紡錘體觀測儀使ICSI更加安全可靠在進行單精子卵胞漿內(nèi)注射（ICSI）授精時，**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細胞時，通常認為，卵母細胞紡錘**于***極體附近，故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動卵母細胞使其***極**于6點或12點處，然后在3點處注入精子。但是，在大量使用紡錘體觀測儀后發(fā)現(xiàn)，***極體并不能很好地預(yù)測紡錘體的位置。一項研究提示，在ICSI后，用紡錘體觀測儀觀察紡錘體與***極體的夾角，結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動，或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變，普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇，可能會損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過紡錘體觀測儀，可以精確地對卵母細胞中紡錘體的位置進行定位，從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體，使ICSI更加安全可靠。有文獻報道，在進行ICSI時，觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，有些卵母細胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的，但在紡錘體觀測儀這個“照妖鏡”下，就能顯出原形，表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體，這類卵母細胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。紡錘體在細胞分裂中的精確調(diào)控是生物體維持遺傳穩(wěn)定性的關(guān)鍵。美國ICSI紡錘體改善分級

卵母細胞的冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點之一，特別是針對不同成熟階段的卵母細胞，如MI期卵母細胞的冷凍保存。MI期卵母細胞具有獨特的生物學(xué)特性和發(fā)育潛能，其紡錘體的穩(wěn)定性和形態(tài)對于后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育至關(guān)重要。因此，針對MI期紡錘體卵冷凍的研究不僅具有理論價值，更具有重要的臨床應(yīng)用前景。MI期卵母細胞的紡錘體由微管組成，這些微管結(jié)構(gòu)精細且脆弱，容易受到冷凍過程中溫度變化和滲透壓變化的影響而發(fā)生損傷。紡錘體的損傷不僅會影響卵母細胞的正常發(fā)育，還可能導(dǎo)致受精失敗或胚胎發(fā)育異常。昆明Hamilton Thorne紡錘體Oosight Basic紡錘體在細胞分裂中的穩(wěn)定性對于細胞存活至關(guān)重要。

紡錘體成像技術(shù)的中心在于提高成像的分辨率和速度，以捕捉紡錘體的精細結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化。以下是幾種主要的紡錘體成像技術(shù)的技術(shù)原理：結(jié)構(gòu)光照明顯微鏡（SIM）：SIM通過引入已知的空間調(diào)制光場，使樣品發(fā)出具有特定空間頻率的熒光信號。通過采集多個不同空間頻率的熒光圖像，并利用算法進行重建，SIM可以實現(xiàn)超越傳統(tǒng)熒光顯微鏡分辨率的成像。這種方法不僅提高了成像的分辨率，還保持了較快的成像速度和較好的細胞活性。受激輻射損耗顯微鏡（STED）：STED利用一束聚焦的激光束（稱為STED束）來抑制樣品中特定區(qū)域的熒光信號。通過精確控制STED束的位置和強度，STED可以實現(xiàn)超越衍射極限的成像分辨率。這種方法特別適用于觀測紡錘體等復(fù)雜結(jié)構(gòu)中的精細細節(jié)。單分子定位顯微鏡（SMLM）：SMLM通過檢測樣品中單個熒光分子的位置來實現(xiàn)高分辨率成像。由于熒光分子的隨機閃爍特性，SMLM可以在時間域上分離不同分子的熒光信號，從而實現(xiàn)對單個分子的精確定位。這種方法不僅提高了成像的分辨率，還提供了對紡錘體中單個微管和蛋白質(zhì)分子的動態(tài)變化的觀測能力。

紡錘體，顧名思義，其形狀類似于紡織用的紡錘，是在細胞分裂前初期到末期形成的一種特殊細胞器。它的主要元件包括微管、附著微管的動力分子分子馬達，以及一系列復(fù)雜的超分子結(jié)構(gòu)。微管是紡錘體的基礎(chǔ)骨架，由αβ-微管蛋白二聚體組成，這些微管相互交錯，形成紡錘狀結(jié)構(gòu)，將染色體緊密地聯(lián)系在一起。在動物細胞中，紡錘體的形成和組裝通常由中心體引導(dǎo)和控制。中心體是一個位于細胞質(zhì)中的復(fù)合體，由兩個中心粒嵌套在被稱為pericentriolarmaterial（PCM）的區(qū)域內(nèi)組成。PCM富含微管相關(guān)蛋白和其他蛋白質(zhì)，如谷氨酸脫羧酶等微管主要蛋白，這些蛋白質(zhì)共同協(xié)作，確保紡錘體的正確組裝和穩(wěn)定。相比之下，高等植物細胞的紡錘體并不包含中心體，而是由細胞極板附近的微管組織形成。紡錘體的功能異常與某些藥物的副作用有關(guān)，如化療藥物可能干擾紡錘體的形成和功能。

染色體當細胞從間期進入有絲分裂期，間期細胞微管網(wǎng)絡(luò)解聚為游離的αβ-微管蛋白二聚體，再重組成紡錘體，介導(dǎo)染色體的運動；分裂末期紡錘體微管解聚，又重組形成細胞質(zhì)微管網(wǎng)絡(luò)?？煞譃椋簞恿Ｎ⒐埽哼B接染色體動粒于兩極的微管。極間微管：從兩極發(fā)出，在紡錘體中部赤道區(qū)相互交錯的微管。星體微管：中心體周圍呈輻射分布的微管。染色體的運動依賴紡錘體微管的組裝和去組裝。在這一過程中動粒微管與動粒之間的滑動主要是依靠結(jié)合在動粒部位的驅(qū)動蛋白和動力蛋白沿微管的運動來完成。極微管在紡錘體中部交錯，有些分布在極微管之間特殊的雙極馬達蛋白，其中2個馬達蛋白沿一條微管運動，另2個馬達結(jié)構(gòu)域沿另一條微管運動。由于2條微管分別來自二極，故極性相反。當雙極驅(qū)動蛋白四聚體沿微管向正極運動時，紡錘體二極間距離延長。反之紡錘體距離縮短。紡錘體在細胞分裂過程中經(jīng)歷明顯的形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。美國雙折射性紡錘體液晶偏光補償器

紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的動態(tài)變化揭示了細胞分裂過程中分子層面的奧秘。美國ICSI紡錘體改善分級

選擇合適的冷凍保護劑是減少冷凍損傷的關(guān)鍵。然而，不同濃度的冷凍保護劑對MI期卵母細胞紡錘體的影響各異，需要通過大量實驗進行優(yōu)化。此外，冷凍保護劑的滲透性和毒性也是需要考慮的因素。冷凍和解凍過程中的溫度控制、時間控制以及操作手法等都會對MI期卵母細胞的紡錘體造成影響。因此，需要不斷優(yōu)化冷凍和解凍程序，以減少對紡錘體的損傷。近年來，研究者們通過不斷嘗試和優(yōu)化冷凍保護劑的配方，取得了進展。例如，一些研究表明，使用高濃度的蔗糖作為冷凍保護劑可以提高MI期卵母細胞的存活率和紡錘體穩(wěn)定性。此外，還有一些新型冷凍保護劑如乙二醇、丙二醇等也被應(yīng)用于MI期卵母細胞的冷凍保存中。美國ICSI紡錘體改善分級