避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。 超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過對于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。離心機(jī)轉(zhuǎn)速會影響到超濾效果,因此需要根據(jù)實驗要求調(diào)整相應(yīng)的轉(zhuǎn)速。衢州濃縮超濾離心管咨詢
我們通常會以1/3到1/6甚至更低的區(qū)間來選擇超濾管的孔徑,通常更小的孔徑會使回收率提高但是超濾的時間也會比較長。一定范圍內(nèi),超濾的回收率和速度是一對矛盾體,因此可以通過優(yōu)化孔徑的選擇,在回收率可以接受的條件下選擇較大的孔徑,來提高超濾的速度。低溫如< 10 ℃,液體的粘度會增加,流動性會降低,因此液體的跨膜速率也會降低。適當(dāng)提高超濾溫度,往往能夠提高超濾的速度。有些客戶需要做幾十ml到幾百ml樣品的濃縮或者緩沖液置換,但是卻使用1支或幾支15ml的超濾管反復(fù)離心來完成操作,這樣必然造成時間上的浪費(fèi)。怎么辦?一定要挑選適合處理量的產(chǎn)品,減少不必要的反復(fù)離心從而提升超濾的效率。遼寧再生纖維素離心管在哪買超濾離心管可以用于制備樣品以進(jìn)行下一步實驗,如電泳、質(zhì)譜等。
超濾離心管使用方法和注意事項:1、選擇合適的超濾離心管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾離心管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾離心管。2、新買來的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾離心管需要插在冰上預(yù)冷。3、質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速rpm換算成g之后,有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機(jī),否則離心機(jī)出問題時,無法*時間處理,后果不可預(yù)測!
一提起蛋白質(zhì)濃縮、更換緩沖液,我們都會想起超濾。這是一種我們都很熟悉的膜分離技術(shù)。它可用來分離溶液中極小的顆粒和溶解的分子。這種方法的較大特點(diǎn)是操作簡便,只需要濃縮離心管和離心機(jī),即可圓滿完成我們的任務(wù)。與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和。它不需要有機(jī)萃取,就不會導(dǎo)致蛋白變性。這種方法非常高效,可同時濃縮和純化分子。操作可在低溫(比如冷庫)下進(jìn)行。另外,快速、便宜,也是許多人青睞它的原因。濃縮離心管的操作很簡單。選擇適當(dāng)?shù)臐饪s離心管,加入待處理的樣本,按照離心管的指示進(jìn)行離心操作,之后回收截留的樣本。在離心力的作用下,溶液中的小分子溶質(zhì)和溶劑透過超濾膜,被收集在濾過液收集瓶中,而大分子溶質(zhì)被超濾膜截留在濃縮離心管中。這種分離的主要依據(jù)是分子大小,但分子形狀和電荷等其他因素也會有影響。超濾離心管是一種用于分離和濃縮生物樣品的實驗室設(shè)備。
注意:超濾離心管中的濾膜一旦潤濕 后應(yīng)避免變干。如果在預(yù)清洗后不是立即使用,則讓液體保留在濾膜上,直到使用。6.使用方法:1).將超濾內(nèi)管插入所提供的一個微量離心管中。2).向超濾管內(nèi)管中加入不超過500 μL的樣本,并蓋上蓋子。3).將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中,讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個類似的超濾管平衡。4).以14,000 x g離心約10-30分鐘,具體時間取決于所使用超濾管的NMWL。5).離心結(jié)束后將整個超濾管從離心機(jī)中取出,取出內(nèi)管。6).為了回收濃縮后的溶質(zhì),將內(nèi)管倒過來插在-個干凈的微量離心管中。放在離心機(jī)中,讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個類似的超濾管進(jìn)行平衡。以1 ,000 x g離心2分鐘,使?jié)饪s后的樣本從超濾內(nèi)管轉(zhuǎn)移到收集管中。超濾液可以保存在收集管中。使用超濾離心管時應(yīng)注意避免過度壓力造成膜破裂或損壞并影響分離效果。衢州再生纖維素離心管采購
超濾離心管還可以用于檢測樣品中的微生物或細(xì)胞,并進(jìn)行分析和研究。衢州濃縮超濾離心管咨詢
超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,否則會變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應(yīng)當(dāng)干燥保存,買回來的時候就是干的。當(dāng)然也可以濕潤保存,但是應(yīng)當(dāng)保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。衢州濃縮超濾離心管咨詢
在使用超濾離心管時,離心速度和時間的選擇對分離效果至關(guān)重要。過高的離心速度可能導(dǎo)致膜破裂、樣本過熱,... [詳情]
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2025-04-28樣本預(yù)處理是超濾離心管使用前不可或缺的一環(huán)。預(yù)處理的目的是去除樣本中的雜質(zhì)、調(diào)整pH值和鹽濃度,以確... [詳情]
2025-04-27