超濾離心管從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中濃縮蛋白，在園子里找到一些關(guān)于濃縮蛋白的一些帖子，但還有些問題還是向園子里的大蝦請教一下。我們定的是 15ml規(guī)格的管子，不知道有沒有誰以前做過的，有關(guān)于轉(zhuǎn)速，時(shí)間給一些建議，另外細(xì)胞上清液離心前是否需要什么預(yù)處理？離心之后回收蛋白時(shí)怎么盡量減少損失？如果要把管子重復(fù)利用，NaoH清洗后，如何在20%的乙醇中保存？是將其浸到乙醇中防于4度，還是在管子中灌入乙醇？我用過5ml的管子，當(dāng)時(shí)使用的轉(zhuǎn)速是4000rpm 8min，可以把5ml的樣品液濃縮到約200ul，這只供參考，具體情況還要由您的樣品決定。我保存5ml管子的方法是把內(nèi)管取出，浸泡于裝有20％乙醇的燒杯中。四度保存。超濾離心管還可用于制備高純度的酶、蛋白質(zhì)等生物制品，以應(yīng)用于不同領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)室操作。臺州小型超濾離心管推薦

離心管定義：管狀試樣容器，可帶密封蓋或壓蓋。是實(shí)驗(yàn)室里面常見的一種實(shí)驗(yàn)耗材。1、按照其大小分：大量離心管（500mL、250mL）；普通離心管（50mL、15mL）微量離心管（2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL）。2、按照底部形狀分：錐形離心管，底部為錐形，是使用較多的離心管類型；平底離心管；圓底離心管。3、按照蓋子閉合方式分：壓蓋離心管，以按壓方式密封的離心管，常見于微型離心管；螺旋蓋離心管，又可分為平蓋（蓋子頂部是平的）和塞蓋（蓋子頂部有塞子形狀）。4、按照材料分：塑料離心管，玻璃離心管，鋼制離心管。鋼制離心管：鋼制離心管強(qiáng)度大，不變形，能抗熱，抗凍，抗化學(xué)腐蝕，它的應(yīng)用也是相當(dāng)普遍但使用時(shí)同樣也應(yīng)避免接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品，如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等。盡量避免這些化學(xué)物質(zhì)的腐蝕。臺州小型超濾離心管推薦使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免過度壓力造成膜破裂或損壞并影響分離效果。

實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料的和玻璃的，一般塑料的用得較多，因?yàn)椴ＡУ碾x心管不能用在高速或者超速離心機(jī)上。塑料的離心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP（聚丙烯）等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明，可以直觀地看到樣品的離心情況，但是比較容易變形，抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差，所以使用壽命較短。因此，實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)經(jīng)常購買離心管。PC (聚碳酸酯):透明度較好，硬度大，可以高溫消毒，但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿以及一些有機(jī)溶劑如酒精之類。主要用于5萬轉(zhuǎn)以上的超高速離心。PE（聚乙烯）:不透明。和丙銅、醋酸、鹽酸等不反應(yīng)，較為穩(wěn)定，高溫下容易變軟。PP（聚丙烯）:半透明，化學(xué)及溫度穩(wěn)定性較好，但是在低溫下會(huì)變脆，所以在離心時(shí)不要在4℃以下。

A（聚酰胺）:這種材質(zhì)是PP和PE材質(zhì)的聚合物，半透明，化學(xué)性質(zhì)非常穩(wěn)定，單不耐高溫。PF（聚氟）:半透明，可以低溫使用，如果是-100℃-140℃下的實(shí)驗(yàn)環(huán)境，就可以用這種材質(zhì)的離心管。CAB（醋酸丁酯纖維素）:透明，可用于較稀的酸、堿、鹽，以及酒精、蔗糖的梯度測定。PS（聚苯乙烯）:透明，硬度大，對大多數(shù)的水溶液穩(wěn)定，但是會(huì)被多種有機(jī)物腐蝕，多用于低速離心，而且一般是一次性使用。離心管分類:按材質(zhì)可分:塑料離心管、玻璃離心管和不銹鋼離心管等。按速度可分:低速離心管和高速離心管。按容量可分:微量離心管、小容量離心管和大容量離心管。一般稱容量大于100mL的離心管為離心瓶。超濾離心管通常具有標(biāo)準(zhǔn)化設(shè)計(jì)，使其易于與其他實(shí)驗(yàn)室設(shè)備集成使用。

超濾離心管關(guān)于回收率的疑問？一般對濃度大于0.1mg/ml的溶質(zhì)進(jìn)行回收，回收率在90%以上。通常，樣品損失是由于濾膜表面和料管表面的非特異性吸附造成的。為了獲得較高的回收率，所選濾膜的截留率約為目標(biāo)蛋白的1/3。超濾膜是一種非對稱膜，其孔徑呈正態(tài)分布。在高壓離心下也可能發(fā)生泄漏，在這種情況下蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變形。因此，截留孔徑越小，流速越慢，但回收率會(huì)更高。濃縮過程中有蛋白質(zhì)沉淀，如何處理？如果蛋白質(zhì)濃縮過快或過多，都可能造成蛋白質(zhì)沉淀，濃縮后的蛋白質(zhì)之后濃度不宜過高；對于對濃縮速度敏感、易沉淀的蛋白質(zhì)，建議改進(jìn)方法如下：1）降低離心速度，2）使用截留分子量較大的超濾膜3) 吹吸濃縮管，然后離心。超濾離心管是一種用于分離和純化生物大分子的工具。上海高離心力離心管制造廠

超濾離心管適用于從細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、尿液等樣品中提取蛋白質(zhì)、核酸、多糖等大分子化合物。臺州小型超濾離心管推薦

避免過度濃縮，體積越小，越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液，必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面，有助于減少膜表面吸附，能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。離心管是一個(gè)簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會(huì)有一個(gè)類似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子（即外管）中了,分子量比它大的就截留在上面（即內(nèi)管中）,就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。 超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用，不過對于蛋白質(zhì)樣本處理，特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。臺州小型超濾離心管推薦