選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,較常見的是10kD。到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、 5kDa、還是30kDa?通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同,表格中有。新買來的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。超濾離心管利用離心力和超濾膜將分子分離和過濾出來。浙江100K超濾離心管工廠
超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速、高效,可同時(shí)濃縮和純化分子,一般來說超濾的回收率能夠達(dá)到90%以上,因此得到許多人的青睞。超濾濃縮器是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準(zhǔn)確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對(duì)被處理的分子更加溫和,不需要有機(jī)萃取,不會(huì)導(dǎo)致蛋白變性,且簡(jiǎn)單高效。潔特6mL規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL以內(nèi)的樣本,離心管內(nèi)包含一個(gè)內(nèi)置豎直的聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點(diǎn),可應(yīng)用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD六種不同的截留分子量中。截留分子量標(biāo)識(shí)和體積刻度蝕刻在濃縮器的側(cè)面便于識(shí)別。浙江100K超濾離心管工廠使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的溫度、時(shí)間和壓力要求,以獲得較佳結(jié)果。
質(zhì)量和重心都應(yīng)該平衡。注意速度和加速度不要太快,否則會(huì)直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心預(yù)冷至4度〉。膜和旋轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明進(jìn)行調(diào)整(對(duì)于角向離心機(jī),膜垂直于軸〉。在實(shí)際應(yīng)用中,一般的速度開度比手動(dòng)低,可以延長(zhǎng)離心管的使用壽命。4。當(dāng)濃縮到剩余的1毫升時(shí),取中國產(chǎn)的504.1l布拉德福德溶液,加104 l流過,看是否變藍(lán),以判斷ur管是否漏蛋白。如果管道泄漏,重新倒入上層,然后流過新管道開始超濾。為了準(zhǔn)確確定管道是否泄漏,用5 mg/ml BSA離心10分鐘,然后將其穿過,大致運(yùn)行膠水或Bradf ord,繼續(xù)添加剩余的蛋白質(zhì)溶液以濃縮(在冰上操作以防止蛋白質(zhì)加熱〉,直到所有濃縮物都添加完畢。離心過程中應(yīng)注意是否有蛋白質(zhì)沉淀,導(dǎo)致堵塞。如果發(fā)生沉淀,有必要確定沉淀的具體原因是蛋白質(zhì)濃度過高還是緩沖液不當(dāng)。
我們通常會(huì)以1/3到1/6甚至更低的區(qū)間來選擇超濾管的孔徑,通常更小的孔徑會(huì)使回收率提高但是超濾的時(shí)間也會(huì)比較長(zhǎng)。一定范圍內(nèi),超濾的回收率和速度是一對(duì)矛盾體,因此可以通過優(yōu)化孔徑的選擇,在回收率可以接受的條件下選擇較大的孔徑,來提高超濾的速度。低溫如< 10 ℃,液體的粘度會(huì)增加,流動(dòng)性會(huì)降低,因此液體的跨膜速率也會(huì)降低。適當(dāng)提高超濾溫度,往往能夠提高超濾的速度。有些客戶需要做幾十ml到幾百ml樣品的濃縮或者緩沖液置換,但是卻使用1支或幾支15ml的超濾管反復(fù)離心來完成操作,這樣必然造成時(shí)間上的浪費(fèi)。怎么辦?一定要挑選適合處理量的產(chǎn)品,減少不必要的反復(fù)離心從而提升超濾的效率。超濾離心管也可用于水處理過程中去除污染物和雜質(zhì)。
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用。 使用注意事項(xiàng) (1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。 (2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。 (3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔,減小對(duì)膜的壓力。超濾離心管的應(yīng)用領(lǐng)域普遍,包括生物醫(yī)學(xué)研究、制藥工業(yè)、食品科學(xué)等。浙江100K超濾離心管工廠
超濾離心管適用于從細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、尿液等樣品中提取蛋白質(zhì)、核酸、多糖等大分子化合物。浙江100K超濾離心管工廠
超濾離心管采用再生纖維素膜,具有較高的回收率(>90%)和 高濃縮倍數(shù)(80–100 倍),100%完整性檢測(cè)確保性能可靠,主要應(yīng)用與生物樣品與蛋白濃縮、大分子組分的純化、脫鹽和緩沖液更換。再生纖維素膜具有一系列截留分子量,用戶可根據(jù)目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積,選用不同體積大小和MWCO的超濾管。超濾離心管備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用。超濾離心管應(yīng)用范圍:*生物樣品濃縮:包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物。*對(duì)組織培養(yǎng)提取物或細(xì)胞裂解液中大分子組分的純化。*對(duì)稀釋或從柱洗脫液預(yù)先純化的蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮。*脫鹽和緩沖液更換。浙江100K超濾離心管工廠
超濾離心管具有多種容量和規(guī)格,以滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。在選擇時(shí),需綜合考慮樣本量、目標(biāo)分子濃度、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.. [詳情]
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2025-04-27