nèi)部微生物可以自由地游走和移動。由于養(yǎng)分的擴散和彌散,微生物生長比較均勻,容易觀察和操作。液體培養(yǎng)基適用于下列技術(shù)和用途:培養(yǎng)非必需氧氣的微生物,便于大規(guī)模分離和培養(yǎng)細胞,易于獲得菌液。固體培養(yǎng)基:上面介紹的培養(yǎng)基中,添加2-3%瓊脂成為了固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基結(jié)構(gòu)較堅硬,微生物只能在上面生長,分布和傳播相對固定,因此比較有利于觀察某些微生物的生長,或?qū)Σ煌⑸锖M行分離。固體培養(yǎng)基適用于下列技術(shù)和用途:建立單個菌落,分離微生物混合物,培養(yǎng)土壤樣品等。Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
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