實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀地看到樣品的離心情況,但是比較容易變形,抗有機溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實驗室一般會經(jīng)常購買離心管。PC (聚碳酸酯):透明度較好,硬度大,可以高溫消毒,但不耐強酸強堿以及一些有機溶劑如酒精之類。主要用于5萬轉(zhuǎn)以上的超高速離心。PE(聚乙烯):不透明。和丙銅、醋酸、鹽酸等不反應(yīng),較為穩(wěn)定,高溫下容易變軟。PP(聚丙烯):半透明,化學及溫度穩(wěn)定性較好,但是在低溫下會變脆,所以在離心時不要在4℃以下。超濾離心管通常需要冷藏保存,以保持其性能和壽命。杭州外泌體超濾離心管哪家強
超濾離心管具有快速超濾功能,能夠達到較高的濃縮倍數(shù),輕松實現(xiàn)從稀釋和復雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設(shè)計的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理,獲得較高樣本回收率(通常> 90%) ,并達到30倍的濃縮。根據(jù)標稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計也較大程度降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢;死體積設(shè)計能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后,濃縮樣本(截留部分)可通過一個簡便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實現(xiàn)高效回收。超濾管未經(jīng)消毒,只供一次使用。杭州外泌體超濾離心管哪家強超濾離心管可以應(yīng)用于許多領(lǐng)域,如生物技術(shù)、藥學、食品科學等。
超濾離心管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會增強,對于這種情況,可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理,也可以嘗試換成Amicon Ultra0.5或2來進行實驗,通過減小膜面積來降低非特異性吸附。超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析,可用緩沖液或Milli-Q水預清洗。如果干擾仍存在,用0.1N NaOH清洗,然后用緩沖液或Milli-Q水再次清洗后甩干。
脫鹽、更換緩沖液或滲濾是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法。鹽分去除或緩沖液更換可通過超濾管來完成,具體過程是濃縮樣本,棄去濾出液,然后向濃縮液中加入任何所需的溶劑,恢復到樣本原先的體積。"洗出"的過程可反復進行,直到雜質(zhì)的濃度被充分降低。關(guān)于超濾管的常見問題與解答:Q:超濾管的膜材質(zhì)是什么?A:超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴格,截留分子量明確而準, 蛋白吸附損失小。Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?A:按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差 一個數(shù)量級(10倍)。使用超濾離心管時應(yīng)注意避免過度旋轉(zhuǎn)造成機械損傷或故障,并及時維護保養(yǎng)設(shè)備。
超濾離心管的原理:根據(jù)標稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計也較大程度降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢;Chemicalbook死體積設(shè)計能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后,濃縮樣本(截留部分)可通過一個簡便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實現(xiàn)高效回收。超濾離心管的應(yīng)用:1)濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本2)純化組織培養(yǎng)提取液或細胞裂解液中的大分子成分,去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3)除鹽,緩沖液更換,或滲濾。超濾離心管在藥物代謝動力學研究中也具有重要意義,以確定藥物代謝途徑和藥效學參數(shù)。杭州外泌體超濾離心管哪家強
使用超濾離心管時,應(yīng)注意控制轉(zhuǎn)速,以避免過度旋轉(zhuǎn)導致超濾膜損壞或溢出樣品。杭州外泌體超濾離心管哪家強
超濾離心管使用注意事項:當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。杭州外泌體超濾離心管哪家強