HBS 和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在 Eagle′s(2.2g/L) 中比在 Hanks′(0.35g/L)中高。碳酸氫鈉需用高水平的 CO2 平衡,以維持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空氣水平的CO2中,溶液會變堿,Hanks′液在 CO2 培養(yǎng)箱中會變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織,需要用Eagle′s液,如果只是清洗將要在細胞培養(yǎng)基中儲存的組織,用Hanks′液就可以了。由于大多數(shù)細胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對細胞生長將產(chǎn)生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不完全相同,原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些。在配制培養(yǎng)用液時,需要注意一點:新配的培養(yǎng)基在經(jīng)過 0.10um 或 0.22um 濾膜過濾時,溶液的pH 還會向上浮動0.2左右。培養(yǎng)基是一種含有必需營養(yǎng)物質(zhì)的生長介質(zhì),用于細胞、細菌的培養(yǎng)和繁殖。GVPC瓊脂基礎(chǔ)
培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同,一般來講,細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對培養(yǎng)基pH條件進行控制,往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8。當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高。腸球菌顯色培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于微生物菌株的生長、染色及細胞背景下的細胞培養(yǎng)等方面。
培養(yǎng)基的種類有哪些?鑒別培養(yǎng)基:利用細菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,觀察細菌生長過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物,通過指示劑的反應(yīng)不同來鑒別細菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍瓊脂和動力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基等。選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,去抑制標(biāo)本中的雜菌生長,有助于所選擇的細菌種類的生長。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。
要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言,更是要進行嚴(yán)格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進行滅菌,某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基,可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。培養(yǎng)基也有不同的形態(tài),可以是液體、半固體或固體形式。
培養(yǎng)基按成分分類有哪些?按用途分類:根據(jù)用途不同,培養(yǎng)基可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、厭氧菌培養(yǎng)基等?;A(chǔ)培養(yǎng)基(basic media) 大多數(shù)微生物共同需要的營養(yǎng)基礎(chǔ)。某--微生物如有特殊需要,可在此基礎(chǔ)上添加某種成分即可,如蛋白胨水、肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂等。1%蛋白胨水培養(yǎng)基便是一個較簡單的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,該基礎(chǔ)培養(yǎng)基本身可供一般細菌增菌培養(yǎng)和靛基質(zhì)試驗用,若再加入指示劑和糖類,則配成糖發(fā)酵培養(yǎng)基,供糖發(fā)酵試驗用,成為鑒別培養(yǎng)基;若在1%蛋白胨水中增加氯化鈉用量并將pH提高到8.6左右,則變成堿性蛋白胨水,用于霍亂弧菌的增菌培養(yǎng),成為專門用的增菌培養(yǎng)基。常見的培養(yǎng)基包括LB培養(yǎng)基、TSB培養(yǎng)基等。GVPC瓊脂基礎(chǔ)
培養(yǎng)基的pH值需要根據(jù)不同微生物的生長適應(yīng)范圍進行調(diào)節(jié)。GVPC瓊脂基礎(chǔ)
細胞培養(yǎng)過程中,細胞培養(yǎng)基是不可或缺的,細胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細胞中供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。通常細胞體外培養(yǎng)時需要加入血清,以維持細胞的生長和存活。而除了血清之外,部分細胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細胞加入量會有差異,需根據(jù)細胞類型判斷。GVPC瓊脂基礎(chǔ)
上海瑞楚生物科技有限公司成立于2012-11-29年,在此之前我們已在培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶行業(yè)中有了多年的生產(chǎn)和服務(wù)經(jīng)驗,深受經(jīng)銷商和客戶的好評。我們從一個名不見經(jīng)傳的小公司,慢慢的適應(yīng)了市場的需求,得到了越來越多的客戶認可。公司業(yè)務(wù)不斷豐富,主要經(jīng)營的業(yè)務(wù)包括:培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶等多系列產(chǎn)品和服務(wù)。可以根據(jù)客戶需求開發(fā)出多種不同功能的產(chǎn)品,深受客戶的好評。公司秉承以人為本,科技創(chuàng)新,市場先導(dǎo),和諧共贏的理念,建立一支由培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶**組成的顧問團隊,由經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員組成的研發(fā)和應(yīng)用團隊。在市場競爭日趨激烈的現(xiàn)在,我們承諾保證培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶質(zhì)量和服務(wù),再創(chuàng)佳績是我們一直的追求,我們真誠的為客戶提供真誠的服務(wù),歡迎各位新老客戶來我公司參觀指導(dǎo)。
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