大家都知道,只有游離鈣才具有生物學活性,而細胞質內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定,同時也受鈣結合蛋白的影響。細胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種,其中包括電壓門控鈣離子通道、離子型谷氨酰胺受體、煙堿型膽堿能受體(nAChR)和瞬時受體電位C型通道(TRPC)等。神經(jīng)元鈣成像的原理就是利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過熒光強度表現(xiàn)出來,以反映神經(jīng)元活性。該方法可以同時觀察多個功能或位置相關的腦細胞。雙光子熒光顯微鏡的發(fā)展,使在實驗動物處于活動狀態(tài)下的鈣成像技術取得了飛速進展。寧波光遺傳鈣成像哪里買
想要對鈣離子的動態(tài)變化進行有效的檢測,鈣離子指示劑的選擇顯得尤為重要。鈣離子熒光指示劑在未結合鈣離子前幾乎無熒光,與鈣離子結合后,熒光強度明顯增強。利用這一原理,可以通過指示劑的信號強弱來觀察細胞內(nèi)鈣離子濃度水平的變化。根據(jù)激發(fā)光波長范圍,鈣離子指示劑可以分為可見光激發(fā)和紫外光激發(fā),而根據(jù)其工作原理又可以分為比率和非比率型。常見的鈣離子指示劑有,紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針、可見光激發(fā)Ca2+熒光探針、轉基因Ca2+指示劑。上海專業(yè)鈣成像概念長時間追蹤相同細胞,進行可重復的科學研究對自由行為動物進行慢性鈣成像研究。
眾所周知,只有游離鈣才具有生物學活性,而細胞質內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定,同時也受鈣結合蛋白的影響。細胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種,其中包括電壓門控鈣離子通道、離子型谷氨酰胺受體、煙堿型膽堿能受體(nAChR)和瞬時受體電位C型通道(TRPC)等。神經(jīng)元鈣成像的原理就是利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過熒光強度表現(xiàn)出來,以反映神經(jīng)元活性。該方法可以同時觀察多個功能或位置相關的腦細胞。
鈣離子通過參與多種細胞內(nèi)信號傳導途徑來調控絕大多數(shù)類型神經(jīng)元的功能。由于鈣離子信號在已知的細胞器結構中發(fā)揮其特定的功能,鈣離子成像顯得尤為重要。在神經(jīng)系統(tǒng)中,由于神經(jīng)元的多樣性,導致鈣離子功能也多樣化。在突觸前膜,鈣內(nèi)流激發(fā)貯存神經(jīng)遞質的神經(jīng)小泡向胞外釋放;在突觸后膜,樹突棘內(nèi)鈣水平瞬間升高,介導了突觸可塑性;在細胞核內(nèi),鈣信號能夠調控基因轉錄?,F(xiàn)在常使用的鈣離子指示劑有化學性鈣離子指示劑(ChemicalIndicators)和基因編碼鈣離子指示劑(GeneticallyEncodedIndicators)兩類。鈣離子在很多生理活動中都發(fā)揮著重要作用。
Anderson研究團隊發(fā)現(xiàn)實驗室雄性小鼠對雌性和雄性的攀爬行為可以通過是否存在超聲發(fā)聲(USV)來區(qū)分。這些和更多的行為數(shù)據(jù)表明,大多數(shù)雄性主導的攀爬是攻擊性的,盡管在極少數(shù)情況下可能是性行為。研究人員調查了USV+和USV-攀爬是否使用相同或不同的下丘腦神經(jīng)基質。通過使用Inscopix自由行為顯微鈣成像方法觀察內(nèi)側視前區(qū)(MPOA)或腹內(nèi)側下丘腦腹側細分(VMHvl)中雌jisu受體1(ESR1)陽性神經(jīng)元,發(fā)現(xiàn)在小鼠活動中可以解碼出在USV+和USV-攀爬過程中神經(jīng)元活動的獨特模式。交叉光遺傳刺激表達ESR1和囊狀GABA轉運蛋白(VGAT)的MPOA神經(jīng)元,可促進USV+攀爬,并將雄性的定向攻擊轉換為USV攀爬。傳統(tǒng)的鈣成像技術受限于顯微鏡的視野,只能對很小的一片區(qū)域進行記錄。深圳動物神經(jīng)元鈣成像供應商
進行鈣測定必須借助外界的某種可視化物質作為它的標志物。寧波光遺傳鈣成像哪里買
細胞內(nèi)鈣離子作為重要的信號分子其作用具有時間性和空間性。當個細胞興奮時,產(chǎn)生了一個電沖動,此時,細胞外的鈣離子流入該細胞內(nèi),促使該細胞分泌神經(jīng)遞質,神經(jīng)遞質與相鄰的下一級神經(jīng)細胞膜上的蛋白分子結合,促使這一級神經(jīng)細胞產(chǎn)生新的電沖動。以此類推,神經(jīng)信號便一級一級地傳遞下去,從而構成復雜的信號體系,較終形成學習、記憶等大腦的高級功能。在哺乳動物神經(jīng)系統(tǒng)中,鈣離子同樣扮演著重要的信號分子的角色。靜息狀態(tài)下大部分神經(jīng)元細胞內(nèi)鈣離子濃度約為50-100nM,而細胞興奮時鈣離子濃度能瞬間上升10-100倍,增加的鈣離子對于突觸囊泡胞吐釋放神經(jīng)遞質的過程必不可少。眾所周知,只有游離鈣才具有生物學活性,而細胞質內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定,同時也受鈣結合蛋白的影響。細胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種,其中包括電壓門控鈣離子通道、離子型谷氨酰胺受體、煙堿型膽堿能受體(nAChR)和瞬時受體電位C型通道(TRPC)等。神經(jīng)元鈣成像的原理就是利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過熒光強度表現(xiàn)出來,以反映神經(jīng)元活性。該方法可以同時觀察多個功能或位置相關的腦細胞。寧波光遺傳鈣成像哪里買