細(xì)菌培養(yǎng)基之根瘤菌培養(yǎng)基：葡萄糖10g，磷酸氫二鉀0.5g，碳酸鈣3g，硫酸鎂0.2g，酵母粉0.4瓊脂20g，水1000ml，1%結(jié)晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。放線菌培養(yǎng)基：（1）淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基（高氏一號(hào)培養(yǎng)基）可溶性淀粉2.0g，硝酸鉀0.1g，磷酸氫二鉀0.05g，氯化鈉0.05g，硫酸鎂0.05g，硫酸亞鐵0.001g，瓊脂2g，水100ml。先把淀粉放在燒杯里，用5ml水調(diào)成糊狀后，倒入95ml水，攪勻后加入其他藥品，使它溶解。在燒杯外做好記號(hào)，加熱到煮沸時(shí)加入瓊脂，不停攪拌，待瓊脂完全溶解后，補(bǔ)足失水。調(diào)整pH值到7.2-7.4，分裝后滅菌，備用。培養(yǎng)基種類繁多，根據(jù)需求選擇適合的培養(yǎng)基對(duì)于成功的微生物培養(yǎng)至關(guān)重要。葡萄糖銨瓊脂培養(yǎng)基

在培養(yǎng)基中加人某種抑制劑和指示劑，抑制某些細(xì)菌生長(zhǎng)，促進(jìn)目的菌的繁殖，并使所生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落具有一定特征，以助鑒別挑選，這類培養(yǎng)基稱為選擇性鑒別培養(yǎng)基。如SS瓊脂，在該培養(yǎng)基配方中含有乳糖(反應(yīng)底物)、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑)、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽(yáng)性菌及部分大腸埃希菌的生長(zhǎng)，而對(duì)沙門菌及志賀菌基本無(wú)影響，而且大腸埃希菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，使菌落變紅色，沙門菌和志賀菌不發(fā)酵乳糖，其菌落為無(wú)色。如細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫，則與檸檬酸鐵銨反應(yīng)生成硫化亞鐵沉淀，菌落中心呈黑色或褐色。以此達(dá)到鑒別的目的。桔汁瓊脂（OSA）微生物的供能方式會(huì)影響它對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用，因此不同微生物需要不同成分的培養(yǎng)基。

以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ)，向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL，微量元素100×母液20mL，鐵鹽100×母液20mL，維生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL，甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培養(yǎng)基后，再加入0.5mg·L-1的BA8mL，0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實(shí)際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水，加入40g蔗糖后攪拌使其溶化，用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂，將鋁鍋置于電爐上，攪拌加熱使瓊脂完全溶化，然后用蒸餾水定容至終體積2L，繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。

培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調(diào)pH至7.2-7.4，若pH值超過7.6或遠(yuǎn)低于6.8，則大多數(shù)細(xì)胞不能生長(zhǎng)。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。培養(yǎng)中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無(wú)菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體，置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時(shí)間而定，一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制，可選用無(wú)血清培養(yǎng)基。培養(yǎng)基類型和配方可以根據(jù)需要進(jìn)行定制，以滿足特定的實(shí)驗(yàn)需求。

培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法？幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求，細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì)，在缺少谷氨酰胺時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20℃ 冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)，應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么？培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I？這個(gè)二肽有多穩(wěn)定？GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽，是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物，其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽，釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定，即使在121磅滅菌20分鐘，GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎完全降解。培養(yǎng)基是一種供養(yǎng)分離的微生物和生物樣品的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)基質(zhì)。氣單胞菌瓊脂（膽鹽氯酚紅亮綠瓊脂）

培養(yǎng)基還可以根據(jù)所需生長(zhǎng)的微生物類別，加入特定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，例如血清、血紅蛋白等等。葡萄糖銨瓊脂培養(yǎng)基

合成培養(yǎng)基(synthetic medium) 由已知化學(xué)成分的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組成的培養(yǎng)基。根據(jù)微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求的不同，可完全由無(wú)機(jī)鹽或化合物組成，如：氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、維生素等，其組成成分已知，只要嚴(yán)格操作，各批次間質(zhì)量可做到穩(wěn)定一致。此培養(yǎng)基可用來檢測(cè)某種營(yíng)養(yǎng)物或藥物對(duì)微生物代謝的影響。組織細(xì)胞培養(yǎng)液均屬合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的成本較高，其價(jià)格相當(dāng)于同類天然培養(yǎng)基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無(wú)機(jī)鹽的合成培養(yǎng)基，只適用于自養(yǎng)菌的培養(yǎng)，如培養(yǎng)亞硝化細(xì)菌、氧化硫桿菌等的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基大部分成分為已知化學(xué)結(jié)構(gòu)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其中的個(gè)別或少數(shù)成分為未明化學(xué)成分的必須營(yíng)養(yǎng)物，成為半合成培養(yǎng)基，如百日咳菌苗生產(chǎn)用的水解酪素培養(yǎng)基。葡萄糖銨瓊脂培養(yǎng)基

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