離心管就是一個(gè)簡(jiǎn)單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。 蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,目前較常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積而定??芍貜?fù)使用,使用一次就扔掉太浪費(fèi)。以下是個(gè)人總結(jié)的使用方法和注意事項(xiàng)。離心超濾管會(huì)有一個(gè)類似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理。超濾離心管的選擇主要看你要截留那部分物質(zhì),就選擇比較小分子量小的,如果你要截留26KD的,你要的超濾管就要比26小。但兩者也要有一定的差距,比如,選擇20-25KD之間的就不合適,因?yàn)?6的也可能會(huì)出去(這是由制造工藝決定的)。所以選擇20KD以下的超濾管比較合適。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免過度旋轉(zhuǎn)造成樣品變性或降解,并影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。紹興10K超濾離心管咨詢
超濾離心管從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中濃縮蛋白,在園子里找到一些關(guān)于濃縮蛋白的一些帖子,但還有些問題還是向園子里的大蝦請(qǐng)教一下。我們定的是 15ml規(guī)格的管子,不知道有沒有誰以前做過的,有關(guān)于轉(zhuǎn)速,時(shí)間給一些建議,另外細(xì)胞上清液離心前是否需要什么預(yù)處理?離心之后回收蛋白時(shí)怎么盡量減少損失?如果要把管子重復(fù)利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是將其浸到乙醇中防于4度,還是在管子中灌入乙醇?我用過5ml的管子,當(dāng)時(shí)使用的轉(zhuǎn)速是4000rpm 8min,可以把5ml的樣品液濃縮到約200ul,這只供參考,具體情況還要由您的樣品決定。我保存5ml管子的方法是把內(nèi)管取出,浸泡于裝有20%乙醇的燒杯中。四度保存。寧波濃縮超濾離心管廠商使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免污染和交叉?zhèn)鞑?,并?duì)設(shè)備進(jìn)行徹底清潔消毒。
離心超濾裝置用于濃縮和澄清過濾生物樣品,蛋白純化,顆粒物去除,血漿或血清過濾,以及從細(xì)胞裂解液或細(xì)胞培養(yǎng)上清去除細(xì)胞或細(xì)胞碎片。提供一系列離心設(shè)備,快速安全處理100 μl到100ml樣品??蛇x拋棄型和可重復(fù)使用超濾裝置。超濾離心濃縮管,用于生物樣品濃縮。離心超濾管,簡(jiǎn)單快速,一步離心完成樣品濃縮,起始樣品體積可達(dá)500μl??煞湃?.2ml角轉(zhuǎn)子離心。垂直膜配合狹長(zhǎng)的流道,有效地避免濾膜堵塞,提高濃縮速度,即使顆粒含量高的溶液,也同樣能達(dá)到快速濃縮。在30分鐘內(nèi)就可達(dá)到超過90%的濃縮回收率。死端結(jié)構(gòu)避免離心干燥樣品。0.5ml-20ml樣品處理量的超濾管,截留分子量2KDa-100KDa,規(guī)格齊全,濃縮回收率高、流速更快,較高達(dá)12000g的高速離心機(jī),機(jī)械強(qiáng)度更好,質(zhì)量更好,價(jià)格更優(yōu)惠。
選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速rpm換算成g之后,有所不同。超濾離心管可以用于制備樣品以進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn),如電泳、質(zhì)譜等。
下面是處理和重復(fù)使用超濾管的步驟。將超濾管中的水倒出來,用Milliq水輕輕沖洗幾次。[如管底有可見蛋白質(zhì)沉淀,可先加水,再用設(shè)備頭吹氣,注意不要碰觸膜,吹氣至沉淀懸浮,再倒出,不要沖自來水。)然后加入0.2 mNaOH溶液,室溫放置20分鐘,平衡超濾。在此期間定量管。離心10分鐘。倒出剩余的MaOH溶液,將管芯浸入Milliq燒杯(1L或2L)中。放器數(shù)小時(shí),然后用新水替換,放置數(shù)小時(shí),不斷稀釋Na0E濃度。50ml管道和蓋子用自來水沖洗,內(nèi)壁用Milliq水沖洗。取出浸入水中的芯,并將其加入幾乎滿毫升的水中。在50毫升試管中注入毫升水。慢慢地將芯放入50毫升離心管中,排出一些水。然后蓋上蓋子,4度存放,直到下次使用。一般來說,根據(jù)上述步驟和注意事項(xiàng),每根渠道在三到四年內(nèi)不會(huì)受損。超濾離心管還可用于檢測(cè)食品中的殘留物和污染物,以保障公眾健康。寧波濃縮超濾離心管廠商
超濾離心管在臨床診斷中也具有重要作用,如腎功能檢測(cè)、腦脊液分析等領(lǐng)域。紹興10K超濾離心管咨詢
按用途可分:制備型離心管和分析型離心管。大量離心管(500mL、250mL)。普通離心管(50mL、15mL)。微量離心管(2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL) 塑料離心管,玻璃離心管,鋼制離心管。1、塑料離心管。塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料離心管都有管蓋,它的作用是防止樣品外泄,尤其是用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)防止樣品外泄是很重要的一點(diǎn);管蓋還有一個(gè)作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管,防止離心管變形。在挑選這一點(diǎn)的時(shí)候還要注意檢查管蓋是否嚴(yán)密,在試驗(yàn)時(shí)能否蓋嚴(yán),以到達(dá)倒置不漏液;我們都知道在塑料離心管中,常用材料有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能會(huì)相對(duì)較好,所以,我們?cè)谔暨x塑料離心管時(shí)盡可能的考慮聚丙烯的塑料離心管。紹興10K超濾離心管咨詢
超濾離心管具有多種容量和規(guī)格,以滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。在選擇時(shí),需綜合考慮樣本量、目標(biāo)分子濃度、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.. [詳情]
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2025-04-27