細胞培養(yǎng)過程中,細胞培養(yǎng)基是不可或缺的,細胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細胞中供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎物質,也是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。通常細胞體外培養(yǎng)時需要加入血清,以維持細胞的生長和存活。而除了血清之外,部分細胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細胞加入量會有差異,需根據細胞類型判斷。培養(yǎng)基制備的質量和配方對于細胞和微生物的生長、分化和培養(yǎng)效果具有至關重要的作用。BBL液體培養(yǎng)基(雙歧桿菌液體培養(yǎng)基)
鑒別培養(yǎng)基(differential media) 在培養(yǎng)基中加入某一反應底物和指示劑,以區(qū)別某些微生物的特性從而鑒別之。又分一般鑒別培養(yǎng)基和選擇性鑒別培養(yǎng)基。只用于區(qū)別不同微生物種類的培養(yǎng)基稱為-般鑒別培養(yǎng)基,此類培養(yǎng)基中一般不加抑菌劑而只含指示劑,如克氏雙糖鐵培養(yǎng)基,含有葡萄糖及乳糖,以酚紅作為指示劑,觀察培養(yǎng)基底層與斜面的顏色變化判定細菌對葡萄糖和乳糖的發(fā)酵能力,加人檸檬酸鐵銨,培養(yǎng)后觀察是否產生黑色沉著以判定細菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產生硫化氫;又如伊紅-美藍瓊脂,含有乳糖(反應底物)、伊紅-美藍(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌、腸道病原菌和其他雜菌。一般鑒別培養(yǎng)基的特點是在配方中都含有指示劑,并可用于區(qū)別不同種類的微生物,有些鑒別培養(yǎng)基也可同時作為細菌的特殊需要用來分離培養(yǎng)某些細菌,如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂。硝酸鐵瓊脂孟德爾-韋伯利法可以計算培養(yǎng)基的可利用能量。
培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。
L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細胞生長的必須氨基酸,可作為培養(yǎng)細胞的能量來源,參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中狀態(tài)不穩(wěn)定,它的降解速率隨保存時間,保存溫度及保存環(huán)境pH值等變化而變化。L-丙胺酰-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)是細胞培養(yǎng)中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品,其在水溶液中穩(wěn)定性高,即可保持長時間穩(wěn)定的營養(yǎng)供給,也降低了分解產物造成的細胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液(L-alanyl-L-glutamineslution)可作為哺乳動物貼壁細胞或懸浮細胞培養(yǎng)添加劑。與谷氨酰胺相比,L-丙胺酰-谷氨酰胺不會自行降解成氨而導致細胞毒性,作為添加物培養(yǎng)條件更加可控,可有效提高細胞活力。在培養(yǎng)細胞時通常還需要添加藥物,以防止細菌污染。
近年來,國內外利用某些細菌特有的酶,選擇相應的作用底物,研制出某些細菌專門用的的顯色培養(yǎng)基,用于細菌的分離鑒別,收到了良好的效果,這種顯色培養(yǎng)基實際上也是鑒別培養(yǎng)基。其基本原理是將色原(或熒光原)與細菌作用底物的結合物加于培養(yǎng)基中,當細菌含有相應酶時,使該結合物分解而顯色(或顯示熒光)。如色原糖苷結合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷與色原分離,并顯示顏色;熒光氨基酸結合物(不顯熒光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸與熒光物質分離而顯示熒光。常用顯色的色原有α-萘酚、β-萘酚、鄰位硝基酚、對位硝基酚、對硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的熒光物有4-甲基傘形酮(又稱7-羥基4-甲基香豆素)等。目前,顯色培養(yǎng)基已用于多種細菌的分離鑒別培養(yǎng),如沙門菌、大腸埃希菌、李斯特菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌、白色念珠菌等顯色培養(yǎng)基。需要控制pH值、溫度、氣氛等因素,以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性。硝酸鐵瓊脂
特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細胞培養(yǎng)。BBL液體培養(yǎng)基(雙歧桿菌液體培養(yǎng)基)
培養(yǎng)基按成分分類有哪些?按形態(tài)分類:培養(yǎng)基按其不同的物理狀態(tài),可分為液體、流體、半固體和固體4類,培養(yǎng)基的物理狀態(tài)取決于培養(yǎng)基中是否加人凝固劑或凝固劑的加入量。1、液體培養(yǎng)基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固劑,常溫下以完全液態(tài)存在的培養(yǎng)基,如肉湯培養(yǎng)基或一般液體增菌培養(yǎng)基。2、流體培養(yǎng)基(semi-liquidmedium)在液體培養(yǎng)基中加入0.05%~0.1%的瓊脂粉,使其具一定黏度,即成流體培養(yǎng)基。加入瓊脂粉增加了培養(yǎng)基的黏度,降低空氣中的氧氣進人培養(yǎng)基的速度,能使培養(yǎng)基保持較長時間的厭氧條件,有利于一般厭氧菌的生長繁殖,如硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基等。一般用于霉菌和厭氧菌檢查的液體培養(yǎng)基中可加人少量瓊脂使其成為流體培養(yǎng)。BBL液體培養(yǎng)基(雙歧桿菌液體培養(yǎng)基)
上海瑞楚生物科技有限公司是以提供培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶為主的有限責任公司(自然),公司始建于2012-11-29,在全國各個地區(qū)建立了良好的商貿渠道和技術協作關系。公司主要提供從事生物科技、農業(yè)科技、環(huán)保科技領域內的技術開發(fā)、技術咨詢、技術服務,化工原料及產品(除危險化學品、監(jiān)控化學品、煙花爆竹、民用baozha物品、易制毒化學品),日用百貨,金屬制品,塑料制品,儀器儀表,實驗室設備(除醫(yī)療器械)銷售,會務服務,從事貨物及技術的進出口業(yè)務等。等領域內的業(yè)務,產品滿意,服務可高,能夠滿足多方位人群或公司的需要。產品已銷往多個國家和地區(qū),被國內外眾多企業(yè)和客戶所認可。
相較于傳統(tǒng)選擇性培養(yǎng)基(如Baird-Parker瓊脂或MSA),Vogel-Johnson瓊脂在特... [詳情]
2025-06-09