文章作者對酶法去除dsDNA進(jìn)行了優(yōu)化研究,兩種酶濃度梯度為25U/ml、50U/ml及100U/ml,Mg2+濃度為5mM,通過PicoGreen檢測dsDNA含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對dsDNA去除效果明顯優(yōu)于100U/ml的Benzonase。此外,在酶切反應(yīng)速度方面,M-SAN HQ有更明顯的優(yōu)勢,——在低濃度底物dsDNA(如20ng/ml)條件下,50U/ml的M-SAN HQ在5分鐘內(nèi)將dsDNA降解到2ng/ml左右;而50U/ml的Benzonase在30分鐘孵育消化后,dsDNA濃度依然是12ng/ml左右。M-SAN HQ ELISA kit檢測產(chǎn)品操作簡單,1.5–2hr即可完成檢測。青海生理鹽條件中鹽核酸酶70950-202
ArcticZymes廠家對鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品(Salt Active Nucleases,SANs)的生產(chǎn)及質(zhì)控,在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,增加了cGMP質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),如microbes、endotoxin、蛋白酶等,符合USP-EP要求。廠家提供HQ級別和GMP級別的SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,從成本角度分別滿足臨床前和早期臨床階段、商業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)階段的需求;且GMP級SAN HQ高鹽核酸酶已完成在FDA的藥物主文件(Drug Master File, DMF)申報備案,助力加快藥物申報流程。福建ArcticZymes中鹽核酸酶廣州中鹽核酸酶價格哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。
M-SAN HQ中鹽核酸酶發(fā)揮酶活性的條件比較廣。例如,該酶適宜的鹽濃度(NaCl)范圍是0mM-225mM,能耐受400mM NaCl濃度。適宜反應(yīng)溫度為20℃-37℃,能耐受4℃-40℃。Mg2+濃度大于0.5mM即可,在4-15mM范圍即可表現(xiàn)更高活性。跟其他核酸酶不同,M-SAN HQ中鹽核酸酶不是堿性核酸酶,其適宜pH為7.2-8.7,能耐受6.3-8.7。綜合這些特點,在生理鹽條件下,M-SAN HQ的酶活是傳統(tǒng)全能核酸酶的5倍左右。因此,可以說M-SAN HQ是更適合生理鹽條件下的核酸酶。
ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?);立足北極海洋區(qū),致力于從海洋生物中識別新的冷適應(yīng)酶,用于分子研究、體外診斷和藥物領(lǐng)域。以其產(chǎn)品的獨特性質(zhì)及超過30年的生產(chǎn)經(jīng)驗積淀,ArcticZymes Technologies得到國際分子診斷及生物藥物領(lǐng)域客戶的肯定及大力支持,ArcticZymes產(chǎn)品線已用于診斷產(chǎn)品及生物藥物生產(chǎn)中。2005年,ArcticZymes在Olso證券交易所上市,并且持續(xù)得到挪威國家基金的支持。宿主細(xì)胞DNA主要以染色質(zhì)形態(tài)存在,其中組蛋白通過離子作用及疏水作用與DNA緊密結(jié)合;
一般來說,生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊商標(biāo))為主,能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀)的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen,通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍(<100mM鹽濃度),且酶活隨著鹽濃度上升而下降,在300mM鹽濃度時酶活幾乎喪失。對于細(xì)胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV,LV由于含有脂包膜結(jié)構(gòu)一般都在生理鹽條件下存在,而AAV在高鹽條件下不易團(tuán)聚、更穩(wěn)定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下,Benzonase活性受到抑制。上海中鹽核酸酶價格哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。福建ArcticZymes中鹽核酸酶
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在干細(xì)胞醫(yī)治領(lǐng)域, 某些疾病靠單純的細(xì)胞替代并不能取得滿意效果。利用逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒將外源目的基因整合到干細(xì)胞基因組,對基因功能缺失的遺傳病具有良好療效,但也存在一定致瘤風(fēng)險。相比之下,CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)能夠精確實現(xiàn)基因敲入、敲除及堿基修復(fù)。因此, 采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)對干細(xì)胞進(jìn)行基因改造,不僅能夠增加干細(xì)胞醫(yī)治的疾病范圍,也能更大程度地保證療效的安全性。目前,CRISPR/Cas9在干細(xì)胞醫(yī)治領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用,同時更多由CRISPR/Cas9編輯的干細(xì)胞藥物正在開發(fā)中。青海生理鹽條件中鹽核酸酶70950-202
跟其他類型的核酸酶一樣,SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多,分為可逆...
【詳情】ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核...
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【詳情】倫敦大學(xué)學(xué)院(UCL)的工藝開發(fā)團(tuán)隊,在細(xì)胞藥物Car-T涉及的慢病毒(Lentivirus,LV)...
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【詳情】細(xì)胞基因藥物的基因遞送有病毒及非病毒兩種方式,其中病毒遞送更為常用。在病毒遞送路徑中,腺相關(guān)病毒(A...
【詳情】市售的M-SAN HQ中鹽核酸酶有三個規(guī)格,分別是25kU、500kU及5MU,分別滿足研發(fā)初期及大...
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【詳情】經(jīng)過多年的經(jīng)驗積累及市場積淀,倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線,分別滿足體外診斷、organoid及干細(xì)...
【詳情】基因藥物常用的AAV載體有三種生產(chǎn)方法,分別是三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系、桿狀病毒表達(dá)載體體系和包裝細(xì)胞體系。其...
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