Mayer等(2023)以measles virus(麻疹病毒,MV)為例,評估了四種不同核酸酶(BenzonaseTM、DeneraseTM、M-SAN HQ中鹽核酸酶及SAN HQ高鹽核酸酶)對于染色質(zhì)DNA去除的效果。Vero細(xì)胞通過微載體貼壁培養(yǎng)來生產(chǎn)麻疹病毒MV,72h后收獲上清液,使用3μm cellulose filter(Sartorius)過濾后分裝多份,置于-80℃保存便于后續(xù)使用。在解凍后的上清中調(diào)節(jié)對應(yīng)鹽濃度,并加入50 U/ml核酸酶,37℃孵育2hr進(jìn)行消化,消化后留樣;將消化后上清液過Capto Core 700 (Cytiva)柱子,收集流穿液,之后洗雜、洗脫,并分別留樣。通過SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn),相比Benzonase等傳統(tǒng)核酸酶,在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶更高效將染色質(zhì)DNA剪切成更小片段,甚至將核小體DNA剪切更徹底。M-SAN HQ中鹽核酸酶在細(xì)胞培養(yǎng)條件或生理鹽濃度下具有較高活性。麗水70950-150中鹽核酸酶供應(yīng)商
ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶,2021年推出對應(yīng)的M-SAN HQ ELISA kit。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中M-SAN HQ中鹽核酸酶的殘留含量,特異性的anti-M-SAN作為捕獲抗體偶聯(lián)在孔板上,辣根過氧化酶HRP標(biāo)記anti-M-SAN作為檢測抗體,TMB是檢測反應(yīng)底物。該試劑盒特異識別M-SAN HQ中鹽核酸酶,對其它核酸酶沒有特異性結(jié)合。它的定量范圍是0.12-7.5ng/ml;12*8strips的設(shè)計(jì)規(guī)格,使用靈活,更能降低使用成本。麗水70950-150中鹽核酸酶供應(yīng)商中鹽核酸酶具有純度高(≥99%)、 內(nèi)毒水平低(<0.25EU/1kU)的特點(diǎn);
對于含包膜的病毒載體,如慢病毒LV、逆轉(zhuǎn)錄病毒RV等,在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽核酸酶,作為市場上更適合生理鹽條件的核酸酶,所以,M-SAN HQ成了包膜病毒載體生產(chǎn)的更好選擇。優(yōu)勢在于:1. M-SAN HQ兼容多種細(xì)胞培養(yǎng)體系,在細(xì)胞培養(yǎng)鹽濃度條件下具有更優(yōu)活性;2. M-SAN HQ酶活更高、酶切速度更快,縮短孵育時間;3. M-SAN HQ能夠高效剪切染色質(zhì)到更小片段,簡化下游工藝流程;4. 相比Benzonase,M-SAN HQ用量減少1/2-2/3,降低了酶用量及生產(chǎn)成本。
ArcticZymes Technologies致力于提供高質(zhì)量產(chǎn)品,具有良好的批間一致性、穩(wěn)定可靠的質(zhì)量、及時的文件及技術(shù)支持。ArcticZymes所有產(chǎn)品的開發(fā)、生產(chǎn)及銷售等都符合ISO13485:2016質(zhì)量管理體系標(biāo)準(zhǔn);鑒于生物制品更嚴(yán)格的質(zhì)控要求,廠家對鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品(Salt Active Nucleases,SANs)的生產(chǎn)及質(zhì)控,在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,增加了cGMP相應(yīng)要求,如生產(chǎn)用原輔料是Non-animal和Non-plant來源的,終產(chǎn)品經(jīng)過0.22μm過濾sterilization,放行檢測包括microbes、fungus及內(nèi)毒檢測等,所有標(biāo)準(zhǔn)符合USP-EP要求。ArcticZymes Technologies旨在是研究和開發(fā)具有獨(dú)特特性的酶。
ArcticZymes產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于藥物生產(chǎn)、分子研究、體外診斷等領(lǐng)域。例如,在藥物生產(chǎn)領(lǐng)域,鹽活性核酸酶(SANs)系列產(chǎn)品用于細(xì)胞基因藥物及Vaccine的virus載體生產(chǎn)過程。在分子研究領(lǐng)域,蝦堿酶(SAP)、DNA酶(Dnase)、蛋白酶(AZ Proteinase)、連接酶(R2D Ligase)等用于頭部Life Science品牌的科研kit中。在體外診斷領(lǐng)域,等溫?cái)U(kuò)增酶、UNG酶、蛋白酶等產(chǎn)品應(yīng)用于國際TOP診斷公司的生產(chǎn)流程中。此外,ArcticZymes專注于開發(fā)更好的解決方案,不斷超越合作伙伴的期待,從而與合作伙伴建立牢固可靠的關(guān)系。江西中鹽核酸酶款式哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。寧波倍篤生物中鹽核酸酶廠家
M-SAN HQ ELISA Kit能夠定量檢測M-SAN HQ中鹽核酸酶殘留。麗水70950-150中鹽核酸酶供應(yīng)商
文章作者對酶法去除dsDNA進(jìn)行了優(yōu)化研究,兩種酶濃度梯度為25U/ml、50U/ml及100U/ml,Mg2+濃度為5mM,通過PicoGreen檢測dsDNA含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對dsDNA去除效果明顯優(yōu)于100U/ml的Benzonase。此外,在酶切反應(yīng)速度方面,M-SAN HQ有更明顯的優(yōu)勢,——在低濃度底物dsDNA(如20ng/ml)條件下,50U/ml的M-SAN HQ在5分鐘內(nèi)將dsDNA降解到2ng/ml左右;而50U/ml的Benzonase在30分鐘孵育消化后,dsDNA濃度依然是12ng/ml左右。麗水70950-150中鹽核酸酶供應(yīng)商
宿主細(xì)胞DNA殘留的擔(dān)憂是基于致ai風(fēng)險(xiǎn)理論,特別是生產(chǎn)細(xì)胞系所包含的致ai序列,比如較常見腺病毒基...
【詳情】倫敦大學(xué)學(xué)院(UCL)的工藝開發(fā)團(tuán)隊(duì),在細(xì)胞藥物Car-T涉及的慢病毒(Lentivirus,LV)...
【詳情】對于含包膜的病毒載體,如慢病毒LV、逆轉(zhuǎn)錄病毒RV等,在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽...
【詳情】在生物工藝流程中,需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染,而核酸酶作為外源成份,也需要在生產(chǎn)流程中去除...
【詳情】基因藥物常用的AAV載體有三種生產(chǎn)方法,分別是三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系、桿狀病毒表達(dá)載體體系和包裝細(xì)胞體系。其...
【詳情】在生物工藝中,核酸酶的主要作用是高效消化宿主細(xì)胞DNA(HCD),并將其分解成足夠小的片段,以便在下...
【詳情】ArcticZymes Technologies致力于提供高質(zhì)量產(chǎn)品,具有良好的批間一致性、穩(wěn)定可靠...
【詳情】宿主細(xì)胞DNA(HCD)殘留以染色質(zhì)形式存在,其中有帶負(fù)電荷的DNA、帶正電荷及疏水區(qū)段的組蛋白,就...
【詳情】大規(guī)模生產(chǎn)階段,AAV/LV載體生產(chǎn)流程跟抗體、疫苗類藥物的生產(chǎn)類似,主要包含上游培養(yǎng)、下游純化及制...
【詳情】ArcticZymes Technologies致力于提供高質(zhì)量產(chǎn)品,具有良好的批間一致性、穩(wěn)定可靠...
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