紡錘體觀測儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道，成熟的卵母細(xì)胞排出***極體。IVF加入精子后，精子會(huì)穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子，隨著時(shí)間的推移，卵子的紡錘體會(huì)將染色單體拉向兩極，進(jìn)而排出第二極體，再往后大約加精后9-16小時(shí)，雌雄原核會(huì)出現(xiàn)，而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對于那些沒有受精的卵子，到了原核出現(xiàn)的時(shí)間窗，發(fā)現(xiàn)沒有受精時(shí)再去補(bǔ)救ICSI，往往錯(cuò)過了卵子的比較好受精時(shí)間，因?yàn)闆]有受精的卵子會(huì)在體外老化，即使受精，胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以，我們在加精后的4-6小時(shí)，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化。當(dāng)然，偶爾也會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報(bào)道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行ICSI補(bǔ)救，實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計(jì)紡錘體的數(shù)目，82.7%含有一個(gè)紡錘體，17.3%含有兩個(gè)紡錘體，并對含有一個(gè)紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI；而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體，只對未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率。紡錘體的異常也是疾病發(fā)生和發(fā)展的一個(gè)重要因素。美國哺乳動(dòng)物紡錘體加熱臺(tái)

    微管蛋白的突變和異常磷酸化是導(dǎo)致紡錘體功能障礙的主要原因之一。微管蛋白是構(gòu)成微管的基本單元，其穩(wěn)定性和功能對于紡錘體的組裝和染色體的分離至關(guān)重要。微管蛋白的突變和異常磷酸化會(huì)影響微管的動(dòng)態(tài)平衡，導(dǎo)致紡錘體的組裝異常和染色體分離錯(cuò)誤。紡錘體功能障礙會(huì)導(dǎo)致染色體不穩(wěn)定，增加基因組的不穩(wěn)定性。染色體不穩(wěn)定會(huì)影響基因的表達(dá)和功能，導(dǎo)致細(xì)胞周期紊亂和細(xì)胞凋亡。在神經(jīng)退行性疾病中，染色體不穩(wěn)定會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元的基因表達(dá)異常，進(jìn)一步加劇神經(jīng)元的損傷和死亡。 上海紡錘體實(shí)時(shí)成像紡錘體胚胎發(fā)育紡錘體微管的正極朝向細(xì)胞兩極，負(fù)極則靠近染色體。

近年來，隨著玻璃化冷凍技術(shù)的不斷發(fā)展，成熟卵母細(xì)胞紡錘體的冷凍保存研究取得了進(jìn)展。研究表明，采用玻璃化冷凍法冷凍保存的成熟卵母細(xì)胞，在解凍后其紡錘體和染色體的形態(tài)及功能均能得到較好的保持。這主要得益于玻璃化冷凍過程中避免了冰晶形成對細(xì)胞的損傷，以及冷凍保護(hù)劑對細(xì)胞的有效保護(hù)。然而，值得注意的是，盡管玻璃化冷凍法在提高解凍存活率和妊娠成功率方面取得了成效，但仍存在一些問題。例如，冷凍過程中紡錘體的微管結(jié)構(gòu)可能受到低溫的影響而發(fā)生解聚，導(dǎo)致染色體分離異常。此外，冷凍保護(hù)劑的毒性也可能對卵母細(xì)胞造成一定的損傷。為了克服這些問題，研究者們進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)和優(yōu)化工作。例如，通過改進(jìn)冷凍保護(hù)劑的配方和濃度，降低其對細(xì)胞的毒性；通過優(yōu)化冷凍速率和程序，減少冷凍過程中對細(xì)胞的機(jī)械損傷；以及通過篩選和評估不同冷凍載體和保存時(shí)間對卵母細(xì)胞冷凍效果的影響，尋找好的冷凍保存條件。

卵母細(xì)胞冷凍保存主要采用兩種方法：慢速冷凍法和玻璃化冷凍法。相較于傳統(tǒng)的慢速冷凍法，玻璃化冷凍法因其更高的解凍存活率和妊娠成功率而逐漸成為主流技術(shù)。玻璃化冷凍法的基本原理是將含有生物樣本的溶液在極短的時(shí)間內(nèi)（如幾分鐘內(nèi)）冷卻至液氮溫度，使溶液在凝固點(diǎn)以下形成無冰晶的半固體或固體狀態(tài)。這種方法避免了冰晶形成對細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞，從而減少了冷凍損傷。在卵母細(xì)胞冷凍保存中，玻璃化冷凍法通過優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的濃度和冷凍速率，使卵母細(xì)胞在冷凍過程中保持其結(jié)構(gòu)的完整性。紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜性確保了細(xì)胞分裂的精確性和高效性。

    阿爾茨海默病患者中，微管蛋白（如tau蛋白）的突變和異常磷酸化會(huì)影響微管的穩(wěn)定性和紡錘體的組裝，導(dǎo)致染色體分離異常和細(xì)胞周期紊亂。紡錘體功能障礙會(huì)導(dǎo)致染色體不穩(wěn)定，增加基因組的不穩(wěn)定性，進(jìn)而影響神經(jīng)元的正常功能和存活。正常情況下，成熟的神經(jīng)元處于G0期，不會(huì)重新進(jìn)入細(xì)胞周期。然而，阿爾茨海默病患者中，神經(jīng)元可能會(huì)重新進(jìn)入細(xì)胞周期，但由于紡錘體功能障礙，無法完成正常的細(xì)胞分裂，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。在神經(jīng)元中，紡錘體的正常功能對于神經(jīng)元的發(fā)育、分化和維持至關(guān)重要。 紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的動(dòng)態(tài)變化揭示了細(xì)胞分裂過程中分子層面的奧秘。北京哺乳動(dòng)物紡錘體胚胎植入

紡錘體在細(xì)胞分裂中的精確調(diào)控是生物體維持遺傳穩(wěn)定性的關(guān)鍵。美國哺乳動(dòng)物紡錘體加熱臺(tái)

為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷，研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細(xì)胞骨架保護(hù)劑，如紫杉醇（Taxol）。紫杉醇能夠穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu)，防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術(shù)，研究者可以實(shí)時(shí)監(jiān)測紫杉醇對紡錘體的保護(hù)效果，評估其在冷凍保存過程中的作用機(jī)制。此外，還可以進(jìn)一步觀察解凍后卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能，為臨床應(yīng)用提供可靠依據(jù)。無需對細(xì)胞進(jìn)行固定和染色，保持細(xì)胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測紡錘體的形態(tài)變化，評估冷凍效果。能夠捕捉到細(xì)微的紡錘體形態(tài)變化，提高評估的準(zhǔn)確性。美國哺乳動(dòng)物紡錘體加熱臺(tái)