基因療法制造商面臨的挑戰(zhàn)與抗體療法剛出現(xiàn)時(shí)單克隆抗體制造商面臨的挑戰(zhàn)相似。例如，在生產(chǎn)、儲(chǔ)存和處理過程中，單克隆抗體也會(huì)受到低滴度、產(chǎn)品和工藝相關(guān)雜質(zhì)和降解的挑戰(zhàn)。盡管與重組單克隆抗體相比，單劑量AAV產(chǎn)品與工藝相關(guān)雜質(zhì)相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)可能更低（取決于雜質(zhì)的類型、劑量和給藥途徑），但這也不能忽視。由于這些相似性，制藥商、化學(xué)品和輔料供應(yīng)商有機(jī)會(huì)進(jìn)行合作，并開發(fā)創(chuàng)新的解決方案，以實(shí)現(xiàn)穩(wěn)健和成本效益高的AAV產(chǎn)品生產(chǎn)。鑒于生物制品藥物更嚴(yán)格的質(zhì)量要求，廠家對(duì)SAN HQ高鹽核酸酶的生產(chǎn)及質(zhì)控符合更高標(biāo)準(zhǔn)。海南上海倍篤生物高鹽核酸酶70921-160
染色質(zhì)由組蛋白和DNA組成，——147個(gè)堿基對(duì)的DNA纏繞在8個(gè)組蛋白（由H2A、H2B、H3和H4形成的八聚體）周圍，形成基本的染色質(zhì)單位，即核小體。核小體像珠串一樣串連在一起，并被包裝成更高階的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。DNA帶負(fù)電荷，富含堿性氨基酸的組蛋白帶正電荷，且組蛋白多聚物有很多疏水區(qū)段。所有這些特點(diǎn)導(dǎo)致宿主DNA殘留（HCD）能吸附很多物質(zhì)，包括宿主蛋白殘留（HCD）、色譜填料、目的病毒顆粒等，因此，HCD的存在增加了工藝流程的復(fù)雜度，同時(shí)也降低了病毒顆粒的穩(wěn)定性。北京SAN HQ高鹽核酸酶高鹽能夠抑制AAV病毒載體聚集，提高AAV病毒載體產(chǎn)量。
一般來說，生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM（BenzonaseTM是Merck的注冊(cè)商標(biāo)）為主，能高效降解任何形式（雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀）的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen，通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍（<100mM鹽濃度），且酶活隨著鹽濃度上升而下降，在300mM鹽濃度時(shí)酶活幾乎喪失。對(duì)于細(xì)胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV，LV由于含有脂包膜結(jié)構(gòu)一般都在生理鹽條件下存在，而AAV在高鹽條件下不易團(tuán)聚、更穩(wěn)定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下，Benzonase活性受到抑制。
跟其他類型的核酸酶一樣，SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多，分為可逆滅活及不可逆滅活。金屬離子螯合劑如EDTA會(huì)可逆抑制兩者的活性，加入的EDTA濃度一般是溶液中Mg2+濃度的2倍左右即可完全抑制活性；后續(xù)補(bǔ)加過量的Mg2+即可恢復(fù)核酸酶活性。加熱、還原劑（如DTT）、咪唑、甘油及表面活性劑（如高于15%濃度的Triton X-100、SDS、尿素等）等都可以使其不可逆失活。在生物工藝流程，需要結(jié)合上下游應(yīng)用需要選擇合適的方法去除或滅活核酸酶。SAN HQ提高核酸污染去除效率，同時(shí)提高目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量。
一個(gè)美國客戶做了對(duì)照實(shí)驗(yàn)，比較Benzonase和SAN HQ高鹽核酸酶純化病毒載體的效率。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下，HEK293細(xì)胞轉(zhuǎn)染及培養(yǎng)后，分別取了150Million的293細(xì)胞進(jìn)行裂解，分別在各自適宜的條件下（即SAN HQ組反應(yīng)條件為500mM鹽濃度，而Benzonase組反應(yīng)條件是150mM鹽濃度）加入等量的酶（0、2kU、3kU、4kU、5kU、6kU），37°孵育1hr，加入Picogreen染料后檢測(cè)DNA的殘留量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SAN HQ高鹽核酸酶組用更少的酶得到了更好的去除效果（即2kU的SAN HQ消化結(jié)果明顯優(yōu)于6kU的Benzonase），且SAN HQ的高純化效率是非血清型依賴的。使用SAN HQ高鹽核酸酶可以更少的酶量獲得更高的去除率，對(duì)載體的產(chǎn)量和活性沒有任何負(fù)面影響；河南上海倍篤生物高鹽核酸酶70921-160
使用Benzonase時(shí)，不能把載體表面的DNA去除徹底，因而不能阻止純化的病毒載體聚集。海南上海倍篤生物高鹽核酸酶70921-160
由于Triton X-100的降解產(chǎn)物對(duì)環(huán)境影響很大，自2023年12月22日起，歐盟將禁止使用Triton X-100生產(chǎn)試驗(yàn)性醫(yī)療產(chǎn)品等。請(qǐng)注意，含有≤0.1% (w/w) Triton X-100表面活性劑的物質(zhì)不被視為危險(xiǎn)物質(zhì)，仍然可以進(jìn)口到歐洲。由于該產(chǎn)品通常不用作生物制品或先進(jìn)療法的賦形劑，因此在歐洲以外生產(chǎn)的大多數(shù)藥物在其開發(fā)商考慮在歐盟生產(chǎn)之前不需要生產(chǎn)變更。此外，已經(jīng)獲得許可的藥物及其賦形劑不受該規(guī)則約束。所有其它希望在歐盟生產(chǎn)生物藥物和研究產(chǎn)品的生產(chǎn)商都必須尋求Triton X-100的替代品并驗(yàn)證它們對(duì)各自用途的適用性。為了支持客戶項(xiàng)目更好在歐盟區(qū)域申報(bào)上市，ArcticZymes Technologies于2019年推出了Triton X-100 Free的SAN HQ TF高鹽核酸酶。與SAN HQ高鹽核酸酶相比，SAN HQ TF用Tween-20替代了Triton X-100，酶活性能完全一致。目前，SAN HQ和SAN HQ TF都有項(xiàng)目在臨床階段，相關(guān)性能都得到了行業(yè)客戶的認(rèn)可。海南上海倍篤生物高鹽核酸酶70921-160
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