秋水仙素為什么會(huì)使有絲分裂的細(xì)胞停滯于中期

如果用秋水仙素處理有絲分裂的細(xì)胞，紡錘體會(huì)迅速消失，細(xì)胞停滯在有絲分裂中期，染色體無(wú)法分離成兩組。用秋水仙堿進(jìn)行誘導(dǎo)，從而將細(xì)胞阻斷在細(xì)胞分裂中期，也是誘導(dǎo)細(xì)胞周期同步化的重要方法之一。真核細(xì)胞周期可分為4個(gè)時(shí)期，分別是G1期、S期、G2期和M期。在細(xì)胞周期調(diào)控中主要有3個(gè)控制點(diǎn)，***個(gè)控制點(diǎn)在G1期，決定細(xì)胞能否進(jìn)入S期；第二個(gè)控制點(diǎn)在G2期，決定細(xì)胞能否進(jìn)入有絲分裂期；第三個(gè)控制點(diǎn)在M期，決定細(xì)胞是否已經(jīng)準(zhǔn)備好將復(fù)制好的染色體拉向兩極。CDK（周期蛋白依賴性蛋白激酶）對(duì)細(xì)胞周期運(yùn)行起著**性調(diào)控作用，CDK與不同時(shí)期的周期蛋白結(jié)合會(huì)在特定周期起調(diào)節(jié)作用。cyclinA、cyclinB是在M期起調(diào)節(jié)功能的兩種主要周期蛋白。細(xì)胞周期運(yùn)轉(zhuǎn)到分裂中期后，在后期促進(jìn)復(fù)合物(APC)的作用下，M期cyclinA和cyclinB通過(guò)泛素化途徑迅速降解，Cdkl活性喪失，細(xì)胞周期便從M期中期向后期轉(zhuǎn)化。APC活性變化是細(xì)胞周期由分裂中期向后期轉(zhuǎn)換的關(guān)鍵因素，其活性受到多種因素的綜合調(diào)節(jié)，紡錘體組裝檢查點(diǎn)是其重要的調(diào)控因素。紡錘體組裝不完全，或所有動(dòng)粒不能被動(dòng)粒微管全部捕捉，則APC不能被***。 紡錘體在細(xì)胞分裂過(guò)程中經(jīng)歷明顯的形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。深圳卵母細(xì)胞紡錘體提高冷凍保存效率

紡錘體觀測(cè)儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用

我們知道，成熟的卵母細(xì)胞排出***極體。IVF加入精子后，精子會(huì)穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子，隨著時(shí)間的推移，卵子的紡錘體會(huì)將染色單體拉向兩極，進(jìn)而排出第二極體，再往后大約加精后9-16小時(shí)，雌雄原核會(huì)出現(xiàn)，而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對(duì)于那些沒(méi)有受精的卵子，到了原核出現(xiàn)的時(shí)間窗，發(fā)現(xiàn)沒(méi)有受精時(shí)再去補(bǔ)救ICSI，往往錯(cuò)過(guò)了卵子的比較好受精時(shí)間，因?yàn)闆](méi)有受精的卵子會(huì)在體外老化，即使受精，胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以，我們?cè)诩泳蟮?-6小時(shí)，通過(guò)觀察第二極體的排出來(lái)初步判斷是否受精，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化。

當(dāng)然，偶爾也會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行ICSI補(bǔ)救，實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測(cè)儀觀察并統(tǒng)計(jì)紡錘體的數(shù)目，82.7%含有一個(gè)紡錘體，17.3%含有兩個(gè)紡錘體，并對(duì)含有一個(gè)紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI；而對(duì)照組并未用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體，只對(duì)未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率。 北京Hamilton Thorne紡錘體Oosight Basic紡錘體微管與細(xì)胞內(nèi)的其他細(xì)胞器存在復(fù)雜的相互作用。

染色體

      當(dāng)細(xì)胞從間期進(jìn)入有絲分裂期，間期細(xì)胞微管網(wǎng)絡(luò)解聚為游離的αβ-微管蛋白二聚體，再重組成紡錘體，介導(dǎo)染色體的運(yùn)動(dòng)；分裂末期紡錘體微管解聚，又重組形成細(xì)胞質(zhì)微管網(wǎng)絡(luò)。

      可分為：動(dòng)粒微管：連接染色體動(dòng)粒于兩極的微管。

      極間微管：從兩極發(fā)出，在紡錘體中部赤道區(qū)相互交錯(cuò)的微管。

      星體微管：中心體周?chē)瘦椛浞植嫉奈⒐堋?

      染色體的運(yùn)動(dòng)依賴紡錘體微管的組裝和去組裝。在這一過(guò)程中動(dòng)粒微管與動(dòng)粒之間的滑動(dòng)主要是依靠結(jié)合在動(dòng)粒部位的驅(qū)動(dòng)蛋白和動(dòng)力蛋白沿微管的運(yùn)動(dòng)來(lái)完成。極微管在紡錘體中部交錯(cuò)，有些分布在極微管之間特殊的雙極馬達(dá)蛋白，其中2個(gè)馬達(dá)蛋白沿一條微管運(yùn)動(dòng)，另2個(gè)馬達(dá)結(jié)構(gòu)域沿另一條微管運(yùn)動(dòng)。由于2條微管分別來(lái)自二極，故極性相反。當(dāng)雙極驅(qū)動(dòng)蛋白四聚體沿微管向正極運(yùn)動(dòng)時(shí)，紡錘體二極間距離延長(zhǎng)。反之紡錘體距離縮短。

紡錘體是卵母細(xì)胞在減數(shù)分裂過(guò)程中形成的一種微管結(jié)構(gòu)，負(fù)責(zé)精確分離染色體。然而，紡錘體對(duì)環(huán)境溫度、滲透壓等外部條件極為敏感，在冷凍保存過(guò)程中容易發(fā)生損傷，導(dǎo)致染色體分離異常，進(jìn)而影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。因此，如何有效監(jiān)測(cè)和評(píng)估冷凍過(guò)程中紡錘體的變化，成為紡錘體卵冷凍研究的重要課題。紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)的出現(xiàn)，為這一問(wèn)題的解決提供了可能。紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)主要利用高分辨率顯微鏡結(jié)合熒光標(biāo)記技術(shù)，對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)的觀察和記錄。常用的熒光標(biāo)記方法包括使用綠色熒光蛋白（GFP）標(biāo)記微管蛋白，以及利用特定抗體對(duì)紡錘體相關(guān)蛋白進(jìn)行染色。通過(guò)這些方法，研究者可以清晰地觀察到紡錘體的形態(tài)、位置、動(dòng)態(tài)變化等信息，從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍過(guò)程中紡錘體的穩(wěn)定性和完整性。紡錘體微管的微妙調(diào)整，確保了遺傳信息在細(xì)胞分裂中的準(zhǔn)確無(wú)誤傳遞。

紡錘體的雙極化是卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過(guò)程中的關(guān)鍵事件之一。近年來(lái)，我國(guó)學(xué)者在人類卵母細(xì)胞紡錘體雙極化機(jī)制研究方面取得了重要進(jìn)展。通過(guò)高分辨成像技術(shù)，研究者們揭示了人類卵母細(xì)胞紡錘體雙極化的獨(dú)特機(jī)制，并發(fā)現(xiàn)了調(diào)控此過(guò)程的關(guān)鍵蛋白。這些研究成果不僅為雙折射性紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角和思路，也為臨床生殖障礙疾病的診療提供了科學(xué)依據(jù)。隨著偏光成像技術(shù)和冷凍保護(hù)劑研究的不斷深入，未來(lái)有望開(kāi)發(fā)出更加高效、安全的卵母細(xì)胞冷凍保存方案。例如，通過(guò)改進(jìn)冷凍速率和程序、優(yōu)化保護(hù)劑配方等手段，進(jìn)一步減輕冷凍損傷，提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能。紡錘體在細(xì)胞分裂中的精確調(diào)控是生物體維持遺傳穩(wěn)定性的關(guān)鍵。深圳哺乳動(dòng)物紡錘體廠家

紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化受到細(xì)胞周期蛋白的調(diào)控。深圳卵母細(xì)胞紡錘體提高冷凍保存效率

在卵母細(xì)胞冷凍保存過(guò)程中，紡錘體的形態(tài)變化是評(píng)估冷凍效果的重要指標(biāo)之一。傳統(tǒng)的紡錘體觀察方法往往需要將卵母細(xì)胞固定并進(jìn)行免疫熒光染色，這不僅破壞了細(xì)胞的活性，還限制了進(jìn)一步觀察其發(fā)育潛能的機(jī)會(huì)。而偏光成像技術(shù)則能夠在不解凍、不染色的情況下，直接觀察紡錘體的形態(tài)變化。通過(guò)Polscope系統(tǒng)，研究者可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化，評(píng)估冷凍保護(hù)劑對(duì)紡錘體的保護(hù)效果，以及解凍后紡錘體的恢復(fù)情況。冷凍后的卵母細(xì)胞紡錘體及染色體異常率增高，這將直接影響解凍后卵母細(xì)胞的減數(shù)分裂進(jìn)程和胚胎的染色體正常性。利用偏光成像技術(shù)，研究者可以準(zhǔn)確評(píng)估冷凍前后紡錘體的異常率，包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等參數(shù)。通過(guò)對(duì)比分析，可以明確冷凍過(guò)程對(duì)紡錘體的具體影響，為優(yōu)化冷凍保存條件提供科學(xué)依據(jù)。深圳卵母細(xì)胞紡錘體提高冷凍保存效率