脫鹽、更換緩沖液或滲濾是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法。鹽分去除或緩沖液更換可通過超濾管來完成,具體過程是濃縮樣本,棄去濾出液,然后向濃縮液中加入任何所需的溶劑,恢復(fù)到樣本原先的體積。"洗出"的過程可反復(fù)進行,直到雜質(zhì)的濃度被充分降低。關(guān)于超濾管的常見問題與解答:Q:超濾管的膜材質(zhì)是什么?A:超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴格,截留分子量明確而準, 蛋白吸附損失小。Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?A:按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差 一個數(shù)量級(10倍)。超濾離心管還可以用于分離和提取植物中的活性成分和化合物。山東10K超濾離心管廠家
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標分子量選擇適當?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標分子量的一半。因為超濾膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計,可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。四川高離心力離心管哪家強超濾離心管可以用于分離各種生物樣品,如血漿、細胞培養(yǎng)液、酶溶液等。
一提起蛋白質(zhì)濃縮、更換緩沖液,我們都會想起超濾。這是一種我們都很熟悉的膜分離技術(shù)。它可用來分離溶液中極小的顆粒和溶解的分子。這種方法的較大特點是操作簡便,只需要濃縮離心管和離心機,即可圓滿完成我們的任務(wù)。與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和。它不需要有機萃取,就不會導(dǎo)致蛋白變性。這種方法非常高效,可同時濃縮和純化分子。操作可在低溫(比如冷庫)下進行。另外,快速、便宜,也是許多人青睞它的原因。濃縮離心管的操作很簡單。選擇適當?shù)臐饪s離心管,加入待處理的樣本,按照離心管的指示進行離心操作,之后回收截留的樣本。在離心力的作用下,溶液中的小分子溶質(zhì)和溶劑透過超濾膜,被收集在濾過液收集瓶中,而大分子溶質(zhì)被超濾膜截留在濃縮離心管中。這種分離的主要依據(jù)是分子大小,但分子形狀和電荷等其他因素也會有影響。
超濾離心管從細胞培養(yǎng)上清液中濃縮蛋白,在園子里找到一些關(guān)于濃縮蛋白的一些帖子,但還有些問題還是向園子里的大蝦請教一下。我們定的是 15ml規(guī)格的管子,不知道有沒有誰以前做過的,有關(guān)于轉(zhuǎn)速,時間給一些建議,另外細胞上清液離心前是否需要什么預(yù)處理?離心之后回收蛋白時怎么盡量減少損失?如果要把管子重復(fù)利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是將其浸到乙醇中防于4度,還是在管子中灌入乙醇?我用過5ml的管子,當時使用的轉(zhuǎn)速是4000rpm 8min,可以把5ml的樣品液濃縮到約200ul,這只供參考,具體情況還要由您的樣品決定。我保存5ml管子的方法是把內(nèi)管取出,浸泡于裝有20%乙醇的燒杯中。四度保存。使用超濾離心管時應(yīng)注意避免過度旋轉(zhuǎn)造成樣品變性或降解,并影響后續(xù)實驗結(jié)果。
注意:超濾離心管中的濾膜一旦潤濕 后應(yīng)避免變干。如果在預(yù)清洗后不是立即使用,則讓液體保留在濾膜上,直到使用。6.使用方法:1).將超濾內(nèi)管插入所提供的一個微量離心管中。2).向超濾管內(nèi)管中加入不超過500 μL的樣本,并蓋上蓋子。3).將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中,讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個類似的超濾管平衡。4).以14,000 x g離心約10-30分鐘,具體時間取決于所使用超濾管的NMWL。5).離心結(jié)束后將整個超濾管從離心機中取出,取出內(nèi)管。6).為了回收濃縮后的溶質(zhì),將內(nèi)管倒過來插在-個干凈的微量離心管中。放在離心機中,讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個類似的超濾管進行平衡。以1 ,000 x g離心2分鐘,使?jié)饪s后的樣本從超濾內(nèi)管轉(zhuǎn)移到收集管中。超濾液可以保存在收集管中。超濾離心管還可用于檢測食品中的殘留物和污染物,以保障公眾健康。寧波再生纖維素離心管報價
使用超濾離心管時應(yīng)注意保持其穩(wěn)定性并避免操作失誤導(dǎo)致實驗失敗或損壞設(shè)備。山東10K超濾離心管廠家
離心管就是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。 蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,目前較常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復(fù)使用,使用一次就扔掉太浪費。以下是個人總結(jié)的使用方法和注意事項。離心超濾管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理。超濾離心管的選擇主要看你要截留那部分物質(zhì),就選擇比較小分子量小的,如果你要截留26KD的,你要的超濾管就要比26小。但兩者也要有一定的差距,比如,選擇20-25KD之間的就不合適,因為26的也可能會出去(這是由制造工藝決定的)。所以選擇20KD以下的超濾管比較合適。山東10K超濾離心管廠家
杭州邁恩科技有限公司致力于醫(yī)藥健康,是一家生產(chǎn)型的公司。公司業(yè)務(wù)涵蓋血清移液管,格柵膜,過濾膜,濾芯等,價格合理,品質(zhì)有保證。公司從事醫(yī)藥健康多年,有著創(chuàng)新的設(shè)計、強大的技術(shù),還有一批專業(yè)化的隊伍,確保為客戶提供良好的產(chǎn)品及服務(wù)。杭州邁恩立足于全國市場,依托強大的研發(fā)實力,融合前沿的技術(shù)理念,及時響應(yīng)客戶的需求。
樣本預(yù)處理是超濾離心管使用前不可或缺的一環(huán)。預(yù)處理的目的是去除樣本中的雜質(zhì)、調(diào)整pH值和鹽濃度,以確... [詳情]
2025-04-27