以下是處理超濾管，重復(fù)利用超濾管的步驟。倒出超濾管里的水，用milliQ水輕輕潤(rùn)洗幾次，【若管底有可見的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用設(shè)備頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀懸起，然后倒掉，不可用自來(lái)水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液，室溫放置20min，期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液，將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個(gè)小時(shí),再換新的水,放置幾個(gè)小時(shí)，不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來(lái)水洗，內(nèi)壁再用MilliQ水洗干凈。取出浸沒(méi)的管芯，加至接近滿的MilliQ水，50ml管也加滿MilliQ水，將管芯慢慢放入50ml。離心管，排出部分水，然后蓋上蓋子，放4度保存，直到下次使用。一般來(lái)說(shuō)，按照上述步驟和注意事項(xiàng)，每根管用三四年不會(huì)壞。超濾離心管可用于制備純度高的蛋白質(zhì)，以進(jìn)行晶體結(jié)構(gòu)解析或其他實(shí)驗(yàn)室操作。重慶外泌體超濾離心管廠家電話

超濾離心管使用注意事項(xiàng)：當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí)，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒(méi)變藍(lán)色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測(cè)，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過(guò)程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過(guò)高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時(shí)超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。浙江再生纖維素離心管采購(gòu)超濾離心管是一種用于分離和濃縮生物樣品的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。

在選擇過(guò)程中，應(yīng)首先執(zhí)行以下步驟：1考慮樣品和分子特性：比如改變pH 可能增加構(gòu)象改變的風(fēng)險(xiǎn)，而降低溫度可能降低濃縮效率等。2、選擇正確的膜：眾所周知，超濾沒(méi)有太多的膜選項(xiàng)，但您應(yīng)對(duì)再生纖維素和聚醚砜（PES）材料進(jìn)行測(cè)試，以確定哪種材料可為您的特定材料提供較低的非特異性結(jié)合和較優(yōu)的回收率。3、選擇合適的截留分子量，通常是靶標(biāo)1/3大小的截留分子量較適合。但有時(shí)則需要更小的孔徑來(lái)滿足回收率的要求。如果在病毒和核酸樣品，可參看下面截留分子量和病毒顆粒分子大小以及核酸大小的換算表。選擇合適的裝置：賽多利斯擁有適用于低濃度樣品、DNA、蛋白質(zhì)、病毒、過(guò)濾應(yīng)用等普遍的裝置選項(xiàng)；選擇合適的裝置可以有效改善結(jié)果。

使用后用0.1M NaOH泡24h，然后20%乙醇浸泡保存。這個(gè)我是聽老板們說(shuō)的，的確乙醇泡完后孔徑會(huì)增大，基本就是5-10KD較大，也就是說(shuō)如果你的蛋白在21KD以上，應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題。或者可以不用乙醇泡，用NaOH洗之后直接用無(wú)菌水保存，每周換一下液體，應(yīng)該沒(méi)有問(wèn)題?？纯凑f(shuō)明書不就結(jié)了！我原來(lái)在CRO的時(shí)候一直是重復(fù)用的，也沒(méi)見什么不好??！短期會(huì)用的話，用20%的乙醇泡著，回頭拼命用millipore的水充干凈，然后在用樣品緩沖液平衡一下就好，至于有些人說(shuō)的改變孔徑，也沒(méi)那么大影響的，你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個(gè)月以內(nèi)不用的話，建議用100mM的NaOH保存！更長(zhǎng)時(shí)間的話加0.02%的疊氮鈉，但那個(gè)東西強(qiáng)致疾病物，不建議使用。理論上截留目標(biāo)物，孔徑應(yīng)選1/3~1/5的膜；透過(guò)目標(biāo)物，孔徑應(yīng)選5-10倍的膜。使用超濾離心管時(shí)，應(yīng)注意保持樣品干燥、無(wú)污染和清潔。

超濾離心管關(guān)于回收率的疑問(wèn)？一般對(duì)濃度大于0.1mg/ml的溶質(zhì)進(jìn)行回收，回收率在90%以上。通常，樣品損失是由于濾膜表面和料管表面的非特異性吸附造成的。為了獲得較高的回收率，所選濾膜的截留率約為目標(biāo)蛋白的1/3。超濾膜是一種非對(duì)稱膜，其孔徑呈正態(tài)分布。在高壓離心下也可能發(fā)生泄漏，在這種情況下蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變形。因此，截留孔徑越小，流速越慢，但回收率會(huì)更高。濃縮過(guò)程中有蛋白質(zhì)沉淀，如何處理？如果蛋白質(zhì)濃縮過(guò)快或過(guò)多，都可能造成蛋白質(zhì)沉淀，濃縮后的蛋白質(zhì)之后濃度不宜過(guò)高；對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感、易沉淀的蛋白質(zhì)，建議改進(jìn)方法如下：1）降低離心速度，2）使用截留分子量較大的超濾膜3) 吹吸濃縮管，然后離心。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免過(guò)度旋轉(zhuǎn)造成機(jī)械損傷或故障，并及時(shí)維護(hù)保養(yǎng)設(shè)備。杭州10K超濾離心管價(jià)位

使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意保持其平衡和穩(wěn)定，并調(diào)整旋轉(zhuǎn)參數(shù)以確保較佳效果。重慶外泌體超濾離心管廠家電話

一般來(lái)說(shuō)，我們較常用的離心管就是塑料離心管，塑料離心管的優(yōu)缺點(diǎn)也很明顯，優(yōu)點(diǎn)是它的硬度較小，可以利用穿刺法來(lái)得到我們需要的物質(zhì)。但這也正是它的缺點(diǎn)，因?yàn)橛捕刃?，所以它也更容易變形，抗腐蝕性也差，所以它的壽命是比較短的。塑料離心管的還可以按照材質(zhì)來(lái)選擇，分別有聚乙烯(PE)，聚碳酸酯(PC)，聚丙烯(PP)這三種材質(zhì)。一般大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室都是將塑料離心管做一次性使用，但一般的實(shí)驗(yàn)室還是會(huì)循環(huán)使用，不推薦循環(huán)使用，因?yàn)檫@樣會(huì)造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不準(zhǔn)確性，但如果非要做循環(huán)使用的話小編還是建議使用pp材質(zhì)的離心管，然后經(jīng)過(guò)高壓高溫進(jìn)行消毒，pp材質(zhì)是上述三種材質(zhì)中較好的，所以在選擇的時(shí)候我們盡量選擇pp材質(zhì)的離心管。重慶外泌體超濾離心管廠家電話