我們面對上面客戶反映的問題使用2次以上出現(xiàn)問題是很正常的,但是我們也不能保證客戶使用5次,8次,還是更多次就一定會出現(xiàn)穿孔不能用,我們必須再一次強調(diào)提醒做實驗的各位老師,這個超濾管必須嚴格按照說明書規(guī)定,一次性使用,不要重復使用,重復使用雖然有的人可以用幾次,但是過濾效果已經(jīng)嚴重影響了,效果肯定一次次的下降!你說這樣過濾的樣品做后續(xù)實驗,那你的后續(xù)實驗還可信嗎?所以廠家也一再強調(diào)較好不要重復使用!另外,有的客戶說自己的超濾管使用一次就碎了,這是什么原因呢?超濾管的質(zhì)量問題還是離心機轉(zhuǎn)速的問題呢?說到這里,我們也再一次提醒大家超濾管使用如果轉(zhuǎn)速太高,離心力肯定會更大!這樣不斷用力磨損,很容易一次就碎了,也可能使用幾次碎了!使用超濾離心管時,應(yīng)注意保持樣品干燥、無污染和清潔。紹興外泌體超濾離心管廠家
使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。這個我是聽老板們說的,的確乙醇泡完后孔徑會增大,基本就是5-10KD較大,也就是說如果你的蛋白在21KD以上,應(yīng)該沒問題?;蛘呖梢圆挥靡掖寂?,用NaOH洗之后直接用無菌水保存,每周換一下液體,應(yīng)該沒有問題??纯凑f明書不就結(jié)了!我原來在CRO的時候一直是重復用的,也沒見什么不好?。《唐跁玫脑?,用20%的乙醇泡著,回頭拼命用millipore的水充干凈,然后在用樣品緩沖液平衡一下就好,至于有些人說的改變孔徑,也沒那么大影響的,你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個月以內(nèi)不用的話,建議用100mM的NaOH保存!更長時間的話加0.02%的疊氮鈉,但那個東西強致疾病物,不建議使用。理論上截留目標物,孔徑應(yīng)選1/3~1/5的膜;透過目標物,孔徑應(yīng)選5-10倍的膜。蘇州外泌體超濾離心管咨詢超濾離心管可用于從血漿或尿液中提取蛋白質(zhì)和核酸等大分子化合物。
根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時,就要考慮進口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細的刻度,插蓋的只有一個總體的容量標示。實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易變形,抗有機溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實驗室一般會經(jīng)常購買離心管。下面就對各種材質(zhì)分別介紹一下。根據(jù)其材質(zhì)的不同總體可以分為塑料和玻璃的,塑料的離心管用的較多,又可以分為PP、PC、PS等,根據(jù)不同需要,生產(chǎn)廠家會選擇不同的塑料材料來進行制作。
離心管主要有塑料、不銹鋼制成,塑料離心管常用資料有聚丙烯(PP).聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC)等。其中PP管性能較好,塑料離心管的優(yōu)點是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度,缺陷是易變形,抗有機溶劑腐蝕性差,運用壽命短;不銹鋼離心管強度大,不變形,能抗凍,抗熱,抗化學腐蝕,但用時要防止接觸強腐蝕性的化學藥品、如強酸、強堿等化學試劑。這里主要介紹塑料離心管:塑料離心管都有管蓋,離心前管蓋必需蓋嚴,倒置不漏液。管蓋有三種作用:①避免樣品外泄,用于有放射性或強腐蝕性的樣品時②避免樣品揮發(fā)③支持離心管,避免離心管變形。使用超濾離心管時應(yīng)注意保持其穩(wěn)定性并避免操作失誤導致實驗失敗或損壞設(shè)備。
超濾離心管應(yīng)用:1、組成部分:該裝置包括一個蓋子、一個過濾器和一個50ML的離心管。2、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座。①注意:為了避免在離心過程中損壞裝置,在旋轉(zhuǎn)前請檢查間隙。 3、帶有200微升(μL)的移液管,用于濃縮液回收適用性。①注意:該產(chǎn)品未經(jīng)消毒,只供一次使用,保質(zhì)期3年。為確保對預定用途的適用性,建議進行初步的回收和截留試驗。4、濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標記,在HPLC之前去除蛋白質(zhì)。使用超濾離心管時應(yīng)注意避免過度壓力造成膜破裂或損壞并影響分離效果。河北離心管工廠
超濾離心管還可以用于檢測樣品中的微生物或細胞,并進行分析和研究。紹興外泌體超濾離心管廠家
離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續(xù)三次,之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。紹興外泌體超濾離心管廠家