紡錘體觀測儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道，成熟的卵母細(xì)胞含有1個極體，也就是***極體。IVF加入精子后，精子會穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子，隨著時間的推移，～6小時后卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極，進(jìn)而排出第二極體，再往后大約加精后9～16小時，雌雄原核會出現(xiàn)，而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對于那些沒有受精的卵子，到了原核出現(xiàn)的時間窗發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補(bǔ)救ICSI，往往錯過了卵子的比較好受精時間，因為沒有受精的卵子會在體外老化，即使受精，胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以，我們在加精后的4～6小時，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化。當(dāng)然，偶爾也會出現(xiàn)錯誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救，實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目，82.7%含有一個紡錘體，17.3%含有兩個紡錘體，并對含有一個紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI；而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體，只對未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率。紡錘體的微管通過動態(tài)不穩(wěn)定性來不斷增長和縮短，從而牽引染色體運(yùn)動。上海紡錘體實時成像紡錘體廠家

Oosight影像分析系統(tǒng)采用液晶偏光成像技術(shù)，無需對卵母細(xì)胞進(jìn)行染色，即可實時、清晰、高對比度地進(jìn)行紡錘體結(jié)構(gòu)和透明帶成像，對ICSI、核移植操作、卵母細(xì)胞質(zhì)量評價等有很好的輔助作用。主要應(yīng)用ICSI：在單精胞漿注射過程中定位初級卵母細(xì)胞，避免卵的破裂損傷，增強(qiáng)胚胎的發(fā)育潛能。卵評估：利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進(jìn)行分級，改善對胚胎的選擇。體外成熟評估：在未成熟卵催化（IVM）過程判斷成熟期，判斷依據(jù)采用的是準(zhǔn)確的識別紡錘體，而非不準(zhǔn)確的極體。質(zhì)量控制：利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進(jìn)行分級，改善對胚胎的選擇。核移植：顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質(zhì)，使得核移植的成功率增加了80%，并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究：對冷凍的初級卵母細(xì)胞進(jìn)行解凍前和解凍后的定量分析，從而判斷卵的發(fā)育力，改善妊娠率。紡錘體研究：檢測胚胎中紡錘體的發(fā)育過程，確定正常和非正常分裂率（只可用于搭配有培養(yǎng)箱的顯微鏡）。可以對染色體非正常的或非整倍體的胚胎成像，從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究：測量卵母細(xì)胞的透明帶；準(zhǔn)確測量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化，判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態(tài)北京克隆紡錘體紡錘體的一端連接著染色體，另一端則錨定在細(xì)胞兩極。

紡錘體是如何形成的(1)紡錘體是動植物細(xì)胞分裂期形成的與染色體正常分離直接相關(guān)的分裂器，紡錘體的裝配在有絲分裂的前期完成。動物細(xì)胞紡錘體由星體微管、極間微管、動粒微管及其結(jié)合蛋白構(gòu)成，因含有星體微管故稱有星紡錘體。無中心體的動物細(xì)胞和植物細(xì)胞也能形成紡錘體，因不含有星體微管而稱之為無星紡錘體。微管是由α、β微管蛋白異源二聚體及少量微管結(jié)合蛋白聚合而成的亞穩(wěn)定動態(tài)結(jié)構(gòu)。動物細(xì)胞的中心體由一對相互垂直的圓筒狀中心粒及中心體基質(zhì)構(gòu)成。它是紡錘體微管向外生長的**，又稱微管組織中心。在有絲分裂前間期的S期初期，中心體開始復(fù)制倍增，在G2期結(jié)束時完成。在細(xì)胞分裂期前期，間期復(fù)制倍增的兩個中心體分離，每一個中心體形成放射狀排列的微管，稱為星體，每個中心體是它自身星體的**。在有絲分裂細(xì)胞周期的分裂期，微管通過持續(xù)增加和丟失組成微管的微管蛋白亞基來實現(xiàn)微管的聚合和解聚，微管始終處于生長和縮短的更替中。在分裂前期，紡錘體微管由游離的微管蛋白組裝而成，介導(dǎo)染色體的運(yùn)動；分裂末期，紡錘體微管解聚，又組裝形成細(xì)胞質(zhì)微管網(wǎng)絡(luò)。紡錘體微管包括動粒微管、極間微管和星體微管.

如何觀察紡錘體呢？在普通光學(xué)顯微鏡下，人類卵母細(xì)胞是半透明的，無法對紡錘體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察和分析。傳統(tǒng)方法是用一種特異的DNA熒光染料對卵母細(xì)胞染色，在紫外光下可顯示紡錘體，這種免疫熒光方法對卵母細(xì)胞有損傷，不能應(yīng)用于臨床。為了更好的觀測紡錘體，美國海洋生物學(xué)實驗室的R．Oldenbourg等利用紡錘體的雙折射特性，開發(fā)出偏振光顯微鏡。現(xiàn)今，偏振光顯微鏡已經(jīng)發(fā)展成為一種無創(chuàng)性的觀察和分析紡錘體動態(tài)結(jié)構(gòu)的顯微觀測系統(tǒng)，我們也叫它紡錘體觀測儀。它不僅能對雙折射性紡錘體信號的有無進(jìn)行定性分析，還能對信號的強(qiáng)弱進(jìn)行定量分析。紡錘體的異?？赡軐?dǎo)致細(xì)胞分裂過程中的停滯或凋亡。

微管蛋白的突變會影響微管的聚合和解聚，導(dǎo)致紡錘體結(jié)構(gòu)異常。例如，某些疾病中，微管蛋白的突變會導(dǎo)致紡錘體功能障礙，增加染色體非整倍性的風(fēng)險。動粒與微管結(jié)合能力下降：動粒是染色體與紡錘體微管連接的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，其功能障礙會影響染色體的正確捕捉和分離。例如，某些基因突變（如BUBR1突變）會影響動粒的功能，導(dǎo)致染色體分離錯誤。動粒通過信號傳導(dǎo)途徑與紡錘體檢查點相互作用，確保染色體的正確分離。動粒信號傳導(dǎo)異常會導(dǎo)致紡錘體檢查點失效，增加染色體非整倍性的風(fēng)險。紡錘體微管的動態(tài)變化是細(xì)胞對外界刺激響應(yīng)的一部分。香港ICSI紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)

紡錘體微管的排列和穩(wěn)定性受到細(xì)胞骨架的支撐。上海紡錘體實時成像紡錘體廠家

解凍后的卵母細(xì)胞在無損觀察技術(shù)的支持下，可以直接進(jìn)行紡錘體觀察，無需進(jìn)行任何形式的固定和染色處理。這一技術(shù)能夠迅速評估解凍后卵母細(xì)胞的質(zhì)量，包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo)，為后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育提供重要參考。無損觀察紡錘體技術(shù)已逐步應(yīng)用于臨床輔助生殖技術(shù)中。醫(yī)生可以在不破壞卵母細(xì)胞活性的情況下，通過該技術(shù)評估其質(zhì)量并選擇合適的卵母細(xì)胞進(jìn)行受精和胚胎移植。這不僅提高了妊娠率和胚胎質(zhì)量，還減少了因卵母細(xì)胞質(zhì)量不佳而導(dǎo)致的移植失敗和流產(chǎn)風(fēng)險。上海紡錘體實時成像紡錘體廠家