超濾離心管的常見(jiàn)問(wèn)題與解答,一:超濾離心管的膜材質(zhì)是什么?超濾離心管的膜材質(zhì)為特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而,蛋白吸附損失較小。二:如果要用超濾離心管的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少?按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。不保證超濾離心管不包含RNA酶,建議用0.1%DEPC在37度浸泡2小時(shí),以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q超純水洗滌除去。去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì),當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度(Critical Micelle Concentration、CMC)時(shí),去污劑分子會(huì)聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象,這有可能會(huì)影響去污劑的去除效果,具體的操作步驟請(qǐng)垂詢我們。超濾離心管在醫(yī)學(xué)圖像學(xué)中也具有重要意義,如MRI掃描、CT檢查等領(lǐng)域。鄭州小型超濾離心管工廠
玻璃離心管:使用玻璃管時(shí)離心力不宜過(guò)大,需要墊橡膠墊,防止管子破碎,高速離心機(jī)一般不選用玻璃管。離心管蓋子封閉性不夠好,液體就不能加滿(針對(duì)高速離心機(jī)且使用角轉(zhuǎn)子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔,影響感應(yīng)器正常工作。超速離心時(shí),液體一定要加滿離心管,因?yàn)槌x需要抽高真空,只有加滿才能避免離心管變形。塑料離心管:塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出樣本。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC (聚碳酸酯),PE (聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來(lái)說(shuō)比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易變形,抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)經(jīng)常購(gòu)買離心管。衢州高離心力離心管定做超濾離心管在醫(yī)學(xué)診斷和緩解中也具有重要作用,如血液透析、肝功能檢測(cè)等領(lǐng)域。
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用。 使用注意事項(xiàng) (1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。 (2)新買來(lái)的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過(guò)膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過(guò)管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。 (3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開(kāi)始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔,減小對(duì)膜的壓力。
超濾離心管應(yīng)用:1、組成部分:該裝置包括一個(gè)蓋子、一個(gè)過(guò)濾器和一個(gè)50ML的離心管。2、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座。①注意:為了避免在離心過(guò)程中損壞裝置,在旋轉(zhuǎn)前請(qǐng)檢查間隙。 3、帶有200微升(μL)的移液管,用于濃縮液回收適用性。①注意:該產(chǎn)品未經(jīng)消毒,只供一次使用,保質(zhì)期3年。為確保對(duì)預(yù)定用途的適用性,建議進(jìn)行初步的回收和截留試驗(yàn)。4、濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記,在HPLC之前去除蛋白質(zhì)。超濾離心管還可用于檢測(cè)空氣樣本中的微粒子、有機(jī)化合物等污染物,并進(jìn)行空氣質(zhì)量監(jiān)測(cè)和控制。
一提起蛋白質(zhì)濃縮、更換緩沖液,我們都會(huì)想起超濾。這是一種我們都很熟悉的膜分離技術(shù)。它可用來(lái)分離溶液中極小的顆粒和溶解的分子。這種方法的較大特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,只需要濃縮離心管和離心機(jī),即可圓滿完成我們的任務(wù)。與層析、透析等方法相比,超濾對(duì)被處理的分子更加溫和。它不需要有機(jī)萃取,就不會(huì)導(dǎo)致蛋白變性。這種方法非常高效,可同時(shí)濃縮和純化分子。操作可在低溫(比如冷庫(kù))下進(jìn)行。另外,快速、便宜,也是許多人青睞它的原因。濃縮離心管的操作很簡(jiǎn)單。選擇適當(dāng)?shù)臐饪s離心管,加入待處理的樣本,按照離心管的指示進(jìn)行離心操作,之后回收截留的樣本。在離心力的作用下,溶液中的小分子溶質(zhì)和溶劑透過(guò)超濾膜,被收集在濾過(guò)液收集瓶中,而大分子溶質(zhì)被超濾膜截留在濃縮離心管中。這種分離的主要依據(jù)是分子大小,但分子形狀和電荷等其他因素也會(huì)有影響。超濾離心管還可以用于檢測(cè)樣品中的微生物或細(xì)胞,并進(jìn)行分析和研究。寧波3K超濾離心管生產(chǎn)商
超濾離心管通常具有標(biāo)準(zhǔn)化設(shè)計(jì),使其易于與其他實(shí)驗(yàn)室設(shè)備集成使用。鄭州小型超濾離心管工廠
離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔,減小對(duì)膜的壓力。注意,一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開(kāi)離心機(jī),否則離心機(jī)出問(wèn)題時(shí),無(wú)法一時(shí)間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說(shuō)明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直)。在實(shí)際使用中,一般轉(zhuǎn)速開(kāi)的比說(shuō)明書里的要低,這樣可以延長(zhǎng)離心管的使用壽命。當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí),取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒(méi)變藍(lán)色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開(kāi)始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測(cè),繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。鄭州小型超濾離心管工廠
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超濾離心管具有多種容量和規(guī)格,以滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。在選擇時(shí),需綜合考慮樣本量、目標(biāo)分子濃度、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.. [詳情]
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2025-04-27