卵母細(xì)胞紡錘體對低溫環(huán)境極為敏感，冷凍過程中可能發(fā)生的冰晶形成、溶液濃縮等物理化學(xué)變化均會對紡錘體造成損傷，導(dǎo)致其形態(tài)異常、穩(wěn)定性下降。在冷凍和解凍過程中，紡錘體微管可能發(fā)生解聚和重聚，這一過程不僅影響紡錘體的形態(tài)，還可能破壞其內(nèi)部結(jié)構(gòu)和功能，進(jìn)而影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能。為了減輕冷凍損傷，研究者們嘗試在冷凍液中添加細(xì)胞骨架保護(hù)劑，如紫杉醇等。然而，保護(hù)劑的選擇、濃度及作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究和優(yōu)化。紡錘體，作為細(xì)胞分裂的“引擎”，驅(qū)動著生命的延續(xù)與多樣性。香港MII期紡錘體加熱臺

秋水仙素為什么會使有絲分裂的細(xì)胞停滯于中期

如果用秋水仙素處理有絲分裂的細(xì)胞，紡錘體會迅速消失，細(xì)胞停滯在有絲分裂中期，染色體無法分離成兩組。用秋水仙堿進(jìn)行誘導(dǎo)，從而將細(xì)胞阻斷在細(xì)胞分裂中期，也是誘導(dǎo)細(xì)胞周期同步化的重要方法之一。真核細(xì)胞周期可分為4個(gè)時(shí)期，分別是G1期、S期、G2期和M期。在細(xì)胞周期調(diào)控中主要有3個(gè)控制點(diǎn)，***個(gè)控制點(diǎn)在G1期，決定細(xì)胞能否進(jìn)入S期；第二個(gè)控制點(diǎn)在G2期，決定細(xì)胞能否進(jìn)入有絲分裂期；第三個(gè)控制點(diǎn)在M期，決定細(xì)胞是否已經(jīng)準(zhǔn)備好將復(fù)制好的染色體拉向兩極。CDK（周期蛋白依賴性蛋白激酶）對細(xì)胞周期運(yùn)行起著**性調(diào)控作用，CDK與不同時(shí)期的周期蛋白結(jié)合會在特定周期起調(diào)節(jié)作用。cyclinA、cyclinB是在M期起調(diào)節(jié)功能的兩種主要周期蛋白。細(xì)胞周期運(yùn)轉(zhuǎn)到分裂中期后，在后期促進(jìn)復(fù)合物(APC)的作用下，M期cyclinA和cyclinB通過泛素化途徑迅速降解，Cdkl活性喪失，細(xì)胞周期便從M期中期向后期轉(zhuǎn)化。APC活性變化是細(xì)胞周期由分裂中期向后期轉(zhuǎn)換的關(guān)鍵因素，其活性受到多種因素的綜合調(diào)節(jié)，紡錘體組裝檢查點(diǎn)是其重要的調(diào)控因素。紡錘體組裝不完全，或所有動粒不能被動粒微管全部捕捉，則APC不能被***。 卵母細(xì)胞紡錘體改善分級紡錘體在細(xì)胞分裂完成后迅速解體，為細(xì)胞質(zhì)分裂提供空間。

玻璃化冷凍技術(shù)因其快速冷凍和解凍的特點(diǎn)，在哺乳動物紡錘體卵冷凍保存中展現(xiàn)出巨大優(yōu)勢。該技術(shù)通過極快的降溫速率和高濃度的冷凍保護(hù)劑，使細(xì)胞內(nèi)溶液在冷凍過程中呈玻璃態(tài)而非結(jié)晶態(tài)，從而避免了冰晶對紡錘體的損傷。此外，研究者們還嘗試將微流控技術(shù)、激光輔助冷凍等新技術(shù)應(yīng)用于卵母細(xì)胞的冷凍保存中，以進(jìn)一步提高冷凍效果。為了準(zhǔn)確評估冷凍對紡錘體的影響，研究者們開發(fā)了多種紡錘體穩(wěn)定性評估技術(shù)。例如，通過偏光顯微鏡觀察紡錘體的形態(tài)變化；利用免疫熒光染色技術(shù)檢測紡錘體相關(guān)蛋白的分布和表達(dá)；以及通過分子生物學(xué)方法檢測紡錘體相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平等。這些技術(shù)的應(yīng)用為深入研究冷凍過程中紡錘體的變化提供了有力支持。

紡錘體是如何形成的（2）

       動粒微管連接染色體動粒與位于兩極的中心體。在有絲分裂前期，一旦核被膜解聚，由相反兩個(gè)方向的中心體伸出的動粒微管就會隨機(jī)地與染色體上的動粒結(jié)合而俘獲染色體，微管**終附著在動粒上，動粒微管把染色體和紡錘體連接在一起。在細(xì)胞分裂期的后期，分開后的染色單體被拉向兩極。染色體移動由兩個(gè)相互獨(dú)立且同步進(jìn)行的過程所介導(dǎo)，分別為過程A和過程B。在過程A中，在連接微管和動粒的馬達(dá)蛋白的作用下，動粒微管解聚縮短，在動粒處產(chǎn)生的拉力使染色體移向兩極。極間微管是從一個(gè)中心體伸出的某些微管與從另一個(gè)中心體伸出的微管相互作用，阻止了它們的解聚，從而使微管結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定，兩套微管的這種結(jié)合形成了有絲分裂紡錘體的基本框架，具有典型的兩極形態(tài)，產(chǎn)生這些微管的兩個(gè)中心體稱為紡錘極，這些相互作用的微管被稱為極間微管。在有絲分裂后期過程B中，極間微管的伸長和相互間的滑行使紡錘極向兩極方向移動。星體微管從中心體向周圍呈輻射狀分布，在有絲分裂后期過程B中，每一紡錘極上向外伸展的星體微管發(fā)出向外的力，拉動兩個(gè)紡錘極向兩極方向移動。

     紡錘體在細(xì)胞分裂過程中與細(xì)胞骨架協(xié)同工作。

液晶偏振光顯微鏡是一種將液晶可變減速器、電子成像及數(shù)碼成像技術(shù)結(jié)合起來的成像系統(tǒng)，能夠觀測到具有雙折性特征的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，如紡錘體和透明帶。Polscope成像系統(tǒng)無需對細(xì)胞進(jìn)行固定和染色，因此能夠評估卵母細(xì)胞的質(zhì)量與紡錘體、透明帶等的相關(guān)性。在紡錘體卵冷凍研究中，Polscope成像系統(tǒng)可用于實(shí)時(shí)監(jiān)測冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化，評估冷凍保護(hù)劑的效果和冷凍速率對紡錘體的影響。此外，解凍后也可利用Polscope成像系統(tǒng)評估紡錘體的恢復(fù)情況和穩(wěn)定性，從而篩選出高質(zhì)量的卵母細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)操作。紡錘體形態(tài)的變化反映了細(xì)胞分裂的不同階段。深圳成熟卵母細(xì)胞紡錘體

紡錘體在細(xì)胞分裂中的穩(wěn)定性對于細(xì)胞存活至關(guān)重要。香港MII期紡錘體加熱臺

紡錘體觀測儀使ICSI更加安全可靠

在進(jìn)行單精子卵胞漿內(nèi)注射（ICSI）授精時(shí)，**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞時(shí)，通常認(rèn)為，卵母細(xì)胞紡錘**于***極體附近，故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動卵母細(xì)胞使其***極**于6點(diǎn)或12點(diǎn)處，然后在3點(diǎn)處注入精子。但是，在大量使用紡錘體觀測儀后發(fā)現(xiàn)，***極體并不能很好地預(yù)測紡錘體的位置。一項(xiàng)研究提示，在ICSI后，用紡錘體觀測儀觀察紡錘體與***極體的夾角，結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細(xì)胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動，或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變，普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇，可能會損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過紡錘體觀測儀，可以精確地對卵母細(xì)胞中紡錘體的位置進(jìn)行定位，從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體，使ICSI更加安全可靠。有文獻(xiàn)報(bào)道，在進(jìn)行ICSI時(shí)，觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細(xì)胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，有些卵母細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的，但在紡錘體觀測儀這個(gè)“照妖鏡”下，就能顯出原形，表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體，這類卵母細(xì)胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。 香港MII期紡錘體加熱臺

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