細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的,細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時需要加入血清,以維持細(xì)胞的生長和存活。而除了血清之外,部分細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細(xì)胞加入量會有差異,需根據(jù)細(xì)胞類型判斷。培養(yǎng)基制備的質(zhì)量和配方對于細(xì)胞和微生物的生長、分化和培養(yǎng)效果具有至關(guān)重要的作用。BBL液體培養(yǎng)基(雙歧桿菌液體培養(yǎng)基)
鑒別培養(yǎng)基(differential media) 在培養(yǎng)基中加入某一反應(yīng)底物和指示劑,以區(qū)別某些微生物的特性從而鑒別之。又分一般鑒別培養(yǎng)基和選擇性鑒別培養(yǎng)基。只用于區(qū)別不同微生物種類的培養(yǎng)基稱為-般鑒別培養(yǎng)基,此類培養(yǎng)基中一般不加抑菌劑而只含指示劑,如克氏雙糖鐵培養(yǎng)基,含有葡萄糖及乳糖,以酚紅作為指示劑,觀察培養(yǎng)基底層與斜面的顏色變化判定細(xì)菌對葡萄糖和乳糖的發(fā)酵能力,加人檸檬酸鐵銨,培養(yǎng)后觀察是否產(chǎn)生黑色沉著以判定細(xì)菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫;又如伊紅-美藍(lán)瓊脂,含有乳糖(反應(yīng)底物)、伊紅-美藍(lán)(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌、腸道病原菌和其他雜菌。一般鑒別培養(yǎng)基的特點是在配方中都含有指示劑,并可用于區(qū)別不同種類的微生物,有些鑒別培養(yǎng)基也可同時作為細(xì)菌的特殊需要用來分離培養(yǎng)某些細(xì)菌,如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂。硝酸鐵瓊脂孟德爾-韋伯利法可以計算培養(yǎng)基的可利用能量。
培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲存兩周以上時,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。
L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細(xì)胞生長的必須氨基酸,可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源,參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中狀態(tài)不穩(wěn)定,它的降解速率隨保存時間,保存溫度及保存環(huán)境pH值等變化而變化。L-丙胺酰-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品,其在水溶液中穩(wěn)定性高,即可保持長時間穩(wěn)定的營養(yǎng)供給,也降低了分解產(chǎn)物造成的細(xì)胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液(L-alanyl-L-glutamineslution)可作為哺乳動物貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑。與谷氨酰胺相比,L-丙胺酰-谷氨酰胺不會自行降解成氨而導(dǎo)致細(xì)胞毒性,作為添加物培養(yǎng)條件更加可控,可有效提高細(xì)胞活力。在培養(yǎng)細(xì)胞時通常還需要添加藥物,以防止細(xì)菌污染。
近年來,國內(nèi)外利用某些細(xì)菌特有的酶,選擇相應(yīng)的作用底物,研制出某些細(xì)菌專門用的的顯色培養(yǎng)基,用于細(xì)菌的分離鑒別,收到了良好的效果,這種顯色培養(yǎng)基實際上也是鑒別培養(yǎng)基。其基本原理是將色原(或熒光原)與細(xì)菌作用底物的結(jié)合物加于培養(yǎng)基中,當(dāng)細(xì)菌含有相應(yīng)酶時,使該結(jié)合物分解而顯色(或顯示熒光)。如色原糖苷結(jié)合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷與色原分離,并顯示顏色;熒光氨基酸結(jié)合物(不顯熒光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸與熒光物質(zhì)分離而顯示熒光。常用顯色的色原有α-萘酚、β-萘酚、鄰位硝基酚、對位硝基酚、對硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的熒光物有4-甲基傘形酮(又稱7-羥基4-甲基香豆素)等。目前,顯色培養(yǎng)基已用于多種細(xì)菌的分離鑒別培養(yǎng),如沙門菌、大腸埃希菌、李斯特菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌、白色念珠菌等顯色培養(yǎng)基。需要控制pH值、溫度、氣氛等因素,以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性。硝酸鐵瓊脂
特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細(xì)胞培養(yǎng)。BBL液體培養(yǎng)基(雙歧桿菌液體培養(yǎng)基)
培養(yǎng)基按成分分類有哪些?按形態(tài)分類:培養(yǎng)基按其不同的物理狀態(tài),可分為液體、流體、半固體和固體4類,培養(yǎng)基的物理狀態(tài)取決于培養(yǎng)基中是否加人凝固劑或凝固劑的加入量。1、液體培養(yǎng)基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固劑,常溫下以完全液態(tài)存在的培養(yǎng)基,如肉湯培養(yǎng)基或一般液體增菌培養(yǎng)基。2、流體培養(yǎng)基(semi-liquidmedium)在液體培養(yǎng)基中加入0.05%~0.1%的瓊脂粉,使其具一定黏度,即成流體培養(yǎng)基。加入瓊脂粉增加了培養(yǎng)基的黏度,降低空氣中的氧氣進(jìn)人培養(yǎng)基的速度,能使培養(yǎng)基保持較長時間的厭氧條件,有利于一般厭氧菌的生長繁殖,如硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基等。一般用于霉菌和厭氧菌檢查的液體培養(yǎng)基中可加人少量瓊脂使其成為流體培養(yǎng)。BBL液體培養(yǎng)基(雙歧桿菌液體培養(yǎng)基)
上海瑞楚生物科技有限公司是以提供培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶為主的有限責(zé)任公司(自然),公司始建于2012-11-29,在全國各個地區(qū)建立了良好的商貿(mào)渠道和技術(shù)協(xié)作關(guān)系。公司主要提供從事生物科技、農(nóng)業(yè)科技、環(huán)??萍碱I(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物品、易制毒化學(xué)品),日用百貨,金屬制品,塑料制品,儀器儀表,實驗室設(shè)備(除醫(yī)療器械)銷售,會務(wù)服務(wù),從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù)等。等領(lǐng)域內(nèi)的業(yè)務(wù),產(chǎn)品滿意,服務(wù)可高,能夠滿足多方位人群或公司的需要。產(chǎn)品已銷往多個國家和地區(qū),被國內(nèi)外眾多企業(yè)和客戶所認(rèn)可。
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