枯草芽孢桿菌具有抗逆能力強、易于繁殖，代謝產(chǎn)物豐富，抗類菌譜廣，對人畜高度安全等特點，加之收獲后果品貯藏條件的可控性，用于果品生物防腐（病原性腐爛）具有特殊優(yōu)勢?？莶菅挎邨U菌抗生體制劑有效地控制由鏈格孢霉、地霉屬、指狀青霉等致病菌引起的柑桔果腐病，防效在60%以上?？莶菅挎邨U菌可濕性粉劑2，000倍液對錦橙儲藏具有良好的保鮮效果。同時，枯草芽孢桿菌還能利用在鮮切花保鮮領(lǐng)域?？莶菅挎邨U菌在養(yǎng)殖業(yè)作用機(jī)理主要包括：調(diào)節(jié)消化道微生態(tài)平衡；提高畜禽消化能力；提高畜禽免疫的能力；產(chǎn)生維生素等營養(yǎng)素。金黃色葡萄球大多數(shù)能分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)生氣。蔥綠孢鏈霉菌菌種

大腸桿菌搖瓶發(fā)酵常用的化學(xué)合成培養(yǎng)基有LB、SOB、SOC等。培養(yǎng)基中通常含有碳（能）源、氮源，以及微營養(yǎng)物如微生物和微量元素，這些營養(yǎng)物的濃度與比例，對實現(xiàn)生產(chǎn)重組微生物的高密度發(fā)酵是很重要的。培養(yǎng)基中復(fù)合氮源的種類對重組大腸桿菌的高密度發(fā)酵也很重要。在某些情況下，向培養(yǎng)基中添加一些營養(yǎng)物質(zhì)能提高生產(chǎn)率。這些營養(yǎng)物的作用可能是作為產(chǎn)物前體，也有可能是阻止產(chǎn)物的降解。發(fā)酵過程：1、種子活化：將保存于-80℃的種子甘油菌室溫解凍，取500ul菌接入50mlLB培養(yǎng)基，再加入相對應(yīng)的篩選抗性，37℃培養(yǎng)7h。2、上罐：將上步活化的種子50ml接入3L發(fā)酵培養(yǎng)基中，設(shè)定溫度，空氣流量，壓力值，監(jiān)控DO與PH值。3、從發(fā)酵4小時開始，每隔1h進(jìn)行取樣檢測OD，當(dāng)OD值≥40時，開始誘導(dǎo)。4、誘導(dǎo)物：IPTG（1mol/L，過濾除菌），加入4ml，至終濃度達(dá)到1mmol/L，誘導(dǎo)階段溫度控制再35℃，其他條件不變，誘導(dǎo)10小時。5、誘導(dǎo)結(jié)束，放罐，5000rpm離心，收集菌體，于-80℃冰箱保存。白色腥擲孢菌菌株銅綠假單胞菌為土壤中存在的較常見的細(xì)菌之一。

銅綠假單胞菌低溫保存法主要為簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4攝氏度冰箱保存，保存時間不超過1~2個月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟，以隔絕外界空氣和水汽，保持時間可達(dá)3~4個月。液氮較低溫保存法，將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至-35攝氏度時，即可置于-150~-196攝氏度的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長期保存。

磁珠菌種使用說明：在無菌的條件下，打開瓶蓋并使用滅菌的接種棒或鑷子移出一個小珠，蓋好瓶蓋并盡快放回低溫保存。過度改變溫度會減少生物生存能力。小珠可直接使用接種在固體培養(yǎng)基培養(yǎng)皿上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，等待10分鐘待磁珠內(nèi)部菌種解凍，傾斜培養(yǎng)皿以滾動磁珠，使磁珠在培養(yǎng)皿表面滾動，滾動到的地方則接種了菌種?；蛘咝〈胖榭杉尤胫?00-200ul液體培養(yǎng)基中，震蕩搖晃幾次，然后用無菌吸頭吸取上述液體培養(yǎng)基至培養(yǎng)皿上，涂布均勻即可。

定量凍干粉菌種使用說明：凍干粉活化，沿著鋁塑蓋箭頭方向打開塑料蓋，然后輕輕撕開，去除鋁蓋，然后輕輕打開橡膠塞蓋，準(zhǔn)確取1ml溶解液加入至西林瓶中，蓋上橡膠塞蓋，上下顛倒混合均勻，用無菌吸頭取0.1ml涂布到含培養(yǎng)基培養(yǎng)皿上，培養(yǎng)2-3天。注意真空菌種管一旦敲開里面的凍干粉就必須馬上用完，如果冷藏定量可能會有誤差或可能出現(xiàn)染菌。

定量孢子懸液使用說明：從冰箱拿出孢子懸液，室溫解凍后，搖勻。用75%酒精擦拭西林瓶蓋，酒精燈上灼燒消毒后，撕開西林瓶鋁蓋。用無菌的吸頭或者無菌的滴管吸取一定量的孢子懸液，直接噴霧于樣品表面。如果孢子懸液需要稀釋，可以用無菌的0.9%的生理鹽水直接稀釋后直接噴霧于樣品表面。 銅綠假單胞菌是一種良好的交叉保護(hù)抗原。

對銅綠假單胞菌進(jìn)行保存的較低溫甘油保存法與半固體保存法，二者進(jìn)行比較，較低溫甘油保存法具有菌種保存時間長、存活率高和色素保存完好的明顯優(yōu)勢；并具有操作簡便、污染少、傳代頻率低、菌株性狀典型、占用的空間小等優(yōu)點，易于在教學(xué)和科研中使用。但在采用較低溫甘油保存法時，要注意較低溫甘油保存法中甘油的濃度為15%，也有采用30%甘油和40%甘油進(jìn)行保種，不同的甘油。濃度適應(yīng)的菌種有所側(cè)重。菌種復(fù)蘇時速度要快，要在解凍前進(jìn)行移種，移種后仍可將保存管凍于-70攝氏度冰箱中繼續(xù)保存，若待完全解凍后再移種，菌株有可能無法復(fù)蘇。金黃色葡萄球需要在-80度保存，保質(zhì)期可以1-2年?；ㄉ扑_克氏菌

金黃色葡萄球?qū)Ω邷赜幸欢ǖ哪褪苣芰Γ?0℃以上的高溫環(huán)境下30min才可以將其徹底殺死。蔥綠孢鏈霉菌菌種

銅綠假單胞菌分解蛋白質(zhì)能力甚強，而發(fā)酵糖類能力較低，分解葡萄糖，伯膠糖，單奶糖，甘露糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解麥芽糖，菊糖和棉籽糖，甘露醇、乳糖及蔗糖，能液化明膠。分解尿素，不形成吲哚，氧化酶試驗陽性，可利用枸椽酸鹽。不產(chǎn)生H2S，MR試驗和VP試驗均為陰性。銅綠假單胞菌有菌體o抗原和鞭毛h抗原。一是o抗原含有內(nèi)毒養(yǎng)素和原內(nèi)毒養(yǎng)素蛋白質(zhì)兩種成份。原內(nèi)毒養(yǎng)素蛋白質(zhì)是一種高分子、低毒性，免疫原性強的保護(hù)性抗原，不只存在于不同血清型銅綠假單胞菌中，而且普遍存在于假單胞菌屬的其他細(xì)菌以及肺炎桿菌、大腸桿菌、霍亂弧菌等g-細(xì)菌中，是一種良好的交叉保護(hù)抗原。二是脂多糖，與特異性有密切關(guān)系。蔥綠孢鏈霉菌菌種

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