nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)是可以在自由活動的動物上進行大范圍的動態(tài)熒光成像的設(shè)備。通過nVist,您可以視覺化細胞活動,同步行為學,以及長期追蹤神經(jīng)環(huán)路的活動。nVista被應(yīng)用于全球的研究機構(gòu)中,產(chǎn)生了影響力的大數(shù)據(jù)庫。主要特征:利用GCamp鈣離子探針進行成像功能完整的數(shù)據(jù)采集軟件,實現(xiàn)對焦,調(diào)焦,行為同步化單細胞分辨率下,可同時捕獲成百上千神經(jīng)元活動長時間追蹤細胞,追蹤時間可長達數(shù)月電子對焦,保證視野范圍的恒定自由動物行為學:可運用標準行為學測量方法,行為操作箱,迷宮,曠場等可進行皮層,深部核團,以及腦干,中腦等區(qū)域的成像記錄動物無需進行適應(yīng)性訓練鈣離子成像+自由活動行為學1.錨定特殊細胞類型,例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.單細胞的空間分辨率,可以分析細胞在空間內(nèi)的mapping和編碼信息3.動物可在大范圍的曠場內(nèi)自由活動4.長時程追蹤同一細胞的放電規(guī)律變化:用于學習,記憶,藥物成癮等研究。5.可對腦內(nèi)的深部核團進行記錄nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)成像效果好。神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)技術(shù)參數(shù)專業(yè)的數(shù)據(jù)采集軟件Inscopix數(shù)據(jù)采集軟件可記錄成百上千個神經(jīng)元細胞。電子調(diào)焦功能,可通過軟件實現(xiàn)物理調(diào)焦。鈣成像系統(tǒng)集成自動控制和精確計時的多模式輸入端口。上海光遺傳鈣成像nVista
想要對鈣離子的動態(tài)變化進行有效的檢測,鈣離子指示劑的選擇顯得尤為重要。鈣離子熒光指示劑在未結(jié)合鈣離子前幾乎無熒光,與鈣離子結(jié)合后,熒光強度xianzhu增強。利用這一原理,可以通過指示劑的信號強弱來觀察細胞內(nèi)鈣離子濃度水平的變化。根據(jù)激發(fā)光波長范圍,鈣離子指示劑可以分為可見光激發(fā)和紫外光激發(fā),而根據(jù)其工作原理又可以分為比率和非比率型。常見的鈣離子指示劑有以下幾種:紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針、可見光激發(fā)Ca2+熒光探針、轉(zhuǎn)基因Ca2+指示劑。美國inscopix鈣成像grain lens鈣成像系統(tǒng)在自由行為動物上對鈣離子動態(tài)進行單細胞分辨率級別的持久成像。
通過篩選天然與人工合成的融合體,在小鼠與斑馬魚幼蟲身上成功得到以為靶點的致密神經(jīng)回路報告,報告顯示來自神經(jīng)纖維的偽信號明顯減少,信噪比增加,神經(jīng)元之間的偽影相關(guān)性降低。這些結(jié)果均說明GCaMP6f和GCaMP7f的細胞體靶向變體(Soma-GCaMP6f,Soma-GCaMP7f)對提高單光子熒光成像技術(shù)的精細性起到著重要作用。這種胞體靶向突變體對提高神經(jīng)信號標記的精細性是否具有組織特異性或物種特異性呢?研究團隊針對這一問題,分別在小鼠不同腦區(qū)以及斑馬魚幼魚的整胚轉(zhuǎn)染和斑馬魚不同發(fā)育時期的信號采集等方面進行研究。
隨著功能光學成像技術(shù)的發(fā)展,神經(jīng)學家們已經(jīng)可以研究腦區(qū)和神經(jīng)元內(nèi)部的工作情況。功能鈣成像技術(shù)就是其中之一,它的主要原理是將外源性熒光信號和生理現(xiàn)象耦合起來——通過熒光染料信號的改變反映細胞內(nèi)游離鈣離子濃度,通過這個變化來daibiao細胞的功能狀態(tài)。目前這種技術(shù)被廣泛應(yīng)用于實時監(jiān)測一群相關(guān)神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化,從而判斷其功能活動。該技術(shù)的出現(xiàn)使得科學家可以親眼目睹神經(jīng)信號在神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)之中時間和空間上的傳遞穿梭。鈣成像技術(shù)(calcium imaging)是指利用鈣離子指示劑或指示監(jiān)測組織內(nèi)鈣離子濃度的方法。
鈣離子在很多生理性的活動中都發(fā)揮著重要作用,除了在肌肉細胞收縮中扮演著重要角色,鈣離子也是神經(jīng)元活動的重要“風向標”之一:當神經(jīng)元膜電位發(fā)生去極化,產(chǎn)生的動作電位傳導(dǎo)到神經(jīng)元軸突末梢時,細胞膜上的電壓門控鈣離子通道打開,大量鈣離子內(nèi)流,包含神經(jīng)遞質(zhì)的囊泡由突觸前膜釋放至后膜,下游神經(jīng)元就得以接受到上游的信號。因此,鈣離子成像可以追蹤神經(jīng)元動作電位,從而幫助我們了解神經(jīng)元集群的活動,可以用于感知覺,學習記憶,社會性行為等各種各樣的研究中。鈣成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)鈣離子產(chǎn)生各種各樣的胞內(nèi)信號。重慶神經(jīng)細胞鈣成像
現(xiàn)在鈣成像技術(shù)使用的鈣離子指示劑主要有化學性鈣離子指示劑和基因編碼鈣離子指示劑。上海光遺傳鈣成像nVista
鈣成像具有以下幾個優(yōu)勢:1.非侵入性:鈣成像技術(shù)可以在活物細胞或組織中進行觀察,無需破壞細胞或組織的完整性,因此是一種非侵入性的技術(shù)。2.高時空分辨率:鈣成像技術(shù)可以實時觀察細胞內(nèi)鈣離子的動態(tài)變化,具有較高的時空分辨率??梢圆蹲降解}離子濃度的瞬時變化,揭示細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)的快速過程。3.多樣性:鈣成像技術(shù)可以使用不同的熒光探針或基因工程技術(shù),實現(xiàn)對不同類型的細胞或組織進行鈣成像??梢愿鶕?jù)需要選擇適合的探針或方法,擴展應(yīng)用范圍。4.可定量分析:通過鈣成像技術(shù)可以獲得熒光信號的強度,可以進行定量分析,了解鈣離子濃度的變化程度。可以通過比較不同條件下的鈣成像結(jié)果,研究因素對鈣離子信號的調(diào)控作用。5.可應(yīng)用于多個領(lǐng)域:鈣成像技術(shù)廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學、細胞生物學、藥理學等領(lǐng)域??梢匝芯可窠?jīng)元活動、細胞信號傳導(dǎo)、細胞凋亡等生物過程,有助于揭示生物學機制和疾病發(fā)生及發(fā)展的過程。綜上所述,鈣成像技術(shù)具有非侵入性、高時空分辨率、多樣性、可定量分析和廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域等優(yōu)勢,成為研究細胞內(nèi)鈣離子動態(tài)變化的重要工具。上海光遺傳鈣成像nVista