SANHQ(Bioprocessinggrade)是一種新型的、耐高鹽的工程化內(nèi)切酶。該酶在0.5MNaCl條件下具有良好活性，是大規(guī)模生產(chǎn)及生物工藝流程中去除核酸污染的理想選擇。鹽濃度是純化工藝的重要參數(shù)之一，高鹽濃度能夠減少聚集、增加目標(biāo)產(chǎn)物溶解度及提高目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量。高鹽濃度下，宿主DNA與蛋白質(zhì)能夠完全解離，從而更容易被降解。在藥物（如抗體、病毒載體藥物等）的生產(chǎn)及工藝流程中，核酸雜質(zhì)的去除至關(guān)重要。US FDA指南要求：zhiliao用重組生物制品終產(chǎn)品中，核酸雜質(zhì)含量低于100 pg/dose。SAN HQ獨(dú)特的耐高鹽特性、合規(guī)的生產(chǎn)體系標(biāo)準(zhǔn)，讓其成為大規(guī)模生產(chǎn)工藝中核酸處理的理想選擇。ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期，總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)。北京ArcticZymes高鹽核酸酶
AAV病毒滴度通常分為物理滴度和infection滴度。物理滴度一般是指基因組滴度或者衣殼滴度。在測(cè)定AAV的含量時(shí)，通常采用基因組滴度或者衣殼滴度作為單位，其中基因組滴度為攜帶基因組的AAV的濃度，衣殼滴度為AAV物理顆粒的濃度?；蚪M滴度一般采用qPCR、ddPCR、染料法、UV/Vis等方法來(lái)測(cè)定；衣殼滴度主要是通過(guò)ELISA、HPLC等方法來(lái)測(cè)定。AAV基因組滴度檢測(cè)的關(guān)鍵在于盡可能徹底去除AAV衣殼外的HCD殘留，減少污染核酸對(duì)qPCR或ddPCR的影響。經(jīng)典方法是加入常規(guī)核酸酶（如Dnase I、Benzonase等）消化AAV衣殼外的HCD殘留，然后加入Proteinase K破碎病毒衣殼，進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。經(jīng)過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，用SAN HQ高鹽核酸酶替代常規(guī)核酸酶處理AAV病毒，能夠更高效去除衣殼外的核酸殘留，qPCR或ddPCR結(jié)果重復(fù)性更高、更穩(wěn)定。湖北500mM鹽濃度條件高鹽核酸酶70921ArcticZymes致力于提供高質(zhì)量產(chǎn)品，具有好的批間一致性、穩(wěn)定可靠的質(zhì)量。
離子交換層析 (IEC) 是一種簡(jiǎn)單、通用且經(jīng)濟(jì)高效的技術(shù)，已成為許多載體純化的關(guān)鍵步驟。IEC分為陰離子/陽(yáng)離子交換柱，其中AEC（Anion-exchange chromatography）適用于AAV純化，是大規(guī)模AAV生產(chǎn)中去除空衣殼的主要手段。AAV衣殼亞種之間因表面電荷的差異導(dǎo)致不同的的等電點(diǎn)?？找職I在6.3左右，包裝了完整基因組DNA后的病毒顆粒PI大致為5.9。AAV與基質(zhì)之間的靜電相互作用正是取決于衣殼的等電點(diǎn)(pI)和緩沖液的pH值。基于這一原理在正電荷固定相上進(jìn)行樣品的分離純化，去除雜質(zhì)（如空衣殼和部分衣殼），并有效地回收目的載體。
在生物工藝流程中，需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染，而核酸酶作為外源成份，也需要在生產(chǎn)流程中去除。核酸酶去除工藝包括熱滅活法、酶抑制劑、離子交換和親合層析法等。AAV衣殼亞種之間因表面電荷的差異導(dǎo)致不同的的等電點(diǎn)，——空衣殼pI在6.3左右，包裝了完整基因組DNA后的病毒顆粒pI大致為5.9。而來(lái)自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右，SAN HQ高鹽核酸酶pI 9.6左右。因此，在同樣的條件下，從AAV溶液中去除SAN HQ高鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易、更徹底。SAN HQ高鹽核酸酶在高鹽濃度下活性更適，DNA去除效率更高。
已有文獻(xiàn)表明，高鹽濃度能夠破壞染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，讓核小體解聚。在能耐受高鹽條件的病毒載體（如AdV/AAV等）生產(chǎn)中，高鹽濃度使宿主細(xì)胞DNA（HCD）解聚，讓核酸片段暴露，提高了核酸片段的可及性。而ArcticZymes的SAN HQ高鹽核酸酶能夠在高鹽條件下更好發(fā)揮酶切活性，作為高鹽條件下去除HCD的更好選擇。SAN HQ高鹽核酸酶的出現(xiàn)，讓一些通過(guò)常規(guī)方法很難解決的工藝問(wèn)題得到高效解決，不僅提高了生產(chǎn)效率，降低了藥物生產(chǎn)成本，更拓寬了生物工藝生產(chǎn)的邊界。SAN HQ是生物工藝流程中去除核酸污染的理想選擇。上海進(jìn)口生物試劑高鹽核酸酶70921-150
無(wú)需為了保持高酶活而進(jìn)行脫鹽操作，簡(jiǎn)化工藝、節(jié)省時(shí)間；北京ArcticZymes高鹽核酸酶
宿主細(xì)胞DNA殘留的擔(dān)憂是基于致ai風(fēng)險(xiǎn)理論，特別是生產(chǎn)細(xì)胞系所包含的致ai序列，比如較常見(jiàn)腺病毒基因E1A和E1B（HEK293, PerC.6 和CAP 細(xì)胞系），人乳tou瘤病毒E6和E7基因（HeLa細(xì)胞系)等。當(dāng)使用致ai細(xì)胞系生產(chǎn)AAV時(shí)，下游純化須盡可能減少殘留DNA。工業(yè)上一般使用核酸酶分解殘留DNA，普遍認(rèn)為小于200 bp的DNA片段可有效降低致ai風(fēng)險(xiǎn)。宿主細(xì)胞蛋白殘留與免疫原性、炎癥或過(guò)敏性休克有關(guān)。盡管與非人類(lèi)的生產(chǎn)原料相比（非人類(lèi)細(xì)胞系如BHK21或昆蟲(chóng)細(xì)胞，以及輔助病毒如HSV、腺病毒、桿狀病毒），人類(lèi)細(xì)胞免疫原性比較弱。北京ArcticZymes高鹽核酸酶
基因藥物常用的AAV載體有三種生產(chǎn)方法，分別是三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系、桿狀病毒表達(dá)載體體系和包裝細(xì)胞體系。其...
【詳情】ArcticZymes Technologies提供獨(dú)特特性的鹽活性核酸酶（Salt Active ...
【詳情】SANHQ(生物工藝級(jí))是用Pichiapastoris表達(dá)的重組非特異性?xún)?nèi)切核酸酶，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)...
【詳情】已有文獻(xiàn)表明，高鹽濃度能夠破壞染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，讓核小體解聚。在能耐受高鹽條件的病毒載體（如AdV/AAV...
【詳情】經(jīng)過(guò)多年的經(jīng)驗(yàn)積累及市場(chǎng)積淀，倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線，分別滿(mǎn)足體外診斷、organoid及干細(xì)...
【詳情】ArcticZymes Technologies產(chǎn)品大都來(lái)源于深海microbes中，具有一些共同的...
【詳情】一個(gè)美國(guó)客戶(hù)做了對(duì)照實(shí)驗(yàn)，比較Benzonase和SAN HQ高鹽核酸酶純化病毒載體的效率。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)...
【詳情】ArcticZymes廠家對(duì)鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品（Salt Active Nucleases，SAN...
【詳情】ArcticZymes Technologies于2017年推出了SAN HQ高鹽核酸酶及其對(duì)應(yīng)的S...
【詳情】核酸酶活性受到很多因素影響，如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此，不同客戶(hù)、不同項(xiàng)目中核酸酶的使用條件...
【詳情】通過(guò)三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系生產(chǎn)病毒載體，會(huì)引入宿主細(xì)胞DNA殘留（HCD）、蛋白殘留（HCP）、工藝雜質(zhì)（如...
【詳情】ArcticZymes廠家對(duì)鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品（Salt Active Nucleases，SAN...
【詳情】
