超濾離心管的常見問題與解答,一:超濾離心管的膜材質(zhì)是什么?超濾離心管的膜材質(zhì)為特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而,蛋白吸附損失較小。二:如果要用超濾離心管的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個蛋白的分子量要相差一個數(shù)量級(10倍)。不保證超濾離心管不包含RNA酶,建議用0.1%DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q超純水洗滌除去。去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì),當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度(Critical Micelle Concentration、CMC)時,去污劑分子會聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象,這有可能會影響去污劑的去除效果,具體的操作步驟請垂詢我們。使用超濾離心管時要注意控制轉(zhuǎn)速,以避免過度旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致超濾膜損壞或溢出樣品。廣州濃縮超濾離心管工廠
A(聚酰胺):這種材質(zhì)是PP和PE材質(zhì)的聚合物,半透明,化學(xué)性質(zhì)非常穩(wěn)定,單不耐高溫。PF(聚氟):半透明,可以低溫使用,如果是-100℃-140℃下的實(shí)驗(yàn)環(huán)境,就可以用這種材質(zhì)的離心管。CAB(醋酸丁酯纖維素):透明,可用于較稀的酸、堿、鹽,以及酒精、蔗糖的梯度測定。PS(聚苯乙烯):透明,硬度大,對大多數(shù)的水溶液穩(wěn)定,但是會被多種有機(jī)物腐蝕,多用于低速離心,而且一般是一次性使用。離心管分類:按材質(zhì)可分:塑料離心管、玻璃離心管和不銹鋼離心管等。按速度可分:低速離心管和高速離心管。按容量可分:微量離心管、小容量離心管和大容量離心管。一般稱容量大于100mL的離心管為離心瓶。舟山10K超濾離心管推薦超濾離心管是現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室必不可少的設(shè)備之一,為科研工作者提供了便利和支持。
離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續(xù)三次,之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達(dá)到1000倍以上,基本上可以達(dá)到換buffer的目的。
離心管主要有塑料、不銹鋼制成,塑料離心管常用資料有聚丙烯(PP).聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC)等。其中PP管性能較好,塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度,缺陷是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,運(yùn)用壽命短;不銹鋼離心管強(qiáng)度大,不變形,能抗凍,抗熱,抗化學(xué)腐蝕,但用時要防止接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品、如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等化學(xué)試劑。這里主要介紹塑料離心管:塑料離心管都有管蓋,離心前管蓋必需蓋嚴(yán),倒置不漏液。管蓋有三種作用:①避免樣品外泄,用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時②避免樣品揮發(fā)③支持離心管,避免離心管變形。在使用超濾離心管時,需要注意保持管子清潔、干燥和無污染。
超濾離心管的原理:根據(jù)標(biāo)稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計(jì)也較大程度降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢;Chemicalbook死體積設(shè)計(jì)能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后,濃縮樣本(截留部分)可通過一個簡便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實(shí)現(xiàn)高效回收。超濾離心管的應(yīng)用:1)濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本2)純化組織培養(yǎng)提取液或細(xì)胞裂解液中的大分子成分,去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標(biāo)記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3)除鹽,緩沖液更換,或滲濾。使用超濾離心管時需要注意樣品制備和pH調(diào)整等實(shí)驗(yàn)步驟,以確保較佳結(jié)果。寧波10K超濾離心管選擇
超濾離心管還可以用于分離和提取植物中的活性成分和化合物。廣州濃縮超濾離心管工廠
我們通常會以1/3到1/6甚至更低的區(qū)間來選擇超濾管的孔徑,通常更小的孔徑會使回收率提高但是超濾的時間也會比較長。一定范圍內(nèi),超濾的回收率和速度是一對矛盾體,因此可以通過優(yōu)化孔徑的選擇,在回收率可以接受的條件下選擇較大的孔徑,來提高超濾的速度。低溫如< 10 ℃,液體的粘度會增加,流動性會降低,因此液體的跨膜速率也會降低。適當(dāng)提高超濾溫度,往往能夠提高超濾的速度。有些客戶需要做幾十ml到幾百ml樣品的濃縮或者緩沖液置換,但是卻使用1支或幾支15ml的超濾管反復(fù)離心來完成操作,這樣必然造成時間上的浪費(fèi)。怎么辦?一定要挑選適合處理量的產(chǎn)品,減少不必要的反復(fù)離心從而提升超濾的效率。廣州濃縮超濾離心管工廠
超濾離心管具有多種容量和規(guī)格,以滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。在選擇時,需綜合考慮樣本量、目標(biāo)分子濃度、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.. [詳情]
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2025-04-27