目前可用的指示劑較多,根據(jù)熒光光譜、與鈣離子親和力及其化學特性的不同大致分為化學性鈣離子指示劑和基因編碼鈣離子指示劑。前者指可特異性與鈣離子結(jié)合的小分子,常用的有fura-2、indo-1等;而后者主要指來源于綠色熒光蛋白GFP及其變異體的蛋白質(zhì),可與鈣調(diào)蛋白和肌球蛋白輕鏈激酶M13域結(jié)合,常用的有GCaMP、TN-XXL等,其中GCaMP5G和GCaMP6被廣泛應用于在體鈣成像研究中。生物熒光蛋白:Aequorin是水母熒光素(coelenterazine)通過硫酸酯鍵或過氧化鍵緊緊連到脫輔水母發(fā)光蛋白上形成的,遇到鈣離子就發(fā)出470nm藍光,可以作為鈣離子的檢測試劑;化學鈣離子指示劑:Fura-2可在紫外光下被jihuo且發(fā)射出505-520nm光;基于FRET的基因編碼的鈣指示劑;單個熒光基因編碼的鈣指示劑。傳統(tǒng)的鈣成像技術(shù)受限于顯微鏡的視野,只能對很小的一片區(qū)域進行記錄。上海神經(jīng)細胞鈣成像價格多少
哺乳動物進入睡眠后神經(jīng)元活動發(fā)生了戲劇性的變化,覺醒的神經(jīng)元活動被認為會增加睡眠需求。其他腦細胞(膠質(zhì)細胞)在自然睡眠-覺醒周期中的變化以及它們在睡眠調(diào)節(jié)中的作用相對來說還沒有被研究過。華盛頓州立大學ElsonS.Floyd醫(yī)學院生物醫(yī)學系的MarcosG.Frank研究團隊于2020年9月24日在CurrentBiology上發(fā)表論文“ARoleforAstroglialCalciuminMammalianSleepandSleepRegulation”,通過使用滔博生物-Inscopix自由活動鈣成像顯微鏡發(fā)現(xiàn)額葉皮層的星形膠質(zhì)細胞鈣濃度隨睡眠和清醒而變化,會在睡眠剝奪后改變,并調(diào)節(jié)睡眠需求。哈爾濱光遺傳鈣成像鈣成像技術(shù)被廣泛應用于同時監(jiān)測成百上千個神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化。
鈣成像是一種用于觀察和研究細胞內(nèi)鈣離子濃度變化的技術(shù)。鈣離子在細胞內(nèi)起著重要的調(diào)節(jié)作用,參與細胞信號傳導、細胞凋亡、細胞分化等生物過程。鈣成像技術(shù)通過使用熒光探針或基因工程技術(shù)將熒光蛋白與鈣離子結(jié)合,使其能夠發(fā)出熒光信號。當細胞內(nèi)鈣離子濃度發(fā)生變化時,熒光信號的強度也會相應改變,從而可以通過顯微鏡觀察到鈣離子的動態(tài)變化。鈣成像技術(shù)廣泛應用于神經(jīng)科學、細胞生物學、藥理學等領(lǐng)域,有助于揭示鈣離子在生物過程中的作用機制。
鈣成像技術(shù)是一種監(jiān)測組織內(nèi)鈣離子濃度的方法,通過使用鈣離子指示劑,科學家可以觀察神經(jīng)信號在神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中的傳遞過程,并了解神經(jīng)元活動與內(nèi)部鈣離子濃度的關(guān)系。在靜息狀態(tài)下,大部分神經(jīng)元的胞內(nèi)鈣離子濃度為50-100nM,而當神經(jīng)元活動的時候,胞內(nèi)鈣離子濃度能上升10-100倍,增加的鈣離子對于含有神經(jīng)遞質(zhì)的突觸囊泡的胞吐釋放過程必不可少。鈣成像是一種生物醫(yī)學技術(shù),主要用于觀察和記錄細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。鈣離子是細胞內(nèi)重要的信號分子,其濃度的改變可以影響細胞的生理功能和病理狀態(tài)。因此,鈣成像技術(shù)對于研究細胞生物學、神經(jīng)科學、心血管醫(yī)學等領(lǐng)域具有重要意義??梢詫ι畈磕X區(qū)、皮層區(qū)域等大部分腦區(qū)進行鈣成像使用鈣離子指示蛋白。
鈣離子在很多生理性的活動中都發(fā)揮著重要作用,除了在肌肉細胞收縮中扮演著重要角色,鈣離子也是神經(jīng)元活動的重要“風向標”之一:當神經(jīng)元膜電位發(fā)生去極化,產(chǎn)生的動作電位傳導到神經(jīng)元軸突末梢時,細胞膜上的電壓門控鈣離子通道打開,大量鈣離子內(nèi)流,包含神經(jīng)遞質(zhì)的囊泡由突觸前膜釋放至后膜,下游神經(jīng)元就得以接受到上游的信號。因此,鈣離子成像可以追蹤神經(jīng)元動作電位,從而幫助我們了解神經(jīng)元集群的活動,可以用于感知覺,學習記憶,社會性行為等各種各樣的研究中。鈣離子在很多生理活動中都發(fā)揮著重要作用。西安熒光顯微鈣成像供應商
長時間追蹤相同細胞,進行可重復的科學研究對自由行為動物進行慢性鈣成像研究。上海神經(jīng)細胞鈣成像價格多少
近年來出現(xiàn)了通過植入性的microscope或microlens進行freelymoving動物鈣成像的技術(shù)。如光纖成像法:使用一端帶有GRINlens的光纖連接顯微鏡和動物大腦,從特定腦區(qū)發(fā)出的熒光信號被光纖收集,然后通過相機成像。動物頭部只需植入GRINlens,方便活動,而且可以同時植入多個lens來觀察不同的腦區(qū)之間的聯(lián)系和相互作用。還有直接植入動物大腦的微型熒光顯微鏡,將GRINlens直接植入皮層下的海馬,下丘腦,丘腦等區(qū)域,可以監(jiān)測深部腦區(qū)的神經(jīng)元活動。這種微型顯微鏡的重量只有幾克,不會影響動物自由活動,可以提供800μm600μm視野和1.50μm橫向分辨率。上海神經(jīng)細胞鈣成像價格多少